基于BOPPPS结合微课教学模式在乳腺外科护理带教中的应用研究

目的:探讨基于BOPPPS结合微课的教学模式在乳腺外科实习中的教学效果。方法:选取2022年3月—2023年5月乳腺外科实习护生118名,按照来科实习时间的先后顺序分为观察组和对照组,每组59名。观察组采用BOPPPS结合微课教学模式,对照组采用传统教学模式,最后对两组护生的理论知识、操作技能、自主学习能力和教学满意度进行评价。结果:观察组护生的理论知识和临床技能考核成绩、自主学习能力、教学满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:基于BOPPPS结合微信的教学模式增强了学习效果,提高了护生的自主学习能力及教学满意度。

个案追踪管理模式对乳腺癌化疗患者手足综合征的发生及患者生命质量、焦虑和抑郁的影响

目的探讨个案追踪管理模式对乳腺癌(Breast Cancer,BC)化疗后患者手足综合征(Hand-Foot Sydrome,HFS)的发生及患者生命质量和焦虑、抑郁的影响。方法选取某院2022年1—10月收治的乳腺癌新辅助化疗患者150例为研究对象,随机分为对照组和试验组,各75例。两组均接受相同化疗方案和常规护理,试验组同时采用个案追踪管理模式进行随访教育。结果试验组HFS的发生率为26.67%,低于对照组的45.33%(P<0.05)。干预后试验组生理状况、情感状况、功能状况、附加关注4个方面均优于对照组(P<0.05);干预后试验组抑郁得分低于对照组(P<0.05)。结论采用个案追踪管理模式对乳腺癌化疗患者进行随访教育,能有效降低HFS的发生率和严重程度,改善患者生命质量和抑郁情绪。

曲格列酮对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA 1表达及胆固醇流出的影响

目的:研究曲格列酮对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达及胆固醇流出的影响。方法:采用液体闪烁计数法测定曲格列酮处理后THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出。用RT-PCR和Western blotting的方法检测曲格列酮处理后THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 mRNA水平和蛋白质水平的变化。结果:经曲格列酮处理后,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的胆固醇流出具有时间依赖性的增加,从0h的1．82%上升到24h的7．61%。在mRNA水平和蛋白质水平ABCA1也均随着曲格列酮作用时间增加而表达上调。结论:曲格列酮能增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达和胆固醇流出。

Stathmin蛋白:一个潜在的肿瘤标志物

人stathmin也称原癌基因蛋白18(oncogene protein 18,Op18),是一种广泛存在于细胞质的蛋白质,其相对分子质量约为19×103,可与微管蛋白结合,参与微管和纺锤体的组装;与细胞的增殖、分化、再生和运动均有关,并具有信号活性调节的功能。近年来有研究发现,stathmin在多种肿瘤中高表达,并可通过调节微管的解聚,促进肿瘤细胞的运动及侵袭。Stathmin翻译后修饰状态的改变,可影响与p53蛋白的相互作用,参与肿瘤的发生发展。目前单独或者联合化疗药物使用的抗stathmin效应剂已用于某些肿瘤的治疗。虽然stathmin与肿瘤病因学的内在联系尚不十分清楚,但其作为一个潜在的肿瘤标志物或药物靶点值得进一步研究探讨。

Op18:一个潜在的肝癌诊断标志物

目的探讨人原癌基因蛋白18(Op18)在肝癌细胞和组织中的表达及临床意义。方法应用RT-PCR、Western blot和免疫组化染色法检测常见肝癌细胞和88对配对肝癌组织及癌旁组织中Op18的表达。结果 Hep3B、SMMC-7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6等常见肝癌细胞株中均见Op18表达;配对肝癌及癌旁组织中,RT-PCR发现肝癌组织中Op18阳性率达68.75%(11/16),Western blot发现Op18的阳性率为56.25%(9/16),免疫组化检测发现肝癌组织中Op18的阳性率为65.28%(47/72),P<0.05;Op18的表达与肿瘤大小数目、临床分化、门脉侵犯和TMN分期相关(P<0.05)。结论 Op18可能是一个潜在的肝癌诊断标志物。

