缺氧诱导因子1α-肾损伤分子1信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞细胞外基质降解的影响

目的研究缺氧诱导因子1α（HIF1α）-肾损伤分子1（KIM1）信号通路对高糖环境下人肾小管上皮细胞（HK2）细胞外基质降解的影响，探讨HIF1α-KIM1通路参与糖尿病肾病肾间质纤维化（RIF）的可能机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系（HK2）。按如下处理分组：（1）正常对照组（D-葡萄糖5．6mmol／L）；（2）甘露醇组（D．葡萄糖5．6mmol／L＋D-甘露醇24．4mmol／L）；（3）高糖组（D-葡萄糖30mmol／L）；（4）转染对照组；（5）HIF1αsiRNA组；（6）KIM1siRNA组。分别于培养12、24、36h收获细胞。用Western印迹、实时荧光定量PCR（qRT—PCR）和细胞免疫荧光方法检测细胞HIF1α、KIM1、基质金属蛋白酶9（MMP9）、基质金属蛋白酶抑制物1（TIMP1）、纤维连接蛋白（FN）及I型胶原（COL-I）等蛋白及mRNA的表达。结果与正常对照组相比，高糖组细胞HIF1α、KIM1、TIMP1、FN及COL-I的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性增加（均P〈0．01）；MMP9蛋白及mRNA表达呈时间依赖性减少（均P〈0．01）。与高糖组相比，HIF1αsiRNA组细胞HIF1α、KIM1、TIMP1、FN及COL-I的蛋白及mRNA表达明显减少（均P〈0．01），MMP9蛋白及mRNA表达明显增多（P〈0.01）。与高糖组相比，KIM1siRNA组细胞KIM1、TIMP1、FN及COL-I蛋白及mRNA表达明显减少（均P〈0．01），MMP9蛋白及mRNA表达明显增多（均P〈0．01），而HIF1α表达水平的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高糖环境下HIF1α可能通过调控肾小管上皮细胞KIM1的表达参与糖尿病肾病肾间质纤维化的进程。

正常高值血压人群颈动脉斑块的相关因素

目的 分析正常高值血压人群中颈动脉斑块的相关危险因素。方法 回顾性选取2017年1月-2019年12月在郑州大学第一附属医院健康管理中心进行健康体检的正常高值血压者10 455人,根据颈动脉超声检查分为颈动脉斑块组4 584例和颈动脉正常组5 871人,对两组间性别、年龄、体质量指数(BMI)、腰围及血生化指标进行比较;采用logistic回归分析颈动脉斑块的相关危险因素;应用列线图进行影响因素的可视化分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价列线图模型预测颈动脉斑块风险的效能。结果 与颈动脉正常组相比,颈动脉斑块组的男性比例偏高,年龄偏大,BMI稍大,空腹血糖、血压、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酐、尿素氮等指标升高,肾小球滤过率下降(P<0.05)。单因素logistic回归分析结果显示,男性,年龄、空腹血糖、总胆固醇及LDL-C增加为颈动脉斑块的危险因素(均P<0.05);多因素logistic回归分析(向前逐步)显示,男性(OR=1.81,95%CI 1.63~2.02)、年龄(与18~<40岁比较,40~<50岁,OR=3.77,95%CI 3.01~4.74;50~<60岁,OR=8.82,95%CI 7.06~11.02;60~<70岁,OR=17.96,95%CI 14.13~22.84;≥70岁,OR=27.84,95%CI 20.30~38.18)、空腹血糖≥7.0 mmol/L(与<6.1 mmol/L比较,OR=1.56,95%CI 1.34~1.82)及LDL-C增加(OR=1.26,95%CI 1.15~1.38)是正常高值血压人群颈动脉斑块的独立危险因素(均P<0.05)。基于此建立的风险预测模型验证具有一定的精确度及区分度(C指数为0.707,95%CI 0.699~0.717)。ROC曲线分析显示模型预测效能曲线下面积(AUC)为0.707(95%CI 0.697~0.717),灵敏度为71.1%,特异度为59.6%。结论 正常高值血压人群中男性、年龄、空腹血糖及LDL-C升高与颈动脉斑块相关,基于这些指标建立的颈动脉斑块风险预测模型对于识别高危人群具有一定的价值。

