罗格列酮干预大鼠非酒精性脂肪肝

目的:用马来酸罗格列酮治疗非酒精性脂肪肝大鼠,观察治疗前后胰岛素抵抗情况、血浆载脂蛋白CII(ApoCII)、载脂蛋白CIII(ApoCIII)的含量变化和脂蛋白脂肪酶(LPL)、肝脂肪酶(HL)的活性变化,肝组织载脂蛋白B100(Apo-B100)mRNA表达量和病理学变化。方法:用高脂肪高胆固醇饮食饲养SD雄性大鼠8周建立大鼠脂肪肝模型成功后对大鼠用马来酸罗格列酮治疗4周;HE染色观察大鼠肝脏病理学变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肝脏Apo-B100mRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血浆ApoCII、ApoCIII、胰岛素含量,用酶法检测大鼠LPL、HL的活性,快糖仪测大鼠空腹血糖,根据HOMA-IR公式[IR=FPG(mmol/L)×FINS(mIU/L)/22.5]计算胰岛素抵抗指数。结果:脂肪肝大鼠经马来酸罗格列酮干预治疗后胰岛素抵抗和肝细胞脂肪变性较治疗前减轻,肝组织中Apo-B100mRNA表达量增加;ApoCII含量升高,ApoCIII含量降低;LPL、HL活性升高。结论:马来酸罗格列酮可以减轻脂肪肝大鼠的胰岛素抵抗,改善其脂质代谢紊乱,减轻其肝细胞脂肪变性。

ghrelin在结直肠癌中的表达水平及其意义

目的:探讨ghrelin在结直肠癌中的表达水平及意义。方法:选取40例不同分期结直肠癌患者(研究组)以及同期经电子肠镜检查排除结直肠癌的40例体检者(健康对照组),收集每个研究对象的血清和结直肠组织标本,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)检测血清和结直肠组织中ghrelin的表达水平。结果:研究组血清ghrelin表达水平与健康对照组之间无显著差异;不同Duke分期(A期、B期、C期、D期)的结直肠癌患者的血清中的ghrelin表达水平无显著差异;结直肠癌组织中的ghrelin水平与其组织分化程度呈负相关,分化程度低的结直肠癌组织中ghrelin表达水平高。结论:血清中ghrelin水平与结直肠癌发生无相关性,但结直肠癌患者癌组织中ghrelin表达水平与肿瘤分化程度呈负相关。

聚乙二醇电解质溶液分次与单次口服肠道准备方案的清洁效果和耐受性比较

背景:结肠镜检查是公认的结直肠检查的金标准,而良好的肠道准备是检查成功的前提条件。目的:评价聚乙二醇电解质溶液(PEG-ES)分次与单次口服作为结肠镜检查肠道准备方案的清洁效果和耐受性。方法:连续纳入427例进行结直肠癌筛查的无症状个体,随机分为A组和B组。A组于检查前夜和检查前4 h分别口服1.5 L PEG-ES,B组于检查前5 h口服3 L PEG-ES,评估、比较两组Boston肠道准备量表(BBPS)评分、等级和不良反应发生情况。结果:A组与B组间性别、年龄和盲肠插管率差异无统计学意义(P>0.05)。A组BBPS评分显著高于B组(P<0.01);尽管两种方案均能满足常规结肠镜检查的要求,但A组达到excellent肠道清洁等级者的比例显著高于B组(P<0.01),恶心症状发生率显著低于B组(P<0.05)。Logistic回归分析显示PEG-ES服用方式对肠道清洁度和恶心症状的发生有显著影响(P<0.05)。结论:与单次口服相比,分次口服PEG-ES的结肠镜检查肠道准备方案能获得更满意的肠道清洁效果且耐受性良好。

