抗呼吸道合胞病毒(RSV)单克隆抗体的制备及其对RSV病毒株抗原性的分析

用呼吸道合胞病毒R6(武汉地方株)活毒滴鼻加用戍二醛固定的病毒感染的Hela细胞免疫BALB/C鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤SP_2/0细胞融合,培育出分泌抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞13株,这些细胞的染色体数为94至104条,其分泌的抗体分别属于鼠IgC_1、IgG_(2a)、IgG_(2b)亚类。腹水荧光抗体滴度为1:10000～1:100000。其中五株单抗有中和病毒作用,尤其是两株中和放价达1:128。应用免疫转印法证实了这些单抗分别能识别RSV6种主要结构蛋白,用7株识别不同病毒结构蛋白的单抗对12株合胞病毒进行抗原性分析,可将这些病毒区分为二个血清型,即A亚型和B亚型。

鱼呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

采用杂交瘤技术,用浓缩的鱼呼肠孤病毒(Fish Reovirus FRV)免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/O细胞融合,经筛选克隆,共获得B_7、C_6.D_9.G_7、E_4、F_5,F_7七株分泌抗鱼呼肠孤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这七株细胞经液氮反复冻存、复苏及连续培养,可稳定分泌抗FRV的单克隆抗体.这七株杂交瘤细胞的染色体数为90～98条,明显高于SP2/O细胞(71条).分泌的单克隆抗体经琼脂双扩散法证实分别属于小鼠r球蛋白中的IgG_1、IgG_(2a)和IgG_(26)亚类.ELISA测得腹水抗体滴度1:2万～1:40万,病毒中和试验显示C_6、G_7有中和作用,滴度达1:64.

大丽花的组织培养

植物名称:大丽花(Dahlia variabilis),又名大丽菊. 材料类别:叶柄、叶片。培养条件: (1)诱导愈伤组织培养基MS+BA1.0mg/L+NAA0.8mg/L。 (2)芽分化培养基MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L。 (3)生根培养基1/2MS+NAA0.5mg/L。以上培养基中附加白糖30g/L,琼脂5g/L。培养室温度26±2℃,每天辅助照明12小时,光强度1000～1500lx。生长与分化情况:取大丽花叶柄、叶片用自来水冲洗,洗衣粉漂洗5mim后,再用自来水冲洗,然后将叶柄切成约1cm长,叶片切成约1cm^2小块,用0.

炭凝集试验快速检测轮状病毒的研究

用炭凝集试验检测轮状病毒,结果表明该法是一种简便、快速、特异的诊断方法.用炭凝集试验及聚丙烯酰胺凝胶电泳法对105份粪样进行检测,结果两法阳性检出率无显著性差异,说明炭凝集试验可应用于临床.

炭凝集试验快速检测呼吸道合胞病毒的研究

用炭凝集试验（ＣＡＴ）检测呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ），结果表明该法是一种简便、快速、特异的诊断方法。用ＣＡＴ对１６株ＲＳＶ和８株其它病毒做试验，结果仅ＲＳＶ凝集，而其它病毒均阴性。用该法与细胞培养法检测８３份临床呼吸道感染幼儿鼻咽吸出物，结果ＣＡＴ法阳性率为６９．８８％（５３／８３），细胞培养法为３９．７５％（３３／８３），两者阳性检出率相差极显著。阻断试验证明ＣＡＴ是高度特异的。结果证明ＣＡＴ具有较高的敏感性与特异性，可用于临床ＲＳＶ标本的快速检测。

1988年武汉地区急性出血性结膜炎的病原学研究

急性出血性结膜炎是一种潜伏期短、发病急，传染性强的传染病，近20年曾多次引起世界性大流行，现巳证实肠道病毒70型和阿萨奇A24型变异株是其主要病原。70年代初急性出血性结膜炎(AHC)巳传播到我国，曾多次在我国引起流行，但主要病原为肠道病毒70型(EV70)。l988年我国又发生大流行，我们作了病原学研究，证实为柯萨奇A24型变异株(CA24V)引起，现将结果报告如下。