Oncoprotein 18在肝癌侵袭转移过程中的作用

目的:探讨原癌蛋白18(Oncoprotein 18,Op18)在肝癌侵袭转移过程中的作用机制.方法:采用R N A干扰,抑制人肝癌细胞HCCLM3中Op18的表达,RT-PCR和Westernb l o t评价干扰效率;通过细胞粘附分析、体外Transwell分析法检测Op18表达缺失后对HCCLM3细胞粘附、运动和侵袭能力的改变;RT-PCR和免疫组织化学分别在48例未伴转移的肝癌组织和48例伴转移的肝癌组织中解析Op18表达与肝癌侵袭转移的关系.结果:RT-PCR和Western blot结果显示:在HCCLM3细胞中行RNAi后Op18表达被有效抑制,抑制率达到80%以上;Op18表达缺失后,在不同时间点(20、40和60 min)实验组细胞粘附能力(0.616±0.057、0.740±0.0713和1.001±0.083)较阴性对照组(0.944±0.068、1.196±0.115和1.441±0.053)明显下降(P<0.05);Transwell实验结果提示:经RNAi后实验组细胞运动、侵袭能力(运动:0.145±0.011,侵袭0.127±0.008)较阴性对照组(运动:0.206±0.008,侵袭:0.168±0.012)显著降低(P<0.01);分别在伴转移和未伴转移的肝癌组织中检测Op18的表达,RT-PCR(Op18与GAPDH相对比值:0.560±0.128vs 0.414±0.086)和IHC(积分吸光度值为:624.771±100.032 vs 413.786±71.833)实验结果均提示Op18在伴转移的肝癌组织中的表达更高(P<0.01).结论:Op18在肝癌的侵袭转移过程中发挥重要作用.

几种蛋白质含量测定方法的比较研究

目的 :为培养的肝细胞及神经元蛋白质含量测定选择最佳方案。方法 :采用三种较为常用的蛋白质含量测定方法 :Bradford、Lowry和Bio-radDC法分别对培养的小鼠肝细胞、神经元细胞的全细胞蛋白质提取样品进行测定 ,并对结果进行比较。结果 :蛋白质含量测定及重复性实验对比分析可见 ,用Bradford、Lowry和Bio -radDC法测定肝细胞蛋白质样品 ,结果均较稳定 ;测定神经元蛋白质样品 ,Bradford和Bio -radDC法较稳定 ,Lowry法不稳定。结论 :肝细胞蛋白含量测定宜采用Bradford法 ,神经元蛋白含量测定宜采用改良Bio -radDC法。

以学生为主体的生物化学探索性实验教学实践

在生物化学实验教学中运用探索性实验教学模式,让学生选定实验课题作为欲解决的科学问题,并以小组为单位在教师的指导和监督下设计实验方案、进行实验操作、记录实验现象和结果,并对实验成败进行分析。从而培养医科大学生的创新能力,激发主观能动能力,提高学生的实践能力。

蛋白质组学技术与肿瘤研究

蛋白质组学作为后基因组研究的一个重要组成部分 ,借助蛋白质组学研究技术 ,可在蛋白质水平进一步揭示肿瘤的发病机制 ,筛选、鉴定肿瘤特异性标记和特异性抗原以及有效的药物靶蛋白。

卵巢癌组织蛋白双向电泳分析技术的建立

目的初步建立卵巢癌蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法提取卵巢癌肿瘤组织中蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,对关键环节如样品处理、上样量分析和水化等进行一系列优化。进一步采用垂直SDS-PAGE进行第二相分离,银染显色、图像分析或软件分析电泳图谱。结果通过实验条件的反复筛选获得了较为满意的卵巢癌双向凝胶电泳图谱。结论本文初步建立了卵巢癌蛋白质组双向电泳分析方法,具有较好的分辨率和重复性,为进一步研究卵巢癌的差异表达及特异性分子标志物的筛选奠定了基础。

