凤丹牡丹二氢黄酮醇-4-还原酶基因克隆及表达特性分析

以凤丹种皮为材料,克隆花青素生物合成中的关键基因DFR,并进行功能验证。结果表明,凤丹DFR基因含有长度为1092 bp的开放阅读框(ORF),共编码364个氨基酸。其中,凤丹DFR蛋白的相对分子量为40796.17 u,理论等电点(PI)为5.76。实时荧光定量分析凤丹牡丹种子4个发育阶段的PoDFR基因表达水平,结果表明,在凤丹种子发育过程中,PoDFR基因的表达水平先增加后减少,在S2时期达到最高。构建PoDFR基因的原核表达载体并在大肠杆菌中表达以获得PoDFR的原核表达蛋白。体外酶促反应和高效液相色谱法表明,PoDFR蛋白可以催化二氢槲皮素合成无色花青素,通过与PoANS蛋白结合合成花青素,证明PoDFR基因具有相应的功能活性。

不同花色牡丹品种花瓣色素含量及成分分析

以分属白、粉、红3个色系的6个牡丹品种花瓣为试材,采用薄层层析色谱法(TLC)、紫外-可见分光光度计(UV)和高效液相色谱仪-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)研究不同花色牡丹品种花瓣中的色素含量,并进行了定性分析。结果表明:粉色和红色系牡丹中检测出2种花青苷,分别是矢车菊素-3,5-二葡糖苷和芍药花素-3,5-二葡糖苷,白色系牡丹中未检测到花青苷类物质,其中矢车菊素-3,5-二葡糖苷在粉色系牡丹中含量较高,而红色系中总黄酮和总花青苷的含量最高。

海棠锈病病菌特征观察及其冬孢子萌发培养

以海棠锈病病菌为研究对象,通过直接观察、显微结构观测和荧光染色等方法,对海棠锈病病菌特征进行观测,并对锈菌冬孢子进行萌发培养试验。结果表明:该锈菌存在冬孢子、担孢子、性孢子、锈孢子4种孢子类型。其中冬孢子堆生于圆柏瘿瘤上,遇水后萌发产生担孢子,担孢子侵染海棠叶片后产生性孢子、锈孢子;冬孢子在无菌水和海棠叶片浸出液中均可萌发产生担孢子,培养10h后冬孢子累计萌发率基本达到饱和点,叶片浸出液中培养的冬孢子累计萌发率略高于无菌水。