龟背竹的液体静置组织培养

植物名称：龟背竹(Monstera deliciosa Liebm),又名电线兰。材料类别：茎段。

孕产妇及胎婴儿巨细胞病毒感染的分析

采用间接免疫酶组化法检测1253例孕妇和40例有反复流产、畸胎、死胎史的优生咨询者及14例孕妇巨细胞病毒IgM(HCMV-IgM)阳性的新生儿脐血的HCMV-IgM。结果:孕妇HCMV-IgM阳性率为8.06％,16例反复流产者阳性3例,13例畸胎史者阳性5例,11例死胎史者阳性2例。14例新生儿脐血阳性11例。提示HCMV感染与致畸、自然流产,死胎有密切关系,新生儿可从HCMV-IgM阳性的母亲获得先天性感染。

抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及其病毒蛋白特异性的识别

应用呼吸道合胞病毒(RSV)武汉地方株滴鼻加用病毒感染的Hela细胞免疫Balb/C鼠,取脾细胞与来自实体瘤的SP2/0细胞融合,培育出分泌抗RSV单克隆抗体的杂交瘤细胞株8株其中3株有中和病毒作用。应用RSV感染Hela细胞作为RSV抗原建立了RSV的免疫转印方法,并应用免疫转印对各单抗的病毒蛋白特异性进行了初步识别:发现1株单抗识别RSV M蛋白,1株识别22 K蛋白,2株识别G蛋白,另外4株单抗的蛋白特异性尚待进一步研究确定。

白花紫露草的液体静置组织培养

1 植物名称白花紫露草(Tradescantia fluminensis)。 2 材料类别茎段。 3 培养条件 (1)诱导腋芽生长用MS+BA 3.5mg/L+NAA 0.5mg/L的液体培养基,培养材料以聚氨酯海绵作支持物。(2)诱导根分化用1/2MS+NAA 0.5mg/L固体培养基,pH5.7±0.1,培养室温度26±2℃,光照强度1000～1500lx,每天光照12h。 4 生长与分化情况选取白花紫露草茎,去叶漂洗干净后,将茎段切成约1cm长带节茎段,

呼吸道合胞病毒自然温度敏感株的研究Ⅰ．呼吸道合胞病毒自然温度敏感株的筛选及其特

本文利用离心蚀斑法从武汉地区１９７８－１９８３年及１９８７－１９９２年的７３株呼吸道合胞病毒流行毒株中直接筛选出１７株自然温度敏感株，并以３３°／３９．５°Ｃ的ＩｇＰＦＵ相差≥３作为确定自然温度敏感株的标准。每年筛选出自然温度敏感株的比例平均为１５－ｌ７％；根据毒株温敏性状的差异，将呼吸道合胞病毒流行株分为ｔｓ￣＋，ｔｓ￣±与ｔｓ毒株；并初步发现Ｂ亚型毒株所含的自然温敏株的比例明显高于Ａ型毒株（Ｐ＜０，０５）。初步测定２株该自然温敏株的遗传稳定性，结果显示具有较稳定的特性。本文结果提示，呼吸道合胞病毒在自然界不仅存在Ａ，Ｂ两亚型变异，也存在温敏性状的变异，可能存在毒力的变异。

呼吸道合胞病毒A、B亚型变异的进一步研究

利用抗呼吸道合胞病毒的单克隆抗体，通过间接免疫荧光法和免疫转印法对本室分离到的武汉地区1988年～1993年的72株呼吸道合胞病毒进行了分型，可将其分为A、B两型和B_1、B_2亚型；其中,A型株占29.2％，B型株占70.9％。流行病学分析显示，本地区呼吸道合胞病毒流行株5年中有4年以B型株为主；A、B两型的分布还具有局灶化特点；两型在性别、发病年龄方面无显著性差异。

