神经血管单元在缺血性脑水肿中作用机制和中药对其治疗的研究进展

脑水肿是神经系统疾病常见的并发症之一,其最初是由脑缺血、颅内感染、颅脑外伤等疾病所引起的。其中在临床上,缺血性脑水肿的发病率尤为突出。近些年,神经血管单元成为神经系统的研究热点,不同细胞及细胞间的相互作用在脑水肿的作用越来越受到关注。本文就参与缺血性脑水肿的不同细胞来阐述其发病机制及中医药对其治疗的特色作一阐述。

锁阳乙酸乙酯提取物的雌激素样作用研究

雌激素提高学习记忆能力的功能已被广泛承认,前期实验证实锁阳乙酸乙酯提取物(ECS)可表现出雌激素样作用,提高去卵巢大鼠的学习记忆能力及血清E2水平,对Aβ损伤SK-N-SH细胞有一定的保护作用。为了进一步研究ECS的雌激素样作用机制,拟在小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2A)上探寻ECS对学习记忆相关蛋白突触素蛋白synaptophysin和环磷腺苷效应元件结合蛋白表达影响。采用CCK8法测定ECS对小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2A)细胞活力的影响。将小鼠神经母细胞瘤细胞分为正常组、DMSO组、ECS组、Tamoxifen组、Tamoxifen+ECS组;正常组、ECS组、ECS+G15组和正常组、DMSO组、ECS组、PD98059组、PD98059+ECS组。采用Western blot法测定synaptophysin,p-creb蛋白表达情况。实验表明锁阳乙酸乙酯提取物可促进synaptophysin,P-CREB表达,ER受体竞争性拮抗剂Tamoxifen可降低synaptophysin表达,对ECS促进synaptophysin表达无显著影响。GPR30受体特异性阻断剂G15可显著降低ECS促进synaptophysin表达。p-CREB上游Erk1/2-MAPK通路的阻断剂PD98059可显著抑制ECS上调p-CREB表达,结合前期实验结果,我们认为ECS可与GPR30结合通过MAPK通路促进学习记忆相关蛋白synaptophysin表达。

通络清脑注射液通过减轻星形胶质细胞神经肿胀及抑制HMGB1/TLR4炎症通路对脑缺血再灌注大鼠脑水肿的影响

目的运用大鼠脑缺血再灌注模型,观察通络清脑注射液(TLQN)及其单体对缺血再灌注大鼠急性期水肿的及高迁移率族蛋白(HMGB1)/Toll样受体(TLR4)通路的影响。方法用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,随机分为再灌注组(CIR)、TLQN组、三七总皂苷(PNS)组、栀子苷+黄芩苷(BA+GE)组,手术当天给药,尾静脉注射给药2 d,每天1次。假手术组(Sham)正规饲养,设立再灌注24和48 h为观察期。①观察PNS对脑缺血再灌注小鼠的神经功能评分、脑干湿重影响;②采用生化法检测小鼠脑缺血侧皮层IL-6,IL-1β,IL-10,TNF-α浓度含量;③Western印迹法检测TLQN及其单体对缺血再灌注大鼠24和48 h皮层GFAP,AQP4,HMGB1,TLR4和p-NF-κB表达及蛋白水平的变化。④免疫荧光检测TLQN及其单体对缺血再灌注大鼠24和48 h皮层GFAP,AQP4,HMGB1,TLR4和p-NF-κB表达及蛋白水平的变化。结果①神经功能评分结果显示,再灌注大鼠出现明显的神经功能缺损症状,与24和48 h CIR组相比,TLQN(48 mg·kg^-1)组、PNS组和BA+GE组大鼠神经功能评分明显降低(P<0.05);与Sham组相比,再灌注24和48 h,CIR组大鼠脑含水量明显增加(P<0.01),TLQN(48 mg·kg^-1)组小鼠在再灌注24 h后脑含水量明显降低(P<0.01);再灌注48 h,BA+GE组和PNS(60和120 mg·kg^-1)组脑含水量明显降低(P<0.05)。②炎性因子检测结果显示,与Sham组相比,CIR组大鼠缺血侧大脑皮层IL-6,IL-1β,TNF-α明显上升(P<0.01),IL-10无明显变化(P>0.05);给予TLQN和PNS(48和12 mg·kg^-1)干预后,再灌注24和48 h后,大鼠缺血侧大脑皮层IL-6,IL-1β,TNF-α明显下降(P<0.01)。③Western印迹结果显示,与Sham组相比,CIR组大鼠缺血侧大脑皮层AQP4浓度明显升高(P<0.01),GFAP激活(P<0.01),并且HMGB1,TLR4和p-NF-κB也明显上升(P<0.01);给予TLQN和BA+GE组,PNS(48和12 mg·kg^-1)干预后,再灌注24和48 h后,大鼠缺血侧大脑皮层AQP4浓度显著降低(P<0.05);GFAP明显受到抑制(P<0.05),HMGB1,TLR4和p-NF-κB含量也明显下调(P<0.05)。④免疫荧光结果与Western印迹法相似,与Sham相比,CIR组大鼠缺血侧大脑皮层AQP4浓度明显升高(P<0.01),GFAP激活(P<0.01),并且HMGB1,TLR4,p-NF-κB也明显上升(P<0.01);给予TLQN和PNS(48和12 mg·kg^-1)干预后,再灌注24和48 h后,大鼠缺血侧大脑皮层AQP4浓度显著降低(P<0.05);GFAP明显受到抑制(P<0.05),HMGB1,TLR4,p-NF-κB含量也明显下调(P<0.05)。结论TLQN可以抑制缺血再灌注大鼠急性期梗死区域面积扩大及脑水肿的损害,其作用机制可能是通过减轻HMGB1/TLR4炎性通路,从而降低星形胶质细胞肿胀和AQP4的表达。

