禽腺病毒血清4型中国流行株fiber2蛋白单克隆抗体制备与鉴定

旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,经过5次亚克隆,获得2株分泌抗fiber2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2C3和7B4。以制备的2C3和7B4腹水进行亚型鉴定、反应原性、特异性以及中和活性测定。结果显示,成功制备了抗FAdV-4 fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,获得的单克隆抗体均为IgM亚型,可特异性识别FAdV-4及其fiber2蛋白,为FAdV-4的免疫检测和fiber2蛋白功能研究提供了研究材料。

《“十四五”国民健康规划》中健康生活水平领域的组态效应——基于清晰集定性比较分析(csQCA)的研究

明确国民健康生活水平领域的内在作用机理,对于实施《“十四五”国民健康规划》(下称《规划》),提高国民体质素养的水平有着重要的现实意义。以“十三五”时期前后关乎国民健康生活水平的18个案例为研究对象,运用清晰集定性比较分析法(csQCA),将《规划》中提出的5个相关指标作为条件变量,探求促进国民健康生活水平发展的组态效应及其作用路径。研究结果表明:居民健康素养水平、国民体育锻炼参与度、重大慢性病死亡率、婴幼孕死亡率、人均预期寿命单一因素的发展并不能显著提高国民健康生活水平,多因素之间的组合共同作用才能达到《规划》的目的;可通过四种作用路径来促进国民健康生活水平的提升,且各个路径之间作用效果相同,其之间具有可替代性,都可以达到提高国民能健康生活水平的目标。

基于定性比较分析乡村振兴战略下农村公共体育服务发展的影响因素与组态效应

选取2015年至2021年间关于农村公共体育服务发展的16个典型案例为研究样本,应用清晰集定性比较分析法(csQCA)归纳出条件变量的集合,探究农村公共体育服务发展的影响因素,明确促进农村公共体育服务发展的7种条件组态路径,在布尔代数算法优化下,推出5种作用机制。结果表明:政府治理水平、农民收入水平、农村体育基础设施、农民体育服务需求表达和体育人才队伍建设是农村公共体育服务发展的影响因素,且各因素在不同的路径中所起到的作用不同;促进农村公共体育服务发展的原因是多因素间的组态效应,并不是单因素导致的“净效应”,进而将5种发展作用机制分为政府主责型发展、农民内生需求型发展、人才引导型发展、要素均衡型发展、生活必要参与型发展。

花样滑冰双人滑短节目比赛研究——基于2022年北京冬奥会

花样滑冰双人滑是我国优势运动项目,具备摘金夺银的实力,在2022年北京冬奥会中我国花样滑冰双人滑组合隋文静/韩聪获得金牌,在此项目的短节目部分我国代表队的表现尤为突出。以2022年北京冬奥会花样滑冰双人滑短节目前六名的参赛组合为研究对象,通过视频观察、文献资料、数理统计等研究方法,对各参赛组合在技术部分的组成和节目的内容进行研究分析。研究结论指出:双人滑短节目比赛占优更有利于后续自由滑比赛部分的发挥;花样滑冰双人滑项目的竞争格局是中国与俄罗斯参赛组合之间的实力角逐;双人滑短节目分值比例中影响较大的部分是技术得分(TES),比赛取胜的关键是技术动作细节上的处理与完善;抛跳(Th)、捻转托举(Tw)成为选手拉开分值差距的关键技术动作。

体育与健康课程核心素质培养的影响因素与实现路径研究——基于《课程标准(2022)版》

新课标制定与施行对当前义务教育阶段的学生发展起到前瞻的指向性作用,具有重要研究价值。研究选取2017-2022年中关于体育与健康课程核心素质培养的十个典型案例作为研究对象,通过定性比较分析法(QCA)经fsQCA3.0软件梳理归纳出影响体育与健康课程核心素质培养的关键因素,并以此为前因条件变量,探究实现体育与健康《课程标准(2022)》核心素质的组态路径。研究结论:体育品德、学生适应外界环境的能力、体技战术能力、学生体育锻炼意识四种条件变量组成了五种组态路径;经事实合理性分析得到三种发展模型分别是学生成长需要型、核心素养全面发展型、思想意识推动型。

禽腺病毒4型中国流行株Fiber2蛋白的原核表达与间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立禽腺病毒4型(FAdV-4)特异性抗体检测方法,将密码子优化合成的FAdV-4中国流行株Fiber2蛋白的编码基因克隆于pET-32a(+)载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。用纯化的Fiber2蛋白作为包被抗原,通过一系列条件的优化,建立了一种检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法。结果:该方法可以特异地检测抗FAdV-4抗体,与新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、H5和H9亚型禽流感病毒等常见禽病毒的抗血清均无交叉反应,表明所建立ELISA具有较好的特异性;FAdV-4阳性血清经1?3 200稀释后检测结果仍为阳性,表明所建立ELISA方法具有较高的敏感性;所建立ELISA的批内和批间重复试验的变异系数分别为1.5%~5.2%和1.1%~5.6%,表明其重复性良好。应用建立的ELISA方法对河南省及周边部分地区养禽场内FAdV-4的感染情况进行了血清流行病学调查,结果显示被检地区养禽场均存在不同程度的FAdV-4型抗体阳性,平均阳性率为59.53%。由此表明本研究所建立的ELISA方法可以用于FAdV-4感染的监测和流行病学调查。

表达禽腺病毒4型中国流行株Fiber2蛋白重组新城疫病毒的构建与鉴定

利用NDV LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统,将禽腺病毒4型(FAdV-4)中国流行株的全长Fiber2基因插入到NDV基因组的P和M基因之间,构建并拯救出重组病毒rLaSota-Fiber2。利用RT-PCR和序列测定,以及Western blot对重组病毒进行了鉴定。结果显示,Fiber2基因插入位置和方向正确,Fiber2蛋白得到正确表达,表达形式为可溶的游离形式而非嵌入到NDV颗粒中。第10代重组病毒的鸡胚致病性试验和在鸡胚中的生长特性研究结果显示,重组病毒的半数鸡胚感染量(EID50)最高可达108.5/100μL,鸡胚平均致死时间(MDT)为120 h, 1日龄雏鸡脑内接种指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)均为0,重组病毒保持了LaSota弱毒疫苗亲本毒株的低致病特性和对鸡胚良好的高滴度生长适应性。重组病毒与亲本LaSota株生长滴度在相近时间达到峰值,生长动力学特性与亲本株无明显差异。本试验构建的表达FAdV-4中国流行株Fiber2基因的重组病毒rLaSota-Fiber2有望为同时防控NDV和FAdV-4的感染提供安全、廉价和高效的辅助工具。