玉米黄素抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移的作用及其机制初探

目的观察玉米黄素对肺癌A549细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,初步探讨其机制。方法将肺癌A549细胞分为3组,空白对照组:不加玉米黄素和无水酒精;无水酒精组:只加无水酒精的对照组;玉米黄素组:加玉米黄素的无水酒精溶液。玉米黄素以不同浓度作用A549细胞72h,通过MTS法检测A549细胞增殖能力并绘制生长曲线,计算玉米黄素作用A549细胞48h时的半数致死量(IC_(50)=34.70μM)。经30μmol·L^(-1)玉米黄素作用48h后,通过transwell法检测A549细胞的侵袭和迁移能力,并通过Western blot法检测MAPK通路相关蛋白(c-Raf、Erk-1/2、MEK1/2)的表达水平。结果与空白对照组及无水酒精组相比,玉米黄素处理后A549细胞的增殖能力受到抑制(P<0.01),并随着浓度的增加,细胞增殖能力呈下降趋势。经玉米黄素处理后,与空白对照组及无水酒精组相比,A549细胞的侵袭和迁移能力也受到抑制(P<0.01),MAPK通路相关蛋白c-Raf、Erk-1/2、MEK1/2表达下降(P<0.01)。结论玉米黄素可以抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并呈剂量依赖性,其作用可能与抑制MAPK通路关键蛋白表达有关。

小干扰RNA下调GPX1基因对食管鳞癌EC9706细胞增殖及顺铂敏感性的影响

目的探讨靶向下调谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)对人食管鳞状细胞癌细胞株(EC9706)增殖和顺铂敏感性的影响。方法合成针对GPX1的siRNA,分别用Lipofectamine 2000脂质体瞬时转染人食管鳞状细胞癌细胞株EC9706。Western Blot法检测转染后GPX1蛋白表达,用MTS检测法测定转染后细胞的增殖活力和顺铂敏感性。结果 siRNA干扰EC9706细胞后在36、48、60及72 h对细胞增殖活性较对照组明显抑制(P<0.05)。经siRNA干扰GPX1表达下调,在由不同浓度的顺铂作用后同对照组相比,细胞对顺铂的敏感性明显上升(P<0.05),[IC50(si GPX1)=3.8μmol/L,IC50(阴性对照)=6.1μmol/L,IC50(空白对照)=6.9μmol/L]。结论 siRNA下调GPX1表达可以抑制人食管鳞状细胞癌细胞株EC9706的增殖能力,以及上调其对顺铂的敏感性。

微小RNA-21对食管癌肌球家族蛋白l表达的抑制作用

目的探讨在食管癌中微小RNA-21（miRNA，miR-21）靶向蒯控肌球家族蛋白1（TPMI）表达的能力。方法对10例食管癌标本、癌旁上皮标本，分别采用定量聚合酶链反臆（（1PCR）和Westernblot检测miR-21（10例）和TPMl表达（6例）；在食管癌细胞株EC109中，采用荧光素酶报道基因实验鉴定miR-21靶向调控TPMI表达的能力；在ECl09中，利用小干扰RNA（siRNA）抑制miR-21，采用Westernblot检测TPM1的表达。结果miR-21在10例食管癌组织中的相对表达量为5．86±1．12，癌旁组织为1．56±0．32；TPM1在6例食管癌组织中的相对表达量为0．42±0．28，癌旁组织为6．58±2．32，miR-21与TPM1表达呈负相关。荧光素酶报道基因实验巾，导入奸生利TPMl后阴性对照组TPM1相对荧光度数为4．36±0．97，而miR-21组为3．06±0．37，两者比较贮译有统计学意义（P〈0．05）；而导人突变型TPM1后，两者比较差异无统计学意义（P〉0．05），说明miR-21靶向抑制TPMI表达。siRNA抑制miR-21后，TPM1从0升到5．68，TPMI表达恢复。结论n食管癌中，miR-21靶向抑制TPM1的表达，可能通过TPM1介导食管癌的侵袭与转移.

维生素D3通过核因子-κB/谷胱甘肽过氧化物酶1途径抑制肺癌A549细胞的侵袭及迁移

目的观察维生素D3对肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将维生素D3以60 nmol/L的浓度作用A549细胞5 d,10 nmol/L的BAY11-7082作用A549细胞1 h,由靶向谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)的小干扰RNA(siRNA)转染A549细胞,通过Transwell法检测A549细胞的侵袭和迁移能力,通过蛋白质印迹法(Western blot)法检测核因子-κB(NF-κB)及GPX1蛋白的表达水平。应用GraphPad Prism进行数据统计分析及制作统计图,采用t检验。结果经维生素D3处理后,A549细胞迁移及侵袭能力明显下降[t=57.842,P(Blank)<0.01;t=10.291,P(AA)<0.05],并且NF-κB、GPX1表达降低。经NF-κB抑制剂BAY11-7082处理后,A549细胞迁移及侵袭能力明显下降(t=43.146,P<0.01),并且观察到NF-κB、GPX1表达降低。用RNA干扰法使GPX1表达降低后,A549细胞迁移及侵袭能力明显下降[t=37.659,P(Blannk)<0.01;t=11.772,P(Scramble)<0.05],但NF-κB无明显变化。结论维生素D3可通过NF-κB/GPX1途径抑制肺癌A549细胞的侵袭及迁移能力。