去卵巢所致老年痴呆模型的研究探讨

阿茨海默病又称老年痴呆,是一种神经退行性疾病,目前去卵巢所致老年痴呆模型(OVX)已被广泛应用于实验研究。本文对OVX模型的制作方法、行为学、组织病理学和生化学等方面,集合近20年的文献,对其发展进行阐述。

锁阳乙酸乙酯提取物改善慢性应激小鼠认知功能障碍的神经保护机制

本实验以去卵巢后慢性应激模型,探究锁阳乙酸乙酯提取物(ECS)改善慢性应激小鼠认知功能障碍的神经保护机制。采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,Western Blot检测海马组织突触蛋白中突触囊泡蛋白(synaptophysin,Syn)和突触后致密物(Postsynaptic density protein 95,PSD-95)表达量,通过海马组织形态学改变进一步证明ECS的神经保护作用。Morris水迷宫结果显示雌鼠锁阳乙酸乙酯组穿越平台次数增加(P<0.01)。Western Blot结果显示,ECS可增加Syn(P<0.05)与PSD-95(P<0.05)蛋白表达量。HE染色结果显示ECS可减轻海马神经元损伤,改善海马CA1区锥体细胞形态。结果表明ECS能够增加去势后慢性应激小鼠突触蛋白中Syn与PSD-95的表达量,保护海马神经元,改善慢性应激所致学习记忆障碍。

锁阳乙酸乙酯提取物改善慢性应激认知功能障碍MAPK/ERK1/2通路机制

目的探究锁阳乙酸乙酯提取物(ECS)对去势后慢性应激小鼠认知功能障碍MAPK/ERK1/2信号通路中磷酸化的胞外信号调控激酶1/2(P-Erk1/2)和磷酸化的c AMP反应元件蛋白(P-CREB)表达量的影响。方法将实验动物采用随机数字法分为对照组、模型组、ECS组,除对照组外,模型组和ECS组,采用去势后慢性应激造模,ECS组同步灌胃ECS。在造模8周后采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,造模成功时取材海马组织检测Western Blot。结果:Morris水迷宫结果显示,模型组较对照组穿越平台次数减少(P<0.01),ECS组较模型组穿越平台次数增加(P<0.01)。Western Blot结果显示,P-Erk1/2蛋白表达量模型组较对照组显著减少(P<0.01),ECS组较模型组显著增加(P<0.01);P-CREB蛋白表达量模型组较对照组显著减少(P<0.05),ECS组较模型组显著增加(P<0.05)。结论 ECS改善去势后慢性应激小鼠认知功能障碍机制之一可能是通过上调MAPK/ERK1/2信号通路中P-Erk1/2与P-CREB的蛋白表达量。

