轴浆转运在神经再生中的作用

夹伤坐骨神经阻断标记蛋白在轴浆中的快、慢转运。3天后转运再现。第14天的转运距离与对照相似,说明再生神经的转运动能基本恢复。用快、慢转运测出的14天平均再生速度分别为1.77±0.14与1.96±0.07mm/d,比对照神经的正常生长速度快6.3—7倍,提示再生需要更多的转运物质。进一步发现再生神经中某些标记蛋白(慢转运波W1)的转运速度为10.25±0.66mm/d,约比对照快1倍,因此这些标记蛋白可能包含适应再生需要而加速转运的结构和功能物质。

神经退变和再生的构筑变化

将夹伤的大鼠坐骨神经分离成单根纤维,观察98d内轴突和许旺细胞的构筑变化过程发现,损伤既使轴浆转运阻断、积累的细胞器退变,也使髓鞘板层,特别是斯兰氏切迹撕裂、变形或侵入轴突。轴突或髓鞘虽可各呈单一的退变,但以两者并存多见。伤后1d即出现富含微管的再生芽,它被增殖的许旺细胞突起及其基底膜包绕,并逐步发育成熟。根据再生的特征性构筑变化,提出了再生芽、无髓和有髓纤维、斯兰氏切迹、朗氏结与神经小束的初见、发育和成熟高峰期的时间顺序。无髓纤维的发育成熟早于有髓纤维。

神经再生：问题和瞻望

本文根据神经再生研究的动向，提出神经元及其微环境对神经再生调控的一些基础性问题，并讨论了其发展前景。

标准、相关利益方与创新:全球知识经济下中国作用之演进

今天，中国正在向实现2020年建成“创新社会”的目标大踏步地迈进。中国社会的这种过渡对未来全球信息通讯技术及其他高科技领域有着深远的影响。中国科技战略的核心是积极发展本土创新（或称“自主创新”）。技术标准的发展已是中国实现该宏伟目标不可分割的一部分。中国的标准政策现在已成为国际商界、学术界及中国许多主要贸易合作伙伴政策制定者高度关注的对象。

神经系统老化问题

神经老化是复杂的生命现象。本文就神经退变和活性物质的代谢变异,介绍老化过程中的种属和分化差异,并着重从质膜损害和基因调节等方面讨论与神经老化机制有关的一些假说。

微管与轴突构筑重建

微管与轴突构筑重建甘思德（北京军事医学科学院基础医学研究所１００８５０）自１９２８年Ｃａｊａｌ发表其名著“神经系统退变与再生”以来，随技术和概念上的不断突破，对神经再生的认识已逐步深化。但在了解旧问题的背景上又面临许多新问题，致使神经损伤后的再生修复...

神经退变和再生过程中郎氏结构筑的变化

将夹伤的大鼠坐骨神经分离成单根纤维，在光镜、扫描和透射电镜下观察伤后９８天内郎氏结的 构筑变化。发现损伤使细胞器的轴浆转运阻断，积累的退变细胞器使结区的轴突外凸，郎氏结构筑 变形，髓鞘板层失序，轴膜崩解，积累的细胞器逸出，并看到便残存的郎氏结近心端构筑、由近心 端的母体神经和远心端的再生神经共同构筑的新生郎氏结、以及新生郎氏结的发育过程等特征性 图象。再生轴突中转运的微管等细胞器和施旺细胞中富含的线粒体、多聚核糖体进一步从形态学证 明了神经元和非神经元因素对神经再生的调控。

神经元胞浆快转运的亚细胞和分子机制

根据近年来微管参与在体转运的证明,利用视频增强反差光显微术对离体微管作为转运物质载体的直接动态观察以及动蛋白(kinesin)和胞质力蛋白(cytoplasmic dynein)两个以微管为底物的运动蛋白的发现,从微管内在极性、转运方向等角度,讨论了神经元胞浆快转运的亚细胞和分子机制及对转运模式的设想和进一步研究的可能途径。