己酮可可碱对大鼠溃疡性结肠炎治疗作用及其机制

目的:观察己酮可可碱(PTX)对大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型的治疗作用,探讨血栓及血栓前状态(PTS)在溃疡性结肠炎发病中的作用和己酮可可碱作用机制.方法:用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)造大鼠溃疡性结肠炎模型,将大鼠模型随机分为模型组,模型+生理盐水组,模型+己酮可可碱组,另设空白对照组,共4组.观察各组大鼠肠道大体形态和组织学改变;采用血小板黏附仪检测血小板黏附功能(PAdT),智能血液凝聚仪检测血小板的聚集功能(PAgT);ELISA法测定血清中的血栓烷B2(TXB2);单克隆酶联吸附法检测血管性假血友病因子相关抗原(vWF∶Ag);酶联免疫吸附法检测细胞内粘附因子1(ICAM-1).结果:与模型+生理盐水组比较,模型+己酮可可碱组损伤指数下降(6.02±0.74vs0.85±0.50,P<0.01;5.68±0.60vs1.08±0.45,P<0.01);模型组血小板黏附率和聚集率与空白对照组无明显增加(P>0.05);模型组TXB2,vWF∶Ag,ICAM-1均较空白对照组的差异无统计学意义(P<0.01),经己酮可可碱治疗后,均较模型+生理盐水组降低(P<0.05).结论:TNBS所诱导大鼠溃疡性结肠炎模型与PTS有一定关系.PTX通过抗凝、抗炎症介质、抗细胞因子而发挥治疗UC作用.

胰岛素抵抗在非酒精性脂肪肝发病中的作用

目的:探讨胰岛素抵抗(IR)在非酒精性脂肪肝(NAFL)大鼠脂肪肝模型中的作用机制.方法:大鼠随机分为空白对照组,脂肪肝模型对照组(模型+生理盐水组)和脂肪肝实验组(模型+罗格列酮组).其中脂肪肝模型对照组和脂肪肝实验组分别予生理盐水和马来酸罗格列酮干预治疗4wk.观察各组大鼠肝脏大体形态和组织学改变;检测空腹血糖(FPG),空腹血胰岛素水平(FINS),计算胰岛素抵抗指数(IRI);检测血浆ApoCⅡ、ApoCⅢ水平及血浆脂蛋白脂肪酶(LPL)、肝脂肪酶(HL)活性和大鼠肝组织ApoB-100mRNA的表达量.结果:治疗前,脂肪肝组大鼠(包括脂肪肝模型组和脂肪肝实验组)与空白对照组大鼠比较,肝脏组织学改变达到脂肪肝诊断标准,FPG、FINS明显升高(6.46mmol/L±0.75mmol/L,6.61mmol/L±0.45mmol/L vs5.48mmol/L±0.47mmol/L;78.82mU/L±11.13mU/L,78.48mU/L±12.94mU/Lvs40.90mU/L±7.76mU/L),IR也明显升高(22.48±2.81,22.98±3.47vs9.85±1.15),血浆ApoCⅡ水平降低、ApoCⅢ水平升高,LPL和HL酶活性均降低,肝组织ApoB-100mRNA的表达量降低.马来酸罗格列酮干预治疗4wk后,与脂肪肝模型对照组比较,脂肪肝实验组大鼠肝脏大体标本和组织学脂肪变性情况明显减轻,FPG,FINS降低(6.01mmol/L±0.56mmol/Lvs6.43mmol/L±0.47mmol/L,68.11mU/L±10.52mU/L vs82.48mU/L±15.20mU/L),IR降低(18.49±2.44vs23.39±3.16),血浆ApoCⅡ水平升高,ApoCⅢ水平降低,LPL和HL酶活性均增加,肝组织ApoB-100mRNA的表达量上升.结论:高脂肪高胆固醇饮食可以成功造成SD大鼠有IR的NAFL模型.通过改善脂肪肝大鼠的IR,可以改变血浆ApoCⅡ、ApoCⅢ水平来提高LPL和HL的酶活性,加速外周VLDL和TG的降解,促使肝组织ApoB-100mRNA的表达量上升,VLDL在肝脏合成加快,从而加快内源性TG的转运,减轻肝细胞脂肪浸润.

