滋阴泻火中药对性早熟模型大鼠促性腺激素释放激素及其受体mRNA表达的影响

目的 :观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的性早熟模型大鼠下丘脑促性腺激素释放激素 (GnRH)和垂体GnRH受体mRNA表达的影响 ,探讨滋阴泻火中药的作用机制。方法 :将动物分为正常组、模型组、生理盐水组和中药组。模型组、生理盐水组和中药组动物 5日龄时皮下注射达那唑 30 0 μg ;中药组在 15日龄时开始喂饲滋阴泻火中药 ,生理盐水组同时给予等量的生理盐水。免疫组织化学ABC法观察大鼠下丘脑GnRH的表达 ;逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)观察下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果 :和正常组比较 ,模型组和生理盐水组大鼠阴门开启和建立性周期的时间提前 ,下丘脑GnRHmR NA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高 ,下丘脑GnRH免疫阳性神经元减少 ;中药组大鼠阴门开启和建立性周期的时间延缓 ,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达降低 ,下丘脑GnRH免疫阳性神经元增多。结论 :滋阴泻火中药可能通过抑制下丘脑GnRH的合成和释放以及降低垂体对GnRH的反应性 ,抑制提前启动的下丘脑 -垂体 -性腺轴功能 ,这可能是滋阴泻火中药治疗性早熟的机理。

两种慢性痛大鼠脊神经节生长抑素mRNA的表达及电针的影响

目的 :观察福尔马林试验和去传入神经两种慢性痛模型大鼠脊神经节生长抑素 m RNA的改变。方法 :原位杂交组织化学。结果 :福尔马林试验可导致大鼠同侧脊神经节生长抑素 m RNA阳性细胞增加 ,而去传入神经则导致大鼠双侧脊神经节生长抑素 m RNA阳性细胞减少。结论 :电针可以分别改变两种模型大鼠脊神经节生长抑素 m

两种慢性痛大鼠脊髓和脊神经节一氧化氮合酶的表达及电针的影响

目的 :观察福尔马林试验和去传入神经两种慢性痛模型大鼠脊神经节和脊髓一氧化氮合酶的改变。方法 :还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸组织化学方法。结果 :福尔马林试验和去传入神经均可导致大鼠手术侧脊神经节阳性神经元增加 ,手术侧脊髓后角浅层 NOS阳性终末增加。结论 :电针可以改变两种模型大鼠脊神经节一氧化氮合酶的表达。

骨间后神经与腕背痛关系的解剖学探讨

在５０侧成人上肢标本上对腕背部骨间后神经的形态进行了解剖观测。骨间后神经终未端呈梭形膨大者占９２％（４６侧），该神经梭形膨大位于第３、４腕背侧骨筋膜管与桡骨下端之间。桡骨下端骨折及腕背部手术易损伤该神经，这可能是引起腕背痛的原因之一。

电针对去卵巢大鼠下丘脑GnRH系统影响的分子机制

目的 探索电针调整下丘脑 -垂体 -卵巢轴功能异常的中枢机制 ,观察切除卵巢后大鼠下丘脑 Gn RH及其受体的改变 ,以及电针对它们的影响。方法 应用免疫组化和 RT-PCR方法 ,观察大鼠切除卵巢 4星期后 ,下丘脑 Gn RH免疫阳性神经元数量和分型、Gn RH免疫阳性纤维的变化以及 Gn RHm RN A和垂体 Gn RH受体 m RNA的改变 ,及电针对它们的影响。结果 电针后 ,大鼠下丘脑 Gn RH神经元数目较去卵巢 4星期时明显增多 ,棘型细胞比例增加 ,纤维膨体密度增加 ,下丘脑组织Gn RHm RNA表达增高 ,垂体 Gn RH受体 m RNA表达升高。结论 电针可在分子水平调整去卵巢大鼠中枢 Gn RH的合成与释放 ,以及垂体 Gn RH受体的表达 ,这可能是电针调整下丘脑 -垂体