人睫状神经营养因子的原核表达、纯化及其生物效应

人睫状神经营养因子（ｈＣＮＴＦ）克隆入ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α菌株中表达，重组蛋白以包含体的形式存在，表达量为菌体总蛋白的５０％左右。经比较发现用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包含体可溶解大量可溶性细菌蛋白，且包含体损失较小。在高浓度变性剂条件下进行ｓｅｐｈａｒｃｙｌＳ－２００凝胶过滤，解决了纯化中ｈＣＮＴＦ易聚合的问题，在低浓度变性剂条件下进行ＤＥＡＥ离子交换，有利于蛋白活性的保持。经两步纯化后得到均一性ｈＣＮＴＦ，纯度达９５％以上。在自然状态下使ｈＣＮＴＦ复性。纯化复性后的ｈＣＮＴＦ对无血清培养的鸡胚背根节神经元和脊髓腹角运动神经元有明显的维持存活和促进生长发育的生物效应。

神经再生过程中脊髓运动神经元β管蛋白基因表达的变化

损伤大鼠右侧坐骨神经后,SDS—PAGE电泳分析双侧腹角细胞中蛋白含量变化,发现损伤侧的管蛋白相对含量较对照侧增加了17％—121％。损伤后3—14d损伤侧腹角运动神经元中β管蛋白mRNA的原位杂交信号增强了27％—70％,β管蛋白mRNA的Northern杂交分析也显示基因表达的增强。

再生神经单根纤维中轴突和髓鞘构筑的图像分析

为进一步认识神经再生的规律,由夹伤的大鼠坐骨神经分离出单根神经纤维,用图像分析技术测定了98天再生过程中轴突与髓鞘的直径(厚度)、面积和体积等项构筑参数。发现再生早期受损伤的神经纤维生长较快,56～98天生长较缓。在98天的再生过程中,轴突和髓鞘的生长基本平行,从形态计量学的角度上,反映了神经再生中轴突与髓鞘的密切关系。这也是我们提出的神经再生受神经元和非神经元性因素共同调控的进一步佐证。

神经再生过程中神经组织的红外光谱分析

用傅里叶变换红外光谱仪分析了坐骨神经损伤后Ｌ４－６脊髓节段腹角区域红外光谱变化，观察结果表明，损伤后８小时至３天以及１０天损伤侧显示磷酸二酯在团ｖａｓＰＯ２－和ｖｓＰＯ２－的１２４０ｃｍ－１和１０８０ｃｍ－１谱线明显增强；而且损伤后１０天１０８０ｃｍ－１谱线增强幅度较大。提示损伤引发了神经组织核酸（ＤＮ和ＲＮＡ）合成的增加。显示酰胺Ⅰ（ａｍｉｄｅⅠ）的１６５２ｃｍ－１谱线于损伤后３天增强，而１天和１０天减弱，揭示损伤引起的神经元蛋白质含量和结构的变化是非常复杂的。

再生神经中微管、神经丝与轴突截面积的变化

用电镜及图象分析的方法研究了再生轴突中微管、神经丝与轴突截面积的变化,发现神经再生过程中微管及神经丝的密度增加,并与轴突截面积呈相关关系,而且微管的变化更早,更明显。由于微管参与了轴浆转运的机制,微管的增加提示其在神经再生中起了重要的作用。

大鼠坐骨神经钳伤后变性和再生过程中S—100蛋白的变化

选用Wistar雌性大鼠40只,分设正常、神经损伤(钳伤右侧坐骨神经干)、损伤对照组.运用免疫组化PAP方法对神经于内的S—100蛋白检测.染色结果经形态学观察及电子计算机图像处理系统分析结果表明:坐骨神经干内S—100蛋白含量与损伤后神经再生时间有密切关系,并观察到损伤后第5、7天,损伤神经侧S—100轴浆转运现象,推测S—100可能参于了周围神经系统再生微环境的变化,从而影响损伤神经元的存活和神经纤维的再生.