稳定表达stathmin Ser25磷酸化位点突变的肝癌细胞株的建立

目的:建立稳定表达stathmin Ser25磷酸化位点点突变(stathmin S25A)的肝癌细胞株。方法:采用PCR定点突变的方法构建stathmin S25A的重组质粒,并用酶切和测序技术鉴定突变结果;采用脂质体转染的方法,筛选建立stathmin野生型(wt)和突变型(S25A)的肝癌细胞HCCLM6,用Western blotting进行鉴定。结果:定点突变构建stathmin S25A的重组质粒,测序证实stathmin 25位丝氨酸突变为丙氨酸。将stathmin wt和S25A转染HCCLM6,筛选建立稳定表达的肝癌细胞株,Westernblotting检测发现stathmin pS25在stathmin S25A细胞中的表达较stathmin wt和对照组细胞明显下降(P<0.05)。结论:建立了稳定表达stathmin S25A的肝癌细胞株,为研究stathmin位点磷酸化在肝癌发病中的分子机制提供实验模型。

槲皮素对LPS延迟中性粒细胞自发性凋亡效应的抑制作用

目的 :研究槲皮素对接受细菌脂多糖 (LPS)刺激的中性粒细胞 (PMN)自发性凋亡的影响 ,探讨槲皮素的抗炎作用机制。方法 :以人外周血PMN为研究对象 ,选择光镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况 ,对裂解的片段化DNA进行定量 (二苯胺测定法 )和定性 (琼脂糖凝胶电泳 )分析。结果 :槲皮素 (1～ 10 0 μmol/L)对PMN的自发性凋亡率并无影响 ,但却能部分恢复由LPS所延迟的PMN自发性凋亡进程。当槲皮素的浓度为 4 0 μmol/L时 ,其恢复作用达到最大。 结论 :槲皮素对LPS延迟PMN自发性凋亡的效应产生了抑制作用 ,减轻了因预激因子活化PMN而加重的炎症反应 ,部分揭示了槲皮素的抗炎作用机制。

神经元蛋白质磷酸化修饰分析方法的初步研究

目的 建立一种对神经细胞中的磷酸化蛋白质进行分离分析的方法。方法 培养新生乳小鼠神经细胞 ,加入 32 P- Na H2 PO4 2 .78× 10 6 Bq/ ml,37℃孵育 1.5 h。刺激组分别加入表皮生长因子 (EGF) 2 0 ng/ m l或胰岛素10 0 nm ol/ L,对照组加入等量的培养基 ,作用不同时间后液氮终止反应。裂解细胞 ,用 Bio- Rad DC Protein Assaykit测定细胞蛋白质含量 ,双向电泳分离细胞蛋白。放射自显影。结果 1双向电泳自显影图谱显示近数十个蛋白质斑点 ,绝大部分集中于 p H偏酸性和中性区域 ,p H4 .6～ 6 .5 ,其相对分子质量主要介于 2 0× 10 3～ 130× 10 3之间。2 EGF、胰岛素刺激不同时间后虽出现有磷酸化蛋白质斑点的增加或消失 ,但更多表现为某些磷酸化蛋白质斑点灰度的增强或减弱。 3对比分析发现 ,放射自显影图谱中只有少数斑点出现在双向电泳 Coom assie Brilliant BlueR- 2 5 0染色图谱中 ,提示神经细胞中的大多数磷酸化蛋白质为低丰度蛋白。结论 采用本研究建立的双向电泳和放射自显影技术可对神经细胞中的蛋白质可逆磷酸化修饰状态进行较为全面、动态的分析 ,方法灵敏、特异性强 。