去卵巢大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的功能代偿机制研究

目的 :在细胞和分子水平上 ,探讨机体因各种原因导致卵巢功能低下时 ,下丘脑 垂体 卵巢轴 (HPOA)功能的自然代偿机制。 方法 :观察大鼠切除卵巢后 1～ 6个月 ,下丘脑促性腺激素释放激素 (Gonadotropinreleasinghormone ,GnRH)及其mRNA表达的改变以及阴道脱落细胞形态和外周血雌二醇 (E2 )水平的变化。结果 :去卵巢后 5～ 6个月时 ,大鼠阴道涂片出现成熟脱落细胞 ;4个月时血E2 水平明显升高 ,6个月时几乎稳定在正常水平的一半以上 ;随去卵巢时间延长 ,大鼠下丘脑GnRH神经元数目较去卵巢 1个月时逐渐增多 ,至 6个月时 ,升高有显著差异 ,但仍低于正常组数目 ;去卵巢 1个月大鼠下丘脑组织GnRHmRNA表达明显减少 ,去卵巢后 5个月明显升高 ,与正常组相比没有显著差异 ;GnRH棘型神经元的比例在去卵巢 4个月时即升高到正常水平。 结论 :大鼠卵巢功能低下时 ,机体体内可能存在一种自然代偿作用 ,使异常的HPOA功能趋于正常化。

促性腺激素释放激素细胞模型研究进展

促性腺激素释放激素 (GnRH)神经元是哺乳动物中枢生殖调控体系的最终共同通路。然而 ,由于GnRH神经元在脑内数目稀少以及散在分布 ,长期以来给GnRH神经元的分离鉴定和功能研究带来了极大的困难。因此 ,科学家们一直致力于寻找理想的细胞模型。离体GnRH细胞株 (GT1)以及最近在体绿色荧光蛋白 GnRH(GnRH GFP)转基因小鼠的诞生 ,给生殖内分泌领域的研究创造了极好的条件 。

围绝经期和抑郁症

妇女围绝经期的身心健康一直是妇女保健的重要任务。围绝经期异常心理症状尤为突出 ,抑郁症的发病率较高 ,内分泌变化和抑郁症的发病有一定关系。该文从流行病学、影响因素、发病机制和治疗方面综述围绝经期和抑郁症之间的关系。

颈上神经节脑内移植在改善Parkinson病动物模型行为中的作用

目的 :为了改善 Parkinson病动物模型的行为变化。方法 :将 Parkinson病动物模型自体颈上神经节移植入尾状核 ,术后 30～ 60天中观察动物模型的行为变化。结果 :移植术后经行为检测 ,动物模型的行为有明显改善 ;光镜下观察 ,移植物成活。结论 :颈上神经节脑内移植可明显改善 Parkinson病动物模型的行为。

Kisspeptin/GPR54信号通路促使性早熟形成的作用观察

目的:以达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠为研究对象,探讨下丘脑kisspeptin/GPR54信号通路在性早熟发病机制中的作用。方法:3日龄SD雌性大鼠,随机分为正常组、对照组和模型组。于大鼠5日龄时,模型组皮下注射溶有达那唑的乙醇与乙二醇的混合液进行造模,分别于大鼠15、25、30、35和40日龄时处死,留取标本。观察性器官发育情况;采用ELISA法检测外周血中E2、FSH和LH水平;采用real-time PCR法检测下丘脑Kiss-1、GPR54和GnRH的mRNA表达;应用免疫荧光法观察下丘脑kisspeptin的表达情况。结果:模型大鼠青春期启动和性成熟时间较正常组和对照组显著提前(P<0.05);在25和30日龄时,模型大鼠外周血清性激素水平和子宫系数均显著高于正常组和对照组(P<0.05);在25和30日龄时,模型大鼠卵巢形态学发育也明显早于正常组;在25日龄时,模型组大鼠下丘脑Kiss-1和GnRH的mRNA及下丘脑弓状核kisspeptin表达显著高于正常组和对照组(P<0.05);在30日龄时,模型组大鼠下丘脑弓状核kisspeptin表达低于正常组和对照组(P<0.05);在35日龄时,模型组大鼠Kiss-1和GnRH的mRNA表达较正常组和对照组降低(P<0.05);在所观察日龄内,各组大鼠GPR54mRNA的表达均无显著差异。结论:性早熟模型大鼠在青春期启动时下丘脑Kiss-1 mRNA和kisspeptin的表达显著上调,提示kisspeptin可能是性早熟形成的启动因子,kisspeptin/GPR54信号通路在性早熟的发病中可能起着重要作用。