人神经营养素-3全长基因克隆

本文从ＰＣＲ技术入手，以人基因组ＤＮＡ为模板扩增出人神经营养素－３（ｈｕｍａｎｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎ－３，ｈＮＴ－３）全长基因，并对克隆至ｐＵＣ１８质粒中的ｈＮＴ—３基因做了全序列分析。序列分析结果表明，除ｈＮＴ—３中第１３０位编码ｐｒｅｐｒｏ－序列－９５位Ｌｅｕ密码子的第一个碱基外（Ｃ→Ｔ），其余序列同文献报道完全一致，改变的碱基并不影响其编码的氨基酸序列。

一种快速敏感检测特异性mRNA的原位杂交技术的研究

:本文介绍一种快速敏感的原位杂交方法。用光敏生物素标记管蛋白cDNA探针,经DNase I酶切成组织渗透性强适合原位杂交的短片段,作快速的原位杂交,再用胶体金标链亲和素系统检测杂交结果。整个过程操作方便,迅速,能保存较多的杂交信号,杂交结果清晰。

标记基因探针的快速简易制备

在基因探针制备过程中,常通过琼脂糖电泳分离目的DNA片段和载体,然后采用电洗脱、冻融等方法回收并纯化目的片段,再作同位素或非同位素标记。为减轻非特异性本底,往往还需要分离出标记探针,以去除游离标记物,整个过程比较繁琐费时。我们在工作中尝试了一种简便的方法,将探针的制备、回收。

再生神经轴突的图像分析

我们曾用^(3)H亮氨酸顺行轴浆转运和电镜技术等方法,系统观察了神经的再生过程。本实验又进一步将再生神经分离成单根轴突,用图像分析技术测定其直径、表面积和体积,以与用^(3)H亮氨酸轴浆转运测得的再生神经的长度相比较。用特制血管钳轧榨10秒,损伤大鼠右侧股方肌下缘处坐骨神经,电镜下可见损伤处轴突全部离断。0~98天后,活检损伤点两侧共10 mm的神经节段,戊二醛固定及锇酸着色后,分离出单根神经纤维。用Quantimet 970型图像分析仪测定损伤点近心端母体轴突和远心端再生轴突的直径(D),并按2π(1/2D)、π(1/2D)^(2)求出单位长度的表面积和体积。

损伤坐骨神经后脊髓腹角运动神经元中α管蛋白的免疫组化研究

损伤坐骨神经后脊髓腹角运动神经元中α管蛋白的免疫组化研究吴燕米瑞发刘红甘思德范明（军事医学科学院基础医学研究所）在哺乳动物周围神经中应答神经再生的特点之一是细胞骨架蛋白的合成、表达及轴浆转运的变化，这种变化特点与神经元细胞骨架蛋白的结构重建密切相关，...

钙调素基因在低氧大鼠脑皮质神经细胞中表达的变化

用原位杂交技术检测了钙调素基因（ＣａＭ－ｃＤＮＡ）在急性低氧、低氧适应和常氧对照大鼠脑皮质神经细胞内表达的变化，以图像分析所得胞体金颗粒面积（ａｒｅａ）和积分光密度（Ｉ·ＯＤ）表示基因表达水平。与常氧对照组比，急性低氧组的ａｒｅａ和Ｉ·ＯＤ分别升高５０．１％（Ｐ＜０．０１）和４５．９％（Ｐ＜０．０１），低氧适应组的ａｒｅａ和Ｉ·ＯＤ分别升高６８．６％（Ｐ＜０．０１）和６０．０％（ｐ＜０．０１）；与急性低氧组比，低氧适应组的ａｒｅａ和Ｉ·ＯＤ分别升高５．６％（ｐ＜０．０５）和９．７％（Ｐ＜０．０１）。结果提示，低氧可引起ＣａＭ基因表达增强，提高ｍＲＮＡ转录水平，而低氧适应的作用更明显。