成年大鼠非胰岛内Nestin阳性细胞的体外分离、培养及分化

目的 :建立成年大鼠胰腺非胰岛内 Nestin阳性细胞的体外分离培养及分化的方法。方法 :采用胰管内注入胶原酶消化法分离 3只成年大鼠胰腺组织 ,并经含 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液 (p H7.6 )体外培养 ,36 h后弃去悬浮细胞及胰岛 ,改用无 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液 (p H7.4 )加 b FGF、EGF及 N2 添加剂培养 ,18～ 2 2 d后收集新生类胰岛样细胞团并传代培养。挑选新分离的胰岛和新生类胰岛样细胞团每次各 4 0个 ,共 3次 ,采用1 31 放射免疫法测定分离的胰岛及新生类胰岛样细胞团的胰岛素分泌量 ,并计算葡萄糖刺激指数 (SI) ;免疫荧光细胞化学法检查贴壁细胞及传代后的新生类胰岛样细胞团 Nestin阳性细胞的表达。结果 :胰管内注入胶原酶消化法可获得功能、形态良好的胰岛 ;分离后胰腺组织在 p H7.6的 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液培养条件下 ,36 h内胰岛细胞不贴壁 ,贴壁细胞中大多数表达 Nestin阳性细胞 ,无胰岛素和胰高血糖素表达 ,但 Nestin表达不一 ,培养 18～ 2 2 d可见新生类胰岛样细胞团出现 ,新生类胰岛样细胞团传代后仍可见 Nestin阳性细胞。新分离的 4 0个胰岛在含糖 3.3、 16 .7m mol· L- 1培养液中胰岛素分泌量为 (6 3.6± 4 .0 )、 (2 0 2 .2± 14 .8) m IU· L- 1 ;而新生的4

乳腺癌乳晕下亚甲兰注射检测哨兵淋巴结的临床研究

目的 评价乳晕下亚甲兰注射检测乳腺癌哨兵淋巴结。 方法 2 0例早期乳腺癌患者应用亚甲兰乳晕下注射检测哨兵淋巴结。 结果 哨兵淋巴结检出率 95 % (19/ 2 0 )。预测腋窝淋巴结转移准确率为 94 7% (18/ 19)。 结论 乳晕下注射染料检测哨兵淋巴结为最佳途径 ,亚甲兰可以用于哨兵淋巴结检测。

新生鼠胰岛干细胞分离、培养和分化的实验研究

目的 探索新生鼠胰岛干细胞体外分离鉴定、培养以及体外分化的方法。方法 用胶原酶消化新生大鼠胰腺 ,将消化的组织碎片在pH7.4～ 7.6条件下经含血清RPMI 164 0及无血清RPMI164 0 (添加bFGF ,EGF ,N 2 )培养液中培养 ,观察形成类胰岛样细胞团的全过程。用胰岛素释放实验检测胰岛功能 ,免疫荧光法检测nestin的表达。结果 胰腺消化碎片培养 3 6h内 ,可见nestin阳性细胞贴壁 ,添加bFGF ,EGF ,N2后nestin阳性细胞快速增长 ,18～ 2 4d形成类胰岛样细胞团 ,并可表达胰岛素。结论 胰腺细胞中nestin阳性细胞具有胰岛干细胞特点 。

异位甲状腺癌2例并文献复习

异位甲状腺癌是甲状腺癌的一种特殊类型，约占甲状腺癌发病率的0．3％～0．5％，临床上较少见。本院2010年收治肺异位甲状腺癌1例，2011年收治颈部异位甲状腺癌1例，本文结合这2例异位甲状腺癌的诊治经过，复习国内外文献报道资料，对此类疾病的诊治作相关分析。

乳房肿块术后投诉分析及其预防

回顾门诊乳腺肿块切除术后发生投诉的原因,着重分析了术前、术中和术后可能出现的一些缺陷及预防措施。

甲状腺术中发现咽食管憩室1例

患者，男性，33岁。因“体检发现左侧甲状腺结节1年”于2012年3月3日入院。患者1年前于本院查甲状腺B超发现左侧甲状腺钙化光团6．6mm，无进食、吞咽等不适。2012年3月1日复查甲状腺B超，左侧甲状腺结节伴内部细光点，建议甲状腺弹性B超复查。3月2日弹性B超，左侧甲状腺占位考虑（左侧中部9mm×8mm低回声结节，弹性评分3～4分）。查体：意识清楚，无突眼，双手无震颤，气管居中，双侧甲状腺未触及明显肿块，颈部淋巴结未触及肿大。