去甲斑蝥素体外抑制人胰腺癌细胞株PANC-1增殖的实验研究

目的研究去甲斑蝥素(NCTD)体外抑制人胰腺癌细胞株PANC-1的增殖作用。方法以不同浓度NCTD处理PANC-1细胞24 h后,采用MTT法检测其对PANC-1细胞的生长抑制作用;Hoechst 33258染色观察PANC-1细胞形态的变化;Western blot印迹法检测NF-κB p65和AKT蛋白的表达。结果NCTD可导致处理的细胞增殖速度减慢,且抑制效应随药物剂量的增加而增强,细胞出现典型凋亡形态学改变,NF-κB p65和AKT蛋白的表达均出现明显下降(P<0.01)。结论去甲斑蝥素能明显抑制胰腺癌PANC-1细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能是通过下调NF-κB p65和AKT的表达来实现的。

stathmin蛋白促进人SMMC-7721肝癌细胞增殖侵袭能力

目的构建微管解离蛋白stathmin过表达的人SMMC-7721肝癌细胞株,并探讨stathmin过表达对肝癌细胞增殖侵袭的影响。方法采用脂质体将Flag-pcDNA3.1-stathmin重组质粒和Flag-pcDNA3.1空质粒分别转染人SMMC-7221肝癌细胞,抗生素加压筛选,构建稳定表达stathmin的SMMC-7721细胞(实验组),以稳转空质粒的细胞为对照组,Western blot对建系细胞进行鉴定。采用CCK-8和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期;体外细胞运动侵袭实验(Transwell)测定细胞的运动、侵袭能力。结果实验组中stathmin的表达0.76±0.12较对照组0.16±0.05明显增加(P<0.05),成功构建了过表达stathmin的人SMMC-7721肝癌细胞株;CCK-8和软琼脂克隆形成实验显示,实验组的细胞增殖较对照组明显增加(A4500.60±0.05 vs.0.29±0.03,P<0.01);实验组细胞凋亡降低[(5.80±0.33)%vs.(11.57±1.09)%,P<0.05],细胞周期阻滞在G2/M期;Transwell实验结果证实,与对照组比较,实验组细胞运动和侵袭能力均显著加强[运动实验透膜细胞数:(54.03±7.21)个vs.(130.45±14.13)个;侵袭实验透膜细胞数:(17.75±2.52)个vs.(57.76±8.50)个],差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 stathmin的过表达能促进人SMMC-7721肝癌细胞的增殖侵袭能力。

法尼酯X受体对脂肪酸合酶表达的影响

目的探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对脂肪酸合酶(fatty acid synthetase,FAS)表达的影响。方法用FXR激动剂CDCA作用人肝癌细胞株(HepG2),应用RT-PCR和Western blotting分别从mRNA水平和蛋白质水平检测FAS的表达情况。结果用不同浓度的CDCA(25、50、75μmol/L)分别作用于HepG2细胞,6、12、24、48h后,FASmRNA和蛋白质水平呈时间和剂量依赖性下调。结论FXR激动剂可抑制脂肪酸合酶的表达。

早期肝癌甲胎蛋白阴性患者血清标志物的筛选和验证

目的:筛查甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)阴性的肝癌患者和肝硬化患者血清中的差异表达蛋白。方法:选择6例AFP阴性的肝癌患者和6例AFP阴性的肝硬化患者。应用MARS系统分离获得各组血清标本中的低丰度蛋白,采用双向荧光差异凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)技术筛选两组间有表达差异的蛋白,并用蛋白质印迹法加以验证。结果:2D-DIGE技术共鉴定出29种差异蛋白,其中AFP阴性肝癌患者血清中高表达的蛋白有22种,低表达的蛋白有7种。差异蛋白包括激肽原1、四连接素、基膜聚糖蛋白、补体1r和锌α2糖蛋白等。蛋白质印迹法证实,AFP阴性的肝癌患者血清中锌α2糖蛋白表达水平明显低于AFP阴性的肝硬化患者(P<0.05),同DIGE结果一致。结论:采用蛋白质组学技术筛查出的一系列在AFP阴性肝硬化和AFP阴性肝癌患者血清中有表达差异的蛋白有望作为AFP阴性肝癌患者早期诊断和辅助诊断的分子标志物。