空腹血糖轨迹与新发颈部动脉斑块的相关性

目的探讨空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)轨迹与新发颈部动脉斑块的相关性。方法选取2017年1月—2019年12月在郑州大学第一附属医院健康管理中心连续3年进行健康体检且符合入选标准的953例被检者作为观察对象,依据观察对象2017、2018、2019年度健康体检的FPG数值,用潜类别轨迹模型确定4个不同的FPG轨迹组,分别为低稳定水平组,中稳定水平组,中高稳定水平组,高稳定水平组,随访各组人群至2020年度健康体检时颈部动脉斑块的发病情况。比较4组颈部动脉斑块发病率的差异,应用Cox比例风险回归模型分析不同FPG轨迹组与新发颈部动脉斑块的相关性。结果颈部动脉斑块的发病率随着FPG轨迹的升高而增加,分别为11.13%、19.70%、23.44%、23.81%(P<0.001)。用Cox比例风险回归模型校正性别、年龄、BMI等多种混杂因素后,FPG稳定中水平组、稳定中高水平组、稳定高水平组颈部动脉斑块发病风险分别为FPG稳定低水平组的1.895(95%CI:1.296~2.769)、2.273(95%CI:1.241~4.161)、2.527(95%CI:1.219~5.241)倍(均P<0.05)。结论长期高FPG水平是颈部动脉斑块发病的独立危险因素,控制血糖使其稳定在较低水平能够降低颈部动脉斑块发生风险。

微小RNA-374a对高糖诱导人肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1等炎症因子表达的影响

目的研究微小RNA-374a(miRNA-374a)对高糖环境下人肾小管上皮细胞(HK2)中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及相关炎症因子表达的影响,探讨miRNA-374a调控促炎因子表达介导炎症反应参与糖尿病肾病进展的可能机制。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞系(HK2),按如下处理分组:(1)正常对照组(D-葡萄糖5.6 mmol/L);(2)甘露醇组(D-葡萄糖5.6 mmol/L+D-甘露醇24.4 mmol/L);(3)高糖组(D-葡萄糖30 mmol/L);(4)转染对照组;(5)miRNA-374a mimics转染组;(6)miRNA-374a inhibitor转染组。培养24 h收获细胞。Western印迹法检测细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRTPCR)法检测细胞miRNA-374a、MCP-1 mRNA的表达,ELISA法检测细胞白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达。结果与正常对照组相比,高糖组细胞miRNA-374a表达明显减少(P<0.05),MCP-1蛋白及mRNA表达明显增加,IL-6、IL-18、TNF-α蛋白的表达均增加(均P<0.05)。与高糖组相比,miRNA-374a mimics转染组细胞MCP-1蛋白及mRNA表达明显减少,IL-6、IL-18、TNF-α蛋白的表达均相应显著降低(P<0.05)。与高糖组相比,miRNA-374a inhibitor转染组细胞MCP-1蛋白及mRNA表达明显增加,IL-6、IL-18、TNF-α蛋白的表达均显著增加(P<0.05)。结论高糖环境下miRNA-374a很可能通过调控肾小管上皮细胞MCP-1等炎症因子的表达参与糖尿病肾病炎症反应的发生发展。

Effect of HIF1α-KIM1 pathway on extracellular matrix degradation in human tubular epithelial cells under high glucose

Objective To investigate the effect of hypoxia inducible factor 1α(HIF1α)-kidney injury molecule 1(KIM1)pathway on extracellular matrix degradation in human tubular epithelial cells under high glucose,and to explore the possible mechanism of this pathway participated