疾病蛋白质组研究进展

蛋白质组是继人类基因组计划之后,生物医学领域的又一研究热点,随着蛋白质组研究技术的日趋完善,蛋白质组研究已开始从建立数据库走向解决生命科学的重大问题,在肿瘤和神经系统疾病的发生与诊断以及病理研究等方面已经得到应用。疾病蛋白质组的深入研究,将对重大疾病的发病机制、疾病诊断、疾病预防和治疗提供重要的理论基础。

神经激肽B及其生殖内分泌作用

神经激肽B(neurokinkin B,NKB)是速激肽家族的一员,主要通过其受体NK3R发挥作用。NKB及NK3R在神经系统分布广泛。NKB具有使空腔脏器平滑肌收缩、松弛血管、降低平均动脉压、减慢心率、兴奋离体大鼠脊髓神经元及收缩瞳孔括约肌缩小瞳孔等生物学作用。近年来NKB在生殖内分泌中的调控作用越来越受到关注,关于其调节下丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的作用的研究也越来越深入。本文综述了NKB及其受体的分布范围、生理功能、NKB在生殖内分泌调控过程中的作用,其具体的作用机制还有待于进一步研究。

GPR54/kisspeptin的生殖内分泌作用研究进展

GPR54是新发现的视黄酸家族G蛋白偶联受体,其内源性配体为k isspeptin。GPR54/K iss-1 mRNA分布于中枢神经系统的下丘脑、弓状核等多个区域,其表达随大鼠不同生理阶段及性周期的改变而变化。GPR54/k isspeptin在调节促性腺激素LH和FSH的释放,促进生殖器官的发育及青春期启动中具有相当重要的作用。

达那唑诱导的雌性性早熟大鼠GnRH及其受体mRNA的表达

目的 观察达那唑对雌性大鼠下丘脑 垂体 靶腺轴及下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA表达的影响。方法 5天龄雌性大鼠皮下一次注射 3 0 0 μg达那唑以诱导真性性早熟。从 2 5日龄起观察和记录阴门开启鼠龄和从阴门开启日起进行阴道涂片以确定第一个动情周期。检查阴道涂片和体重及垂体、肾上腺、子宫、卵巢器官重量 ,观察雌激素依赖的阴道脱落细胞的周期性变化和主要器官的发育情况。RT PCR法观察雌性大鼠下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达。结果 5日龄雌性大鼠给予皮下注射达那唑 ,可诱导大鼠阴门提前开启和建立性周期的时间提前 ,子宫和卵巢的重量明显增加 ,下丘脑GnRHmRNA和垂体GnRH受体mRNA的表达升高。结论 达那唑对雌性大鼠下丘脑 垂体 卵巢轴有多层次的作用 ,可诱导雌性大鼠下丘脑 垂体

