基于HPLC指纹图谱和网络药理学的祛瘀散结胶囊质量标志物预测

基于指纹图谱和网络药理学预测祛瘀散结胶囊质量标志物。采用HPLC法建立祛瘀散结胶囊指纹图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度评价,同时进行化学模式识别分析,筛选批次间差异的主要标志性成分,结合网络药理学对筛选出的标志性成分进行靶点和通路分析。结果表明,建立了14个共有峰的指纹图谱;通过对照品指认了7个共有成分,经化学模式识别,筛选出4个差异性成分,分别为迷迭香酸、三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1);结合网络药理学,认为4种化合物可以作为祛瘀散结胶囊潜在的质量标志物。建立的指纹图谱分析方法简单可行,结合网络药理学得到相关靶点和通路,可作为潜在的药效关联物质,为后期的药效机制研究奠定基础。

桃仁化学成分、药理作用及质量标志物的预测分析

桃仁为我国传统常用活血类中药材,主产于四川、陕西、河北、山东、贵州、湖北等省。以山东产质优。桃仁中化学成分类型丰富,包括挥发油类、氰苷、黄酮类、脂肪酸类、甾醇类、桃仁蛋白等成分,传统认为桃仁氰苷中的苦杏仁苷是其特征性成分。对桃仁资源、化学成分、主要药理活性进行总结,并在此基础上,分析挥发油、氰苷、黄酮、桃仁蛋白成分与药效的关系,分析传统功效、现代药理作用与化学成分之间的关系。建议对桃仁进行挥发油、氰苷、黄酮类、脂肪酸类等成分的定性、定量分析,进一步聚焦其中甾醇类、桃仁蛋白类等成分化学物质组的深入研究,为明确桃仁的质量标志物(quality marker, Q-marker)和制定科学的质量标准提供基础。

壮药狗蚁草化学成分研究

目的:研究壮药狗蚁草的化学成分。方法:通过硅胶、聚酰胺、凝胶等柱色谱及重结晶方法进行分离和纯化,根据理化性质及波谱数据对化合物结构进行鉴定。结果:从狗蚁草乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为:槲皮素(1)、豆甾醇(2)、(2S,3S,4R,10E)-2-[(2R)-2-hydroxyl-tetracosanoylamino]-10-octadecene-1,3,4-triol(3)、2,2′-氧代双(1,4-二叔丁苯)(4)、(2S,3S,4R)-2-[(2′R)-2′-hydroxytetracosanoylamino]-1,3,4-octadecanetriol(5)、木犀草素(6)、大黄酚(7)、大黄素(8)、大黄素-6-甲醚(9)、三十烷酸(10)、poke-weed cerebroside(11)、己内酰胺(12)、1-O-D-glucopyranosyl-(2S,3R,9E,12E)-2-N-[(2R)-hydroxytetracosanoyl]-octadecasphinga-9,12-dienine(13)、牡荆素(14)、异牡荆素(15)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

壮药黄皮血藤化学成分研究

目的:研究壮药黄皮血藤的化学成分。方法:采用硅胶、聚酰胺、MCI、Sephadex LH-20等柱色谱方法对黄皮血藤乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行分离、纯化,通过理化性质检识结合MS、1H-NMR和13C-NMR等波谱学方法鉴定化合物结构。结果:从黄皮血藤中分离得到12个化合物,分别鉴定为:β-谷甾醇(1)、羽扇豆醇(2)、二十四烷醇(3)、桦木酸(4)、硫黄菊素(5)、7,4′-二羟基黄酮(6)、刺芒柄花苷(7)、芹菜素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、β-胡萝卜苷(9)、(2S)-1-O-heptatriacontanoyl glycerol(10)、豆甾醇(11)、刺芒柄花素(12)。结论:其中,化合物3~5、8~10为首次从该植物中分离得到。

