高产类胡萝卜素红法夫酵母的筛选

通过亚硝基胍诱变 ,以色素合成抑制剂二苯胺和 β -紫罗酮为筛选剂 ,筛选到数株类胡萝卜素含量较出发菌株高的突变株 ,其中一株经二次诱变 ,类胡萝卜素含量比亲株提高82 9% ,尝试了 5种酵母生长抑制剂作为筛选剂 ,其中以硫酸铜效果最好。

啤酒腐败菌的分离鉴定及对啤酒的危害

从啤酒厂分离到31株啤酒腐败菌。对其进行了API50CHL试剂条生理生化反应试验。并测定了这31株菌的16SrDNA部分序列,与Genebank中已知序列进行了比较,并以此为依据进行了系统进化关系分析。结果表明,31株啤酒腐败菌分属于5个种,部分腐败菌对啤酒风味有不良影响。

聚合酶链式反应快速鉴定啤酒有害菌研究

建立了PCR快速鉴定啤酒有害菌的新方法。用基于抗酒花基因horA部分序列的特异引物对啤酒污染乳酸菌进行PCR榆测，灵敏度可达到3个细胞（CFU），样品的预培养需12—16h。啤酒有害菌检测所需时间从传统的5d减少到24h。

高产虾青素红发夫酵母的诱变和筛选方法分析

红发夫醇母能够合成较丰富的虾青素 ,为提高其产量 ,一个重要的方法是使用各种物理或化学因子对红发夫酵母进行诱变处理 ,并利用酵母抑制剂作为筛选剂来选育虾青素高产红发夫酵母菌株。文章就此进行了综述。

一株啤酒污染菌的分离鉴定及快速检测方法

在成品瓶装啤酒中分离得到l株有害的污染菌。经表型性状分析、生理生化反应、G＋C含量测定以及16SrDNA序列分析，鉴定为Lactobacillus acetotolerans。建立了1种新的快速鉴定啤酒有害菌的PCR方法，这种方法基于抗酒花基因horA的部分序列。用传统的检测方法检测有害菌需要8-10d，而用新的PCR方法仅需24～32h。

几种化学激活剂刺激虾青素合成的机理研究

研究了几种化学激活剂对红发夫酵母产虾青素的刺激作用。添加一定浓度的亚硒酸钠、氯化镉、氯酸钠和二氧化钛 ,分别使虾青素质量分数提高了 18.6 %、31.4%、30 .6 %和 2 1.3%。并对这些化学激活剂促进虾青素合成的机理进行了探讨。

基于16s rDNA的PCR快速鉴定啤酒腐败菌的研究

从Genebank中下载啤酒腐败菌所在属的63种细菌的16s rDNA序列,用DNAstar软件进行序列对比分析,找出这63种细菌16s rDNA序列所共有的5条同源序列,以这5条同源序列为基础设计出一对适合所有腐败菌的通用引物:上游:5’-GAACAGGATTAGATACCC-3’,下游:5’-GACTTAACCCAACATCTCAC-3’。利用该对引物,可以检测出啤酒厂出现的8种腐败菌,而对啤酒厂出现的13种非腐败菌则不能检出,保证了该引物对啤酒腐败菌的特异性。

红发夫酵母原生质体形成的影响因素

研究了制备红发夫酵母原生质体的影响因素.菌体的培养时间、培养温度、酵母代数、培养基装液量、酶含量、高渗溶质性质、pH值、酶解温度和酶解时间等都对原生质体的形成产生较大的影响.原生质体形成的最适条件是:0～2代酵母在15或25℃培养12～16h,装液量100 mL,用0.8 mol/L KCl作高渗稳定剂,酶含量1％,酶解温度22℃,酶解时间16 h,酶解pH 8.0.

啤酒废酵母自溶制备氨基酸液的研究

本文对啤酒废酵母自溶条件进行了研究，得出自溶最优条件为：助溶剂NaCl2％、自溶温度50℃、自溶时间24小时、pH4．5～7。酵母自溶液对酵母的生长有促进作用。

高产类胡萝卜素红法夫酵母的筛选

通过亚硝基胍诱变 ,以色素合成抑制剂二苯胺和β 紫罗酮为筛选剂 ,筛选到数株类胡萝卜素含量较原发菌株高的突变株 ,其中一株经二次诱变 ,类胡萝卜素含量比亲株提高 82 .9% ,本研究选用了 5种酵母生长抑制剂作为筛选剂 。

一株德国酿酒酵母无抗性电转化条件的研究

无抗性基因转化是实现转基因食品安全性的重要途径之一,转化子筛选是该技术面对的最大瓶颈。本研究以一株德国酿酒酵母NSLA112为材料,探讨了电激转化过程中各参数对该细胞存活率的影响。结果表明:①该酵母与国内常见酿酒酵母有较大差别,电激转化参数需要随不同酵母种类进行调整;②无筛选标记的转化方法要求细胞具有较高的转化效率,同时降低转化操作后细胞的存活数量,以提高筛选工作的效率,较好地平衡了细胞死亡率与转化效率的关系。

一种改进的平板影印工具及其应用

【目的】建立一种简便高效的平板影印工具,克服传统影印工具的缺陷。【方法】将大量竹签按照一定方法捆扎成与平皿内盖直径相近的捆,将单根牙签转移菌落的效果进行扩大,从而实现菌落的大规模转移。【结果】本实验室使用上述工具成功地进行了平板影印和传代,并进行转化子大规模筛选。【结论】与传统工具相比,该影印工具更为经济简便,而且效果清晰,为微生物平板筛选提供新的方法和思路。国家发明专利申请号:2007100291331。