人类呼吸道合胞病毒的抗原变异

人类呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的抗原结构复杂。近年来，对ＲＳＶ抗原变异的研究进展较快，本文从分子生物学角度对此进行了介绍，并对抗原型的流行病学特点，免疫学差异及其在重复感染中的作用等进行讨论。

武汉地区1988—1992年呼吸道合胞病毒流行株的抗原性分析

利用呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ），通过间接免疫荧光法和免疫转印法对本室分离到的武汉地区１９８８一１９９２年的５６份ＲＳＶ毒株进行了分型，可将其分为Ａ、Ｂ两型和Ｂ１、Ｂ２亚型。流行病学分析显示：本地区ＲＳＶ的主要流行株，四年中有三年为Ｂ型株，不同于欧美等地；Ａ、Ｂ两型的分布还具有局灶化分布的特点；两型在性别、发病年龄之间无显著性差异。

呼吸道合胞病毒分子生物学研究进展

呼吸道合胞病毒(RSV)是副粘病毒属中蛋白组成最复杂的病毒,已知至少有10种蛋白成分,并对各蛋白成分功能均有所新的了解。至于核酸的研究,对基因序列及基因工程疫苗也有了一定的进展。此外本文对RSV的亚型研究也作了较详细介绍。

呼吸道合胞病毒G基因的扩增

用未纯化的呼吸道合胞病毒(RSV)细胞混和物,采用改良胍—热酚法提取病毒mRNA,反转录合成cDNA,经PCR扩增得到大小约920bp的产物。经PstⅠ酶切表明其中含有PstⅠ酶切位点,证实其产物确为RSV G基因。此法简便、特异、敏感、快速。由于RSV极不稳定,RNA甚易降解,此法值得推广应用。

呼吸道合胞病毒离心蚀斑技术的建立

建立了一种呼吸道合胞病毒蚀斑新技术。将细胞悬液与病毒混合离心能使蚀斑数量显著增多，出斑时间缩短。同时蚀斑数量和出斑时间与离心力和离心时间成正比，细胞浓度以２．５×１０￣８／Ｌ、甲基纤维素浓度以１．５％为宜。与快速法及常规蚀斑法相比，离心蚀斑技术的出斑时间平均比后两者快２天左右，出斑达高峰时间比后两者提前３天左右。且本法具有蚀斑明显，敏感，重复性好，简便易行等特点。

油类佐剂对于伤寒菌抗原性的影响——Ⅱ.液体石蜡乳剂与氢氧化铝对伤寒菌体及伤寒可溶性抗原的抗原性比较

一般用佐剂加于菌苗者多用氢氧化铝,因菌体巳属颗粒性物质,若再加氢氧化铝,恐增加局部反应的严重性,故多将菌体裂解制成可溶性抗原,再吸附在氢氧化铝上。我们上次实验的结果,虽巳证明液体石腊油有增强伤寒菌苗抗原性,且其效果高于其他各种植物油,然是否亦优于氢氧化铝仍需证明。在另一方面若将菌体裂解成可溶性抗原,是否对细菌的抗原性亦有影响,故考虑到改用肌肉注射,以减轻局部反应。

油类佐剂对于伤寒菌抗原性的影响——Ⅰ.比较各种常用油类的效力

用油类为佐剂以增强菌苗的免疫性已有四十余年历史,然未曾被从事于菌苗制造及实施预防注射者所重视。最近十余年虽有许多学者对此工作做了不少的研究以改进其制造方法。如油类及乳化剂的选择,油类乳化剂与疫苗的比例等,以求增加疫苗及菌苗或其他物质的抗原性及致敏性。在动物及人体试验时。

特异性免疫血浆治疗呼吸道合胞病毒感染的疗效观察

确诊为呼吸道合胞病毒（RSV）感染的患者52例，其中治疗组27例，对照组25例。在病程早期用含有高效价RSV抗体的血浆静滴治疗，结果喘息、咳嗽与肺部体征消失的时间，治疗组较对照组明显缩短，两级有非常显著性差异。说明用特异性免疫血浆治疗RSV感染是有效的。