基于转录组学探讨铁死亡相关基因在奥希替尼获得性耐药NSCLC细胞中的表达及意义

目的基于转录组学探讨NSCLC细胞奥希替尼(osimertinib,Osi)获得性耐药的关键基因,并分析其在耐药细胞中的意义。方法体外培养人肺癌H1975细胞和Osi耐药H1975/OR细胞,CCK-8法检测Osi和铁死亡诱导剂对两种细胞存活率的影响;转录组学检测两种细胞的基因表达差异情况;Western blot检测人肺成纤维细胞HLF-1与两种肺癌细胞的铁死亡相关蛋白表达水平差异。结果不同浓度的Osi可抑制H1975细胞和H1975/OR细胞的增殖,且H1975细胞更敏感。通过转录组学分析,两种细胞在基因表达水平存在着较大差异,其中铁死亡通路差异较为显著。Western blot结果验证HLF-1、H1975和H1975/OR细胞在铁死亡相关蛋白的表达水平上存在着不同程度的差异。铁死亡诱导剂RSL3和Erastin处理后,耐药H1975/OR细胞对其更敏感,而H1975细胞无显著性差异。结论肺癌细胞H1975和Osi耐药细胞H1975/OR的基因表达水平存在较多差异,其中铁死亡通路对Osi的获得性耐药有着较为重要的作用。

胆胰康泰散的质量标准研究

目的:建立胆胰康泰散的质量标准。方法:采用薄层色谱法对胆胰康泰散中的黄芩、香附、白芍、柴胡、黄连进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对黄芩中的黄芩苷进行含量测定,色谱柱:Intersil C18 (4.6×250 mm, 5 μm);流动相:甲醇-水-磷酸(55:45:0.2);检测波长:280nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃。结果:薄层鉴别专属性强,阴性对照无干扰。黄芩苷的定量测定在18.34~41.26μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997),加样回收率98.99%,RSD=1.80%(n=6)。结论:该方法可以有效地控制胆胰康泰散的质量。