中药治疗对氯苯丙氨酸失眠模型大鼠影响的基础研究进展

失眠作为一种常见的疾患,给人们的正常工作和生活带来严重的不良影响,甚至会诱发或加重多种身体疾病。目前催眠镇静的药物以苯二氮卓类和巴比妥类为主,虽起效快,但均可引起不可避免的不良反应。大量研究表明中药治疗失眠具有无成瘾性、依赖性等特点。腹腔注射氯苯丙氨酸是目前常用的失眠造模方法,通过搜集、整理中药对PCPA诱导失眠模型大鼠影响的实验文献,从动物行为学改变及作用机制等方面进行阐述,以期为研究者更深入地研究中药治疗失眠的机制提供参考。

衡水市蚊蝇抗药性测定

为了解衡水市蚊蝇抗性程度,于1991年8—9月份分别以浸液法和点滴法对市区的谈色库蚊幼虫和不同场所的家蝇进行了敌敌畏、敌百虫、γ-666、残杀威、溴氰菊酯、

锁阳乙酸乙酯提取物对去势所致老年痴呆大鼠p38、p-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的影响

目的研究锁阳乙酸乙酯部位提取物对去卵巢所致痴呆大鼠的影响及可能的相关机制。方法 SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、假手术组、阳性药组、锁阳乙酸乙酯给药组。采用双侧去卵巢造成大鼠老年痴呆模型,采用Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力的改变,HE染色观察海马部位神经元形态学改变,Western blot检测磷酸化p38、p-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的表达。结果锁阳乙酸乙酯给药组的潜伏路程、第一次穿越平台时间较模型组有明显改善。染色结果显示,锁阳给药组可显著改善海马CA1区锥体细胞形态,使之排列整齐、均一、结构清晰;Western blot检测中,p-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白表达,在给药组和模型型组之间有显著性差异。结论锁阳乙酸乙酯部位可显著改善去势大鼠学习记忆能力,可能与调节p38,p-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的表达水平密切相关。

锁阳乙酸乙酯部位对去卵巢痴呆大鼠学习记忆功能和海马神经元形态的影响

目的研究锁阳乙酸乙酯部位提取物对去卵巢大鼠行为学和突触形态的影响。方法 SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、阳性药组、锁阳乙酸乙酯部位组(锁阳组)。采用双侧去卵巢造成大鼠老年痴呆模型,手术后1周,阳性药组给予雌二醇,锁阳组给予锁阳乙酸乙酯部位提取物(33 mg/kg)灌胃,给药8周后,连续6 d用Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力的改变。然后灌注取材,采用HE染色、免疫组化生长相关蛋白(GAP-43)和超微透射电镜来观察大鼠海马区神经元形态的变化。结果锁阳组潜伏路程、穿越平台次数较模型组有明显的改善(P<0.01)。HE染色显示,锁阳组海马CA3区锥体细胞形态得到改善,排列整齐、均一、结构清晰。GAP-43免疫组化显示,锁阳组灰度值较模型组显著增高(P<0.01)。透射电镜观察显示,锁阳组海马神经细胞较模型组有变化,神经元细胞核结构清晰,核仁呈圆形居中央,胞质呈空泡。结论锁阳乙酸乙酯部位可以提高去势所致老年痴呆大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆功能,并且可以促进大脑海马区GAP-43蛋白的含量,从而促进神经细胞突触的形成。

天丝饮对去势大鼠学习记忆的影响及神经营养相关的研究

目的:研究天丝饮对去势所致老年痴呆模型行为学及神经营养相关的研究。方法:50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、假手术组、雌二醇组、天丝饮组。通过双侧去卵巢造成老年痴呆模型,手术1周后,雌二醇组及天丝饮组分别给予雌二醇(0.2mg/m L)、天丝饮(0.35g/kg),灌胃8周。采用Morris水迷宫检测其5d的学习行为能力,Western blot测试其海马组织中p-p38 MAPK,p-CREB,BDNF的含量。结果:在Morris水迷宫中,与模型组比较,天丝饮组潜伏距离缩短(P<0.05),穿越平台次数明显增多(P<0.01)。Western blot表明,与模型组比较,天丝饮组能降低大鼠大脑海马区p-p38 MAPK的表达,升高p-CREB、BDNF的表达(P<0.01)。结论:天丝饮在一定程度上通过抑制大鼠大脑海马神经区神经凋亡和增强神经营养,改善去势大鼠的学习记忆能力。