滋阴泻火中药对雌性性早熟模型大鼠下丘脑生长激素释放肽及其受体GHSR1-α表达的影响

目的观察滋阴泻火中药对达那唑诱导的雌性性早熟模型大鼠青春期启动时下丘脑生长激素释放肽（Ghrelin）及其受体（growth hormone secretion peptide receptor 1α,GHSR1-α）表达的影响。方法将40只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、生理盐水干预组及中药干预组,每组10只。模型组、生理盐水干预组及中药干预组于大鼠5日龄时一次性皮下注射达那唑300μg制备性早熟大鼠模型。15日龄起中药干预组、生理盐水干预组分别予滋阴泻火中药及生理盐水灌胃,给药干预7~10天,正常组不予处理。记录阴门开启情况,计算卵巢及子宫指数,检测外周血雌二醇（E2）、卵泡雌激素（FSH）、黄体生成素（LH）、下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）含量、下丘脑Ghrelin及其受体GHSR1-α基因表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠阴门开启时间提前,外周血E2、LH水平、子宫指数、下丘脑GnRH含量升高,外周血FSH、下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平降低（P〈0.05,P〈0.01）;与模型组及生理盐水干预组比较,中药干预组大鼠阴门开启时间未提前,外周血E2、LH水平、子宫指数及下丘脑GnRH含量明显降低（P〈0.05,P〈0.01）,而下丘脑Ghrelin及GHSR1-αmRNA水平升高（均P〈0.01）;4组间下丘脑Ghrelin及受体个数及活性比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在基因转录水平上滋阴泻火中药对性早熟大鼠下丘脑Ghrelin及其受体有一定的调节作用。

电针对急性手术创伤大鼠下丘脑及海马促肾上腺皮质激素释放因子表达的影响

目的:观察电针对急性手术创伤大鼠术后苏醒质量和下丘脑、海马促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)表达的影响,探讨大鼠下丘脑与海马CRF表达的相关性在针刺调节急性手术创伤所导致的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能异常中的作用。方法:雄性SD大鼠20只,随机分为正常组、模型组、假电针组和电针组。肝叶切除术建立急性创伤模型。电针组电针右侧"足三里"和"三阴交",假电针组仅针刺"足三里"和"三阴交",不接电针,于造模前24h及造模后各治疗1次。观察各组大鼠麻醉苏醒时间及翻正反射情况。应用Western blot方法检测各组动物下丘脑和海马CRF的表达。结果:电针组大鼠麻醉苏醒时间显著缩短,翻正反射迅速恢复,和模型组、假电针组相比差异有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。苏醒时间与翻正反射有相关性(r=0.646,P<0.05)。模型组大鼠下丘脑CRF表达升高,和正常组相比差异有统计学意义(P<0.05),电针组大鼠下丘脑CRF表达降低,和模型组、假电针组相比差异有统计学意义(P<0.05)。模型组大鼠海马CRF表达降低,和正常组相比差异有统计学意义(P<0.05),电针组大鼠海马CRF表达升高,和假电针组、模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。术后大鼠下丘脑CRF表达与海马CRF表达呈负相关(P<0.001),与翻正反射呈正相关(P<0.01),即Y下丘脑=0.452-0.546X海马+0.200X翻正反射。海马CRF表达与刺激方式呈负相关(P<0.001),与电针干预呈正相关(P<0.01),该表达式为Y海马=0.773-0.129X刺激方式+0.120X电针。结论:电针可缩短手术大鼠术后苏醒时间。下丘脑和海马CRF的表达与大鼠术后苏醒时间及干预方法均呈一定相关性,提示下丘脑和海马CRF在调节机体应激反应中可能起关键作用。电针可能通过激活海马CRF神经元,抑制下丘脑CRF神经元,进而调整急性手术创伤所致的大鼠HPA轴功能异常,减轻术后应激。

