基于肠屏障功能探讨血府逐瘀胶囊防治卒中后抑郁作用研究

目的明确血府逐瘀胶囊对卒中后抑郁(PSD)的治疗效果,并基于网络药理学线索利用实验验证其关键作用途径。方法利用tMCAO复合慢性不可预知应激手段复制大鼠PSD模型,实验设置假手术组(SHAM组),模型组(PSD组),血府逐瘀胶囊高(XFH,2.16 g·kg^(-1))、低(XFL,0.43 g·kg^(-1))剂量组,氟西汀(FLU,0.0018 g·kg^(-1))组。除SHAM组和PSD组外其余各组每日灌胃给药,连续28 d。利用神经行为学评分、糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验、HE染色技术考察血府逐瘀胶囊防治PSD的药效作用,利用网络药理学技术初步探讨其关键作用环节;基于肠屏障功能,利用FITC标记的葡聚糖肠道渗透性、HE染色技术验证血府逐瘀胶囊对肠屏障功能的影响;利用Western blot技术考察血府逐瘀胶囊对大鼠结肠组织胞质紧密连接蛋白1(ZO-1),紧密连接蛋白(Occludin),紧密连接蛋白1(claudin-1)表达的影响。结果药效学结果显示,与SHAM组相比,PSD组大鼠神经行为学评分显著升高,糖水偏好率、自主活动显著降低,不动时间显著延长,神经元细胞数目减少、胞核固缩。与PSD组相比,XFL组相关症状逐步改善,神经行为学评分显著降低,糖水偏好率、自主活动明显增加,强迫游泳的不动时间显著减少,神经元细胞数目增多,核固缩减少。网络药理学结果显示,血府逐瘀胶囊可调节炎症,抑制MAPK信号通路的激活,继而上调紧密连接蛋白的表达来修复肠屏障,提示其防治PSD作用可能与改善肠屏障功能有关。利用整体动物实验对肠屏障功能进行验证,结果表明与SHAM组相比,PSD组肠道渗透性显著增加,肠黏膜病理损伤,病理评分明显升高,肠组织ZO-1、Occludin与claudin-1表达水平显著下降;与PSD组相比,XFL组的结肠通透性显著降低,肠黏膜病理损伤减轻,肠组织ZO-1、Occludin和claudin-1的蛋白表达水平显著升高。结论血府逐瘀胶囊可通过上调肠组织紧密连接蛋白表达改善脑缺血导致的肠屏障功能,进而发挥防治PSD作用。