HPLC法测定丹参不同炮制品中5种成分的含量

建立了高效液相色谱法测定不同丹参炮制品中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮ⅡA5种成分的含量,比较其成分含量差异,揭示中药炮制前后物质基础的变化规律。采用HPLC法,色谱柱为CORTECS C18柱(4.6 mm×50 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4mL/min,检测波长为270 nm,柱温为25℃,进样量为5μL。结果表明,各炮制品中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮ⅡA的含量分别为1.93~3.38 mg/g、2.95~4.89 mg/g、41.15~50.73 mg/g、0.55~2.04mg/g、0.43~0.66 mg/g,且R≥0.9997,被测活性成分的峰面积与浓度呈良好线性关系,精密度、稳定性及重复性试验的RSD均<3.00%,平均加样回收率为95.43%~99.20%。丹参经过炮制后所测成分含量均有所下降,不同炮制品中5种成分的含量存在差异,其中麸炒炮制样品中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的含量最高;清炒炮制样品中丹酚酸A含量最高,盐烘炮制样品中丹参酮ⅡA含量最高,说明炮制工艺对中药丹参各成分影响不同。该方法简便、结果准确,适用于测定丹参不同炮制品中的活性成分含量。

紫苏叶HPLC指纹图谱建立及其抗流感病毒活性谱效关系研究

目的研究紫苏叶Perillae Folium的化学成分,化学模式识别法建立紫苏叶HPLC指纹图谱,并研究其抗流感病毒活性,为其进一步开发利用提供依据。方法采用超高效液相色谱-三重四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,鉴定紫苏叶的主要化学成分,建立HPLC指纹图谱,匹配共有峰并进行归属,通过对照品比对指认6种化学成分,使用SPSS 22.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析和主成分分析(principal component analysis,PCA),测定其抗流感病毒生物效价,并通过灰色关联分析(gray correlation analysis,GCA)建立其谱效关系。结果从紫苏叶中鉴定出47个化合物;选取了19个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,通过聚类分析可将15批紫苏叶分为2类,PCA与聚类分析结果基本一致;15批不同产地的紫苏叶样品均具有抗流感病毒活性,其生物效价为6.21、5.58、4.19、8.19、6.09、5.82、6.10、5.36、5.54、10.86、4.74、5.78、3.78、7.98、5.65 U/mg。19个共有峰与抗病毒活性存在一定的关联度(0.82~0.97),各共有峰代表的化学成分对其抗病毒活性贡献的大小顺序为峰6(咖啡酸)、19(木犀草素)>2、8、9、12(阿魏酸)>4、5、15(芹菜素-7-O-二葡萄糖醛酸苷)>7、13>11>3、10、17>1、16(野黄芩苷)>14>18(迷迭香酸)。结论构建的紫苏叶抗流感病毒活性生物效价测定方法能关联其临床功效,而UPLC-Q-TOF-MS/MS法能快速鉴定紫苏叶的成分,结合指纹图谱和化学模式识别,发现紫苏叶抗病毒作用为“多成分”共同起效的结果,这将为其质量控制提供科学依据。

基于UPLC-Q TOF MS/MS和HPLC的祛瘀散结胶囊的化学成分分析及其多成分含量测定

目的:应用液质联用法分析祛瘀散结胶囊的化学成分,构建祛瘀散结胶囊中有效成分的含量测定方法。方法:采用超高效液相色谱-三重四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q TOF MS/MS)技术,色谱柱为Hypersil Gold C_(18)(100 mm×2.1 mm, 1.9μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.4 mL·min^(-1),柱温40.0℃,质谱数据采集为负离子模式扫描;通过数据库匹配、元素组成和碎片结构分析,鉴定祛瘀散结胶囊中的主要化学成分。另外,采用HPLC,色谱柱为Ultimate?AQ-C_(18)(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长203 nm;以外标法计算,测定了11个不同批次祛瘀散结胶囊中的柚皮苷、新橙皮苷、三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1)的含量,并以人参皂苷Rg_(1)为内参物,建立一测多评法。结果:从祛瘀散结胶囊中鉴定出29个化合物;外标法测得柚皮苷、新橙皮苷、三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1)的含量分别为0.484~1.097、0.341~0.618、1.685~2.399、5.748~8.386、3.868~5.898 mg·g^(-1),一测多评法测得的柚皮苷、新橙皮苷、三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rb_(1)的含量分别为0.516~1.153、0.372~0.667、1.794~2.580、4.373~6.690mg·g^(-1),一测多评法计算值与外标法实测值之间相对误差≤8.9%。结论:UPLC-Q TOF MS/MS法能快速鉴定祛瘀散结胶囊的化学成分;建立的外标法稳定可靠,可用于祛瘀散结胶囊的质量控制;以人参皂苷Rg_(1)为内参物建立的一测多评法有较好的可行性,适用于祛瘀散结胶囊日常生产的含量测定。