大肠癌156例误诊原因分析

目的探讨大肠癌误诊原因及减少误诊的措施.方法回顾性总结近10年来388例大肠癌病人的临床资料,对被误诊的156例(40.2%)病人的并存疾病和误诊病种进行统计分析.结果本组被误诊的大肠癌病人的并存疾病为肝肿瘤,胆囊结石伴炎症,急性阑尾炎,妇科盆肿腔瘤,斜疝,甲亢等.误诊病种有慢性结肠炎(42例)、痔疮(30例)、急性阑尾炎伴阑尾周围脓肿(12例)、阑尾周围脓肿(13例)、粘连性肠梗阻(13例)、妇科盆腔肿瘤(5例)等.误诊时间15天～3年.误诊原因:(1)被并存疾病的症状所掩盖;(2)未行直肠指诊、大便潜血试验、气钡灌肠和纤维结肠镜检查.结论应提高对大肠癌警惕性,按医疗操作规范行直肠指检,大便隐血试验,气钡结肠造影及结肠镜检.提高对高危人群随防监控.检测外周血中CK19、CK20.

新生大鼠胰腺nestin阳性细胞的体外分离、培养和分化的研究

目的探索新生大鼠胰腺nestin阳性细胞体外分离、培养并使之形成类胰岛样细胞团的方法。方法应用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片培养形成类胰岛样细胞团后传代。免疫荧光细胞化学法检测贴壁细胞胰岛素、胰高血糖素及nestin的表达。RT-PCR检测培养1周的贴壁细胞nestin及细胞角蛋白(CK19)的表达。结果在pH 7．6条件下培养24-36 h有部分细胞贴壁生长,改用pH 7．4无血清RPMI 1640培养液培养18-24 d可形成类胰岛样细胞团,传代后可有单层细胞生长。培养24～36 h的贴壁细胞nestin呈阳性,但胰岛素、胰高血糖素阴性,形成的类胰岛样细胞团传代后24 h胰岛素、胰高血糖素呈阳性。培养1周的单层细胞经RT-PCR扩增获得nestin 片段,但未获得CK19相应的片段。结论类胰岛样细胞团传代培养后可表达胰岛素、胰高血糖素; 胰腺nestin阳性细胞具有胰岛干细胞的特点。

上肢淋巴管结扎减少乳腺癌术后皮下积液的应用研究

腋窝皮下积液是乳腺癌腋窝清扫术常见并发症。2009年8月-2011年8月我们对172例行乳腺癌改良根治术患者进行前瞻性配对研究，对其中86例患者术中用美蓝行上肢淋巴管显影指导下的结扎。

乳腺癌手术保留腋鞘的临床意义探讨

目的 探讨乳腺癌手术腋窝淋巴结清扫时保留腋鞘的临床意义.方法 回顾性分析2004年1月至2008年1月施行并获得12个月随访的402例乳腺癌改良根治术患者的临床资料.按腋窝淋巴结清扫时保留腋鞘与否分为A、B两组,A组243例,B组159例.术后对两组患者腋窝皮下积液和上肢水肿情况进行观察随访.结果 A、B两组术后顽固性腋窝皮下积液发生率分别为5.3%（13/243）、10.7%（17/159）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05） 术后1、6、12个月上肢水肿严重程度与发生率分别比较,A组均显著低于B组（P＜0.01）.结论 乳腺癌改良根治术腋窝淋巴结清扫时探查腋鞘内或其周围无明显肿大和可疑转移淋巴结的情况下,保留腋鞘能够有效降低术后顽固性腋窝皮下积液和上肢水肿的严重程度与发生率,提高患者的生存质量.

大肠癌误诊原因分析（附156例分析）

为探讨大肠癌误诊原因及减少误诊的措施，回顾性总结10年大肠癌患者388例，其中误诊156例(40％)，误诊年龄22～87岁，平均51岁，误诊时间15天至3年。误诊为慢性结肠炎，痔疮，胆囊炎，阑尾炎、粘连性肠梗阻，妇科盆腔肿瘤等占98％以上。减少误诊措施：(1)提高对大肠癌警惕性；(2)按医疗操作规范行直肠指检；(3)多次粪便隐血试验检查；(4)结合气钡结肠造影及结肠镜检；(5)提高对高危人群随防监控；(6)在外周血中检测CK19、CK20提高对大肠癌早期诊断减少误诊。