针刺对急性手术创伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子家族肽及其受体表达的影响

目的:通过观察针刺对急性手术创伤大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)家族肽及其受体表达的影响,探讨针刺调节急性手术创伤所导致的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能异常作用的神经内分泌机制。方法:雄性SD大鼠40只,随机分成正常组、创伤组、正常加电针组、创伤加电针组,每组10只。创伤动物在乙醚麻醉下行剖腹探查术。电针组动物电针"足三里""三阴交"30min。应用特异性放射免疫法检测各组动物血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质肌动蛋白(Cort)、促黄体生成素(LH)和肌钙蛋白(T)的水平,应用RT-PCR的方法观察各组动物下丘脑CRF家族肽和其受体mRNA的表达。结果:创伤组大鼠血清ACTH水平显著下降(P<0.05),创伤加电针组血清ACTH水平和创伤组相比显著升高(P<0.05);创伤组大鼠血清Cort水平较正常组显著上升(P<0.05),创伤加电针组血清Cort水平较创伤组显著降低(P<0.05);各组动物血清LH和T水平差异无统计学意义(P>0.05)。创伤组大鼠下丘脑CRF mRNA的表达和正常组相比降低(P<0.05),创伤加电针组大鼠下丘脑CRF mRNA的表达和创伤组相比升高(P<0.05);创伤组大鼠下丘脑Ucn1 mRNA的表达与正常组比较升高(P<0.05),创伤加电针组大鼠下丘脑Ucn1 mRNA的表达和创伤组相比下降(P<0.05);各组Ucn2、Ucn3和CRF受体1 mRNA的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:电针效应具有多环节、多靶点的特点,电针可能通过调整急性创伤大鼠下丘脑CRF和Ucn1 mRNA的表达,进而调整急性剖腹探查所致的大鼠HPA轴功能异常。

曲普瑞林治疗真性性早熟的中枢机制

目的观察曲普瑞林对真性性早熟的治疗作用,并探讨其药理作用的中枢机制。方法雌性Sprague-Dawley大鼠36只,分为正常组、模型组和曲普瑞林组。模型组和曲普瑞林组动物5日龄时皮下注射达那唑300μg;曲普瑞林组在15日龄时开始给予曲普瑞林(50 g·100 g^(-1)体重)肌内注射,每3 wk一次,共2次。观察3组大鼠性周期和动物脏器系数,并采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠下丘脑神经肽Kisspeptin和G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠阴门开启及建立规律性周期时间均明显提前,卵巢和子宫的脏器系数也明显增加(P<0.05);和模型组相比,曲普瑞林组大鼠阴门开启及建立规律性周期时间均明显延迟,卵巢和子宫的脏器系数明显减小(P<0.05),而与正常组无明显差异(P>0.05)。模型组大鼠下丘脑Kisspeptin和GPR54mRNA的D值为(0.427±s 0.008)和(0.482±0.021),高于正常组[(0.266±0.029)和(0.31±0.03)]和曲普瑞林组[(0.332±0.019)和(0.33±0.03)](P<0.01),曲普瑞林组和正常组相比无明显差异(P>0.05)。结论曲普瑞林可抑制性早熟大鼠下丘脑-垂体-性腺轴的过早启动,其对下丘脑内:Kisspeptin/GPR54 mRNA表达的抑制可能是其中枢作用机制之一。

能量代谢因子促生长激素释放肽与青春期启动

促生长激素释放肽与机体摄食和能量代谢的调节有关，同时能够调节机体与性激素分泌相关的促性腺激素类物质释放，是连接能量代谢与下丘脑一垂体一性腺轴的桥梁因子。生殖系统功能的启动与成熟与机体的营养状态密切相关，儿童青春期的启动需要一定的体脂储备，肥胖儿童青春期易提前启动，促生长激素释放肽可能是传递机体营养状态的信号因子之一，可能在青春期的启动中发挥一定的作用。

糖皮质激素受体及其调节药物在应激中的作用及机制

海马糖皮质激素受体(GR)参与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能的负反馈调节,是调控机体应激反应和海马可塑性不可或缺的因素。海马GR可以通过抑制HPA轴关键调节因子促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的转录与合成,实现对HPA轴的负反馈调节,从而促进应激后机体内稳态恢复。但GR长期过度激活将损害海马突触可塑性,影响学习记忆功能。GR拮抗剂可以抑制GR功能,起到拮抗糖皮质激素、抑制神经炎症、减轻海马细胞凋亡等效果,但可能引起HPA轴负反馈功能减弱。FK506结合蛋白5可调节GR的敏感性,以其为靶标的药物可以调节HPA轴的活性。如何控制应激时GR的表达异常,而不影响GR对HPA轴的负反馈值得进一步研究。