化学发光法丁型肝炎病毒IgG抗体检测试剂性能评价

目的对抗丁型肝炎病毒(HDV)IgG试剂(化学发光法)的性能进行评价。方法用基于磁微粒化学发光免疫分析平台的抗-HDV IgG试剂、厦门万泰凯瑞抗-HDV IgG试剂(国产试剂A)、基于酶联免疫吸附法的北京万泰抗-HDV IgG试剂(国产试剂B)和基于荧光定量PCR检测平台的HDV RNA试剂分别对1909例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性样本进行检测,并结合检测的阴/阳性结果评价3种抗体试剂的特异度和正确率之间的差异;同时,参照美国临床和实验室标准化协会的EP5-A2文件,采用高、中和低3个浓度水平的阳性样本对抗-HDV IgG试剂进行精密度评价。用抗-HDV IgG试剂对545份HBsAg阳性且HDV IgG阴性样本和北京大学肝炎试剂研究中心的200份甲型肝炎病毒IgM抗体(HAV IgM)阳性样本、350份丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)阳性样本、200份健康人体检样本进行检测,以评价抗-HDV IgG试剂的特异性。最后,用抗-HDV IgG试剂与国产试剂A测试545例HBsAg阳性且抗-HDV IgG阴性样本和37例抗-HDV IgG阳性样本,对抗-HDV IgG试剂的符合率进行评价。结果4种试剂在对1909份HBsAg阳性样本的检测中,筛查到19份抗-HDV IgG真阳性样本;抗-HDV IgG试剂的正确率和特异度较好;抗-HDV IgG试剂对高、中和低3个水平样本检测的批内精密度CV值在1.57%~4.30%之间,批间精密度CV值在1.71%~4.67%之间,精密度良好;与国产试剂A进行比较,阴/阳性符合率一致。结论本研究中抗-HDV IgG试剂(化学发光法)对临床样本的检测具有较高特异度,表现出与商品化试剂一致的符合率,可用于HBsAg阳性样本中抗-HDV IgG的筛查。

国产丁型肝炎病毒核酸检测试剂的性能评估和初步临床应用

目的对一种国产丁型肝炎病毒核酸定量试剂(简称"国产HDV RNA试剂")进行质量评估和初步临床应用探索。方法基于Bio-Rad CFX Opus 96实时荧光定量PCR分析系统的国产HDV RNA试剂对WHO HDV RNA国际标准品系列稀释样本进行分析,对国产HDV RNA试剂的灵敏度和准确度进行评价,并将人工合成的假病毒或病毒培养物稀释后用于国产HDV RNA试剂线性范围评价;采用国产HDV RNA试剂对HAV、HBV、HCV感染的阳性样本以及HEV国家参考品进行分析,对其特异性进行评价;用国产HDV RNA试剂测试高、低两个水平的样本,进行精密度评价;用基于ABI 7500 FAST DX荧光定量PCR仪的RoboGene HDV RNA作为对比试剂与国产HDV RNA试剂平行检测30例丁型肝炎病毒抗体IgG(HDV IgG)阳性样本,采用Pearson相关系数(r)评价2种试剂的相关性。结果国产HDV RNA试剂的灵敏度为6 IU/ml,与对比试剂宣称的灵敏度一致;对WHO HDV RNA标准品的标定曲线的斜率为-3.286,扩增效率为101.6%,对8种HDV基因型的线性检测范围为10~108 IU/ml;与HAV、HBV、HCV和HEV不发生交叉反应;对5个浓度水平样本的准确度评价符合要求,对高、低两个水平样本的批内精密度变异系数在1.20%~4.20%,批间精密度变异系数在1.20%~7.90%。对HDV IgG阳性样本的检测结果与对比试剂一致(r=0.984,P<0.001),与测序结果比较准确率为100%。结论本研究中国产HDV RNA试剂表现出较好的特异性、准确度、精密度和较宽的线性范围,灵敏度达到国际同类型试剂的水平。