载脂蛋白CⅡ、载脂蛋白CⅢ含量和脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶活性在大鼠脂肪肝模型中的变化

目的观察载脂蛋白CⅡ、载脂蛋白CⅢ和脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶在大鼠脂肪肝模型中的变化,探讨大鼠脂肪肝发病机理。方法高脂肪、高胆固醇饮食饲养法造脂肪肝胰岛素抵抗大鼠模型;检测马来酸罗格列酮干预前后载脂蛋白CⅡ、载脂蛋白CⅢ含量和脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶活性的变化;用双抗体夹心ELISA法检测脂肪肝大鼠血浆载脂蛋白CⅡ、载脂蛋白CⅢ含量,用酶法检测脂肪肝大鼠脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶活性。结果脂肪肝大鼠的血浆载脂蛋白CⅡ含量较正常大鼠降低,载脂蛋白CⅢ含量较正常大鼠升高,脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶活性较正常大鼠降低;经马来酸罗格列酮干预治疗后,脂肪肝大鼠的血浆载脂蛋白CⅡ含量升高,载脂蛋白CⅢ含量降低,脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶活性均升高。结论胰岛素抵抗使载脂蛋白CⅡ含量减少、载脂蛋白CⅢ增多,致脂蛋白脂肪酶、肝脂肪酶活性降低,而胰岛素增敏剂可以通过改变载脂蛋白CⅡ、载脂蛋白CⅢ含量来提高脂蛋白脂肪酶,肝脂肪酶活性。

脂肪肝细胞模型的建立及其生物学特性

目的:建立非酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪性肝炎离体细胞模型.方法:以正常人肝细胞株HL-7702为实验对象,采用临床常用静脉营养药物脂肪乳剂加入细胞培养液培养肝细胞建立脂肪肝细胞模型,并在此基础上传代培养,建立非酒精性脂肪性肝炎模型.以细胞内脂滴数量、甘油三酯含量和细胞培养液细胞转氨酶泄漏量等指标,评价该离体细胞模型与实验动物模型的相似性及其买际应用意义.结果:用含20%脂肪乳剂1.0 mL/L的培养液培养肝细胞48 h即可使肝细胞产生明显甘油三酯堆积.传代培养两代发现肝细胞损伤.产生炎症性损伤.结论:利用脂肪乳剂可以在短时间内建立非酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪性肝炎细胞模型.

血府逐瘀口服液对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及机理

目的观察血府逐瘀口服液对大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型的治疗作用,探讨血栓前状态(prethrombosis state,PTS)在UC发病中的作用。方法用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)制备大鼠UC模型,将动物模型随机分为模型组,模型+生理盐水组,模型+血府逐瘀口服液组,另设空白对照组,共4组。观察各组大鼠肠道大体形态和组织学改变;检测血小板黏附功能(platelet adhesivability,PAdT)和血小板聚集功能(platelet aggregability,PAgT);酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清中的血栓烷B2(thromboxane B2,TXB2)、血管性假血友病因子相关抗原(von Willebrand Factor antigen,vWF∶Ag)和细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)。结果与模型+生理盐水组比较,模型+血府逐瘀口服液组大体形态和组织学损伤指数明显下降(6.02±0.74 vs 0.93±0.36,P<0.01;5.68±0.60 vs 1.13±0.32,P<0.01);模型+血府逐瘀口服液组的PAdT和PAgT较模型+生理盐水组降低(P<0.05);模型+血府逐瘀口服液组的TXB2、vWF∶AgI、CAM-1均较模型+生理盐水组明显降低(P<0.01)。结论TNBS所诱导大鼠UC模型与PTS有一定关系。血府逐瘀口服液通过抗血小板聚集、抗炎症介质而发挥治疗UC作用。