酿酒酵母无标记转化子两种筛选方法比较

基于食品安全性的要求,在涉及食品工程菌株的基因工程改造中不能使用抗生素或抗药性标记,无标记遗传育种法是这一领域的有益尝试,但由于缺乏一种快捷的筛选方法,转化子的筛选成为该方法的瓶颈。通过对传统的羧肽酶Y活性验证和实验室独创的96孔板结合菌落PCR两种筛选方法进行了无抗生素标记的酿酒酵母转化子筛选并对这2种方法进行比较。结果表明,在酵母菌株尚处于杂合基因的状态下,羧肽酶Y活性验证无效;通过96孔板结合菌落PCR的筛选方法可以实现高通量筛选。

用于点样,计数及平板影印的综合模格设计及应用

探讨和设计了一种可以用于点样,菌落计数和平板影印的综合模格,以期为微生物平板筛选方法提供新的方法和思路。国家发明专利申请号:2007100291346。

嗜碱性芽孢杆菌(Bacillus sp)NT-39及其所产碱性淀粉酶的初步研究

从我国内蒙古碱性土壤中分离得到的嗜碱芽孢杆菌(Baciflus sp.)NT—39是一产碱性淀粉酶的菌株。最适生长 pH 为10。革兰氏染色阴性。能利用多种糖、醇类物质作为碳源生长。利用麦芽糖作碳源,产酶活力最高,其次是糊精和可溶性淀粉。利用有机氮源时,产酶活力比利用无机氮源时高。发酵液粗酶制品的作用最适条件为 pH 9,50℃.Ca^(2+)对酶的热稳定性有保护作用。酶在 pH6～11范围内比较稳定。Ca^(2+)、Mn^(2+)对酶有激活作用,Ag^+、Hg^(2+),Zn^(2+)、Pb^(2+)、Al^(3+),Fe^(3+)有抑制作用。

自溶-酶联技术制备啤酒废酵母抽提物工艺及产物理化参数研究

为了提高啤酒酵母的利用率,利用啤酒废酵母资源,采用自溶与添加外源酶相结合的方法制备酵母抽提物。以氨基氮得率、总氮得率和固形物得率为主要指标考察了对酵母自溶影响关键的几个因素,包括自溶促进剂、自溶时间、酶解时间,并在此基础上对酵母酶联自溶进行正交试验,结果表明:自溶-酶联技术是制备啤酒酵母抽提物的理想方法,制成品中氨基氮得率、总氮得率和固形物得率分别达到4.30%、8.98%和59.0%。并对其物理性状、溶解性、pH、干湿比、总氨基酸含量等理化参数指标进行评定。

外加酶促啤酒废酵母自溶制备酵母抽提物及理化性质检测

利用啤酒废酵母资源,采用自溶-酶联技术制备酵母抽提物。以氨基氮得率和固形物得率为主要指标考察了影响酵母自溶的外加蛋白酶的种类及添加量、酵母悬浮液浓度、自溶时间、酶解时间因素,并对酵母酶联自溶的相关促进剂进行正交试验优选。优化确定了后续抽提物生产的旋转蒸发及喷雾干燥工艺的参数,并对其金属离子含量、物理性状、溶解性、pH、总氨基酸含量等理化参数指标进行测评。所制酵母抽提物中氨基氮得率和固形物得率分别达到3.937%和59.24%,理化指标大都达到或超过酵母抽提物行业标准的优级指标要求。

啤酒废酸母残余内源蛋白酶活力的测定及其对酵母自溶的影响

采用超声波破碎法对啤酒废酵母残余的内源蛋白酶进行提取,并以酪蛋白为底物测定内源蛋白酶的活力。通过单因素实验和正交实验,选出了超声波破碎的最佳工艺条件。实验表明:在功率600W,工作时间20min,占空比0.25,反应温度60℃时,超声波对啤酒废酵母的破碎效果最好,此破碎条件下残余内源蛋白酶的活力为1.20×106U/kg(干酵母)。同时,研究了残余内源蛋白酶活力对酵母自溶产物的氨基氮和固形物得率的影响,结果显示它与后两者之间存在显著的相关性。

啤酒废酵母抽提物制备工艺优化研究

以啤酒废酵母为原料,采用自溶结合外加酶法制备酵母抽提物。外加蛋白酶可以提高产物中固形物及氨基氮得率;添加5mg/g干酵母的Protamex时,固形物得率和氨基氮得率分别比不加酶对照提高了24.7%和82.8%;添加5mg/g干酵母的Neurase时,氨基氮得率提高了62.3%。同时添加0.5mg/g干酵母的溶壁酶Lywallzyme和5mg/g干酵母的木瓜蛋白酶处理,上清液氨基氮含量达4580mg/L;固形物得率达60%。

含活酵母白啤酒工艺研究

用小麦取代大米作啤酒酿造原料，并含有活酵母的白啤酒是我国尚未批量生产的新产品。本研究是在国外酿制白啤的基础上对糖化及主酵工艺都做了较系统的试验。研制成功的含酵母白啤酒，理化指标除浊度外（含酵母啤酒的特色是酒液混浊，国家目前还没有含酵母啤酒的浊度标准）都符合国家标准。因含活酵母白啤无氧化味，泡沫细腻，口感独特，营养价值更高，作为一个啤酒新品种应有一定的竞争力。