仲景名方白头翁汤的指纹图谱及功效关联物质预测分析

目的研究仲景名方白头翁汤的化学成分,建立HPLC指纹图谱,并结合网络药理学对其功效关联物质进行机制预测分析,为白头翁汤质量控制提供参考依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOFMS/MS)对白头翁汤的化学成分进行定性分析,建立HPLC指纹图谱,进行相似度评价,匹配共有峰并进行色谱峰归属。基于质谱鉴定和指纹图谱筛选白头翁汤的有效成分,通过网络药理学建立了"组分-靶点-通路"网络,进一步佐证白头翁汤有效成分选择的合理性。结果通过数据库匹配、元素组成和碎片结构分析,共鉴定出21种化合物;在建立15批白头翁汤样品的指纹图谱中,标定16个共有峰,通过对照品指认出秦皮甲素(峰2)、秦皮乙素(峰5)、秦皮素(峰7)、白头翁皂苷B4(峰15)、白头翁皂苷B5(峰16)、黄柏碱(峰3)、黄连碱(峰11)、小檗碱(峰13)、巴马汀(峰14)9个色谱峰,各批次样品相似度均>0.90,且16个共有峰均能归属到白头翁、黄连、黄柏、秦皮4味药材;通过网络药理学对所指认的9个药效成分进行机制预测,富集的通路中含癌症通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路以及缺氧信号转导-1(hypoxia signaling-1,HIF-1)信号通路等,这些通路可能与白头翁汤治疗疾病的作用相关。结论 UPLC-Q-TOF-MS/MS法能快速鉴定白头翁汤的成分,建立的白头翁汤指纹图谱分析方法简便可行,结合网络药理学发现白头翁汤9个成分与白头翁汤功效属性密切相关,为白头翁汤的质量控制提供参考,同时也为白头翁汤药效关联物质基础的研究及作用机制的探索奠定基础。

基于指纹图谱结合化学模式识别及多成分定量的千斤拔质量评价研究

目的 建立千斤拔Moghania Radix HPLC指纹图谱及多成分定量方法,为其质量控制提供参考。方法 采用XBridge■C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为固定相,以乙腈-0.1%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),检测波长260 nm,柱温30℃;对24批千斤拔(编号为S1~S24,其中S2~S9为采集的新鲜全株植物,实验室低温干燥而得,其余样品为市场购买药材或饮片)构建指纹图谱,同时测定相关成分的含量,并结合聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘法进行全面评价。结果 24批不同来源千斤拔指纹图谱共标定11个共有峰,指认出染料木苷、6″-O-丙二酰基染料木苷、染料木素。相似度计算结果表明,各批次相似度在0.707~0.981;聚类分析将24批千斤拔分为2类,S2~S5、S6、S8、S9号样品(均为新鲜全株植物)聚为一类,其他17份样品聚为一类;经主成分分析,主成分1~4是影响样品质量评价的主要因子,选取前4个主因子对不同产地的千斤拔进行评分,24批样品的综合得分在5.34~-3.61,说明各批次质量差异相对较大;样品中综合得分最高是S4,各饮片样品的综合得分较低。24批样品中染料木苷、6″-O-丙二酰基染料木苷、染料木素质量分数分别为0.10~0.57、0.11~2.85、0.15~0.71 mg·g^(-1),不同批次之间3个成分质量分数差异较大,批次之间3个成分含量总体呈现出二低一高的趋势,建议使用3个成分总和作为质量控制指标。结论 建立的HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法稳定、可靠,可为千斤拔的质量评价提供依据。