胰岛素及其受体在肾缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨肾缺血再灌注 (IR)过程中胰岛素及其受体的作用。方法 采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。将大耳白兔分为对照组、单纯缺血再灌注组 (IR组 )、胰岛素处理组 (Ins+IR组 ) 3组 ,Ins+IR组再灌注的同时给予胰岛素溶液 (Ins3U/ kg.wt) ,而对照组和 IR组则给予等量生理盐水。测定各组动物的血糖、血清胰岛素水平及肾组织胰岛素受体高、低亲和力常数 (Kd1 ,Kd2 )和高、低亲和力受体最大结合容量(Bmax1 ,Bmax2 )。结果 缺血再灌注 2 h后 ,3组动物血糖值、血清胰岛素水平均较术前显著升高 (P<0 .0 5 ) ,IR组尤为显著 ,IR组 Kd1 、Kd2 、Bmax1 、Bmax2 均较对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ,Ins+IR组仅 Bmax2 较对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ;4 8h后 ,3组动物血糖值恢复至正常水平 ,对照组胰岛素水平恢复至正常水平 ,IR组也较 2 h时明显下降(P<0 .0 5 ) ,但仍明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,3组动物 Kd1 、Bmax1 值无差异 ,Ins+IR组 Bmax2 仍维持较低水平 (P<0 .0 5 ) ,Ins组 Kd2 明显高于对照组 (P<0 .0 5 )。结论 在肾 IR过程中 ,内源性胰岛素的作用减弱 ,外源性胰岛素对肾组织高亲和力受体位点无下降调节作用 ,但胰岛素可引起低亲和力受体数目的下调。胰岛素减轻 IR肾损伤的作用主要是?

法尼酯X受体对肝脂酶表达及活性的影响

目的探讨法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)对肝脂酶(hepatic lipase,HL)表达及活性的影响。方法用FXR激动剂CDCA作用人肝癌细胞株(HepG2),用RT-PCR和Western blotting检测HL的表达情况。此外,用FXR激动剂CDCA处理C57BL/6小鼠,采用总脂酶测试盒检测HL的活性。结果用不同浓度的CDCA(25、50、75μmol/L)分别作用HepG2细胞,6、12、24、48h后HL的mRNA和蛋白质水平呈时间和剂量依赖性下调。同时,用不同浓度的FXR激动剂CDCA(10、20、50、90、150mg/kg)处理C57BL/6小鼠7d后,测定小鼠HL的活性呈剂量依赖性下降。结论FXR激动剂可抑制肝脂酶的表达及活性。

类法尼醇X受体在巨噬细胞中下调单核细胞趋化蛋白1的表达

目的研究小鼠巨噬细胞株ANA-1中类法尼醇X受体的表达情况,并进一步研究类法尼醇X受体天然配体鹅脱氧胆酸在ANA-1中对单核细胞趋化蛋白1表达的影响,以探讨类法尼醇X受体在动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应检测类法尼醇X受体在ANA-1细胞中的表达,及鹅脱氧胆酸处理后单核细胞趋化蛋白1的转录水平,Westernblot检测类法尼醇X受体的表达及其激活后对自身蛋白表达的调节,以及单核细胞趋化蛋白1蛋白的表达水平。结果类法尼醇X受体在ANA-1中表达,并依赖鹅脱氧胆酸浓度自我上调,鹅脱氧胆酸能显著下调单核细胞趋化蛋白1的表达水平(P<0.05)。结论类法尼醇X受体在小鼠巨噬细胞株ANA-1中组成型表达并呈配体浓度依赖性自我上调,类法尼醇X受体激活后可通过直接或间接方式下调单核细胞趋化蛋白1的表达。