β受体阻断剂卡维地洛抗肝纤维化的作用

目的研究非选择性β受体阻断剂和α-1受体阻滞剂卡维地洛对抗大鼠肝纤维化的作用及机理。方法40只SD大鼠分为4组,分别为正常对照组、肝纤维化组、单用卡维地洛组、卡维地洛治疗组,分别测定各组的肝功能[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白/球蛋白(A/G)],肝纤维化血清指标(PC4、HA、CN),肝纤维化组织学指标(HE染色,Masson染色),SP免疫组织化学法测定肝组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和RT-PCR法测定肝组织转化生长因子β1 mRNA(TGF-β1 mR-NA)。结果与造模组相比,卡维地洛改善了肝功能,血清肝纤维化指标和病理学检查指标都有所下降。结论卡维地洛能够减轻CCl4致大鼠的肝纤维化。

新化合物OSU-03012对结肠癌细胞增殖、迁移以及凋亡的影响

目的在细胞水平上初步探讨新化合物OSU-03012抗结肠癌的机制。方法分别用1、3、5和10μmol/L OSU-03012化合物干预的人结肠癌细胞株HCT-116作为研究对象,以等体积二甲基亚砜(DMSO)处理的HCT-116细胞作为对照组。CCK-8法检测各组细胞干预24、48、72 h时的抑制率,划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫荧光、Western blot检测各组细胞Bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况,Real-time PCR检测各组细胞Bcl-2、Caspase-3 mRNA表达情况。结果对照组、1μmol/L组、3μmol/L组、5μmol/L组和10μmol/L组的细胞抑制率、凋亡率呈逐渐升高趋势,而细胞迁移距离、细胞迁移数目呈逐渐减小或降低趋势,组间多重比较差异均有统计意义(均P<0.05);3、5、10μmol/L组Bcl-2 mRNA和蛋白表达量低于对照组,而Caspase-3mRNA和蛋白表达量高于对照组(均P<0.05)。结论新化合物OSU-03012可抑制结肠癌细胞增殖与迁移,并促进结肠癌细胞凋亡,且呈剂量依赖效应。

SARI及CCNl基因在结直肠癌中的表达及其意义

目的探讨SARI及其下游CCNl基因表达与结直肠癌发生、发展的关系及对预后的影响。方法实时定量PCR检测32例冻存新鲜结直肠癌及癌旁组织SARI、CCNlmRNA表达，逆转录PCR检测人结直肠癌细胞株（Caco一2、HT-29、Lovo）SARI、CCNlmRNA表达。免疫组织化学法检测116例结直肠癌根治切除标本癌及癌旁组织SARI、CCNl蛋白表达。对SARI、CCNl蛋白表达进行关联分析，并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。分析SARI、CCNl蛋白表达水平对患者预后的影响。结果癌组织中SARImRNA表达下调，而CCNlmRNA表达上调（均P〈0．05），在癌细胞株中二者表达趋势与在组织中一致。癌旁组织和癌组织SARI蛋白阳性表达率分别为76．7％和28．4％，CCNl蛋白阳性表达率分别为26．7％和74．1％，差异均有统计学意义（均P〈0．05）；癌组织中SARI蛋白表达与CCNl蛋白表达呈负相关（r=-0．24，P〈0．05）。SARI蛋白阴性表达者肿瘤分化程度差、浸润深度深及TNM分期高（均P〈0．05）；CCNl蛋白阳性表达者，肿瘤浸润深度深且TNM分期高（均P〈0．05）。SARI蛋白阴性表达者，患者术后生存时间明显缩短（x^2=8．47，P〈0．05），SARI蛋白阴性且同时CCNl蛋白阳性表达者，患者术后生存时间进一步缩短（x^2=12．56，P〈0．05）。结论SARI与CCNl异常表达与结直肠癌恶性生物学行为有关，且SARI蛋白阴性表达与结直肠癌患者不良预后有关。

老年患者十二指肠息肉样病变的内镜形态及组织病理学分析

十二指肠息肉占胃肠道息肉的0．3％～4．6％，多数无明显症状。内镜下的十二指肠息肉样病变，组织病理学显示并非均为真性肿瘤，也并非都是良性病变。老年患者好发十二指肠息肉样病变，不同的内镜及组织病理学形态需要不同的诊治方案，因此需要详细鉴别。本研究回顾性分析81例老年患者的十二指肠息肉样病变，探讨其内镜形态及组织病理学方面的特征。