儿童急性肾损伤相关新型生物标志物的研究进展

急性肾损伤(AKI)是儿童住院患者常见的急重症,其发病率和死亡率都很高。AKI病程进展迅速,早期诊断和风险预测能够辅助临床医生及时开展治疗,有效改善患儿预后。传统的生物标记物血清肌酐(SCr)与肾功能相关,但不能及时反映肾脏的损伤情况。目前,许多新的、有潜力的生物标志物,如中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子1(KIM-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP7)以及金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)等被广泛研究。儿童有其独特的生长发育规律,同一生物标志物在不同年龄段的基线水平不同。文章综述了这些新的AKI生物标志物的病理生理学基础,在AKI患儿早期诊断、风险分层、预后评估中的应用及其与成人患者的差异。

儿童急性淋巴细胞白血病ABCB1、ABCC4和SLCO1B1多态性与大剂量MTX血药浓度及不良反应的相关性

目的探讨三磷酸腺苷结合盒转运体B1、C4(ABCB1、ABCC4)和溶质载体有机阴离子转运体(SLCO1B1)基因多态性与急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿甲氨蝶呤(MTX)血药浓度及大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)所致药物不良反应(AE)的相关性。方法收集2018年1月至2019年12月首都医科大学附属北京儿童医院收治的接受HD-MTX治疗的ALL住院患儿275例;用化学发光微粒子免疫分析(CMIA)检测给药后45 h时的血药浓度。基于延伸连接的多重探针扩增(MELPA)技术通过核酸飞行质谱(MALDI-TOF MS)检测ABCB1 rs1045642位点、ABCC4 rs7317112位点、SLCO1B1 rs11045879和rs10841753位点的单核苷酸多态性(SNP)。同时,观察记录化疗后不良反应,包括肝功能损害、胃肠道反应、黏膜炎、骨髓抑制、心肌损伤等。分析这些基因SNP位点多态性与MTX血药浓度及AE的相关性。结果各基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。ABCC4 rs7317112位点和SLCO1B1 rs11045879位点多态性与HD-MTX化疗开始后45 h的血药浓度之间有相关性(P<0.05)。ABCC4 rs7317112的AA/AG型和SLCO1B1 rs11045879的TT/TC型易出现MTX排泄延迟(P<0.05)。结论ABCC4 rs7317112位点和SLCO1B1 rs11045879位点可以作为重要的基因标志物辅助儿童ALL患者HD-MTX个体化用药。

常用抗癫痫药物的药物基因组学研究进展

抗癫痫药物与多种基因多态性相关。本文针对临床上常用的抗癫痫药物，综述与药物作用靶点、药物代谢，药物转运以及药物不良反应相关的基因单核苷酸多态性的研究现状。每种抗癫痫药物的代谢和药物不良反应都与多种基因相关，这种药物基因组学相关性受人群基因背景、年龄等因素的影响。基因多态性一定程度上解释了个体间药物疗效差异和药物不良反应的差异性现象。了解患者的基因型将有助于临床医师选择合适的药物，决策药物剂量以及最大程度上减少药物不良反应的发生，为抗癫痫的个体化药物治疗提供有力的支持。

中性粒细胞/淋巴细胞比值对血流感染的诊断价值

目的探讨5项感染标志物对血流感染的诊断价值。方法随机选取望京医院血培养阳性的血流感染患者110例为研究组,血培养阴性的细菌感染患者30例为对照组。在血培养的同1天抽取静脉血,检测全血细胞计数和C反应蛋白(CRP)。比较两组白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLCR)和CRP的差异。结果血流感染组WBC、NEU、NLCR、CRP均显著高于对照组(P<0.05),而LYM显著低于对照组(P<0.05)。5项感染标志物中,NLCR和LYM诊断血流感染的受试者工作特征曲线下面积(ROC-AUC)分别为0.808和0.756。当NLCR取临界值为9.33时,敏感性为63.6%,特异性为93.3%;LYM小于等于0.97为临界值时,敏感性为58.2%,特异性为86.7%。进一步,在血培养阳性患者中,革兰氏阴性菌所致的血流感染组的NLCR高于革兰氏阳性菌血流感染组,NLCR在区分血流感染的类型中具有重要的临床意义。结论 NLCR优于其他常规感染指标,有助于血流感染的诊断。

无需逆转录的高通量多重呼吸道病毒RNA检测技术的建立

目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以Luminex微球为基础的多指标同步分析(xMAP)多重检测平台,对一个样品同时检测A和B型流感病毒、A和B型呼吸道合胞病毒、1、2和3型副流感病毒,及偏肺病毒等8种病毒的靶标RNA,可一次实验并行检测96个样品。对该高通量检测系统进行了特异性、灵敏度评价。结果该检测方法可以特异性区分8种病毒的RNA靶标分子,检测下限均低于或等于4695个RNA拷贝。结论初步建立了可靠、灵敏、操作简便、高通量的多种呼吸道病毒RNA并行检测方法,为进一步实现在临床呼吸道样品中高通量检测呼吸道病毒提供了技术基础。

儿童甲、乙型流感病毒感染外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值的临床意义

目的探讨外周血全血细胞分析中的四项指标在儿童甲、乙型流感病毒感染中的临床意义。方法回顾性分析2018年1月~2019年1月在北京儿童医院就诊的发热和/或急性呼吸道症状的门诊患儿468例。采用间接免疫荧光法检测血清甲、乙型流感病毒IgM抗体,采用流式细胞计数法进行外周血全血细胞分析。每组按年龄分为<4岁组和≥4岁组。研究组纳入甲型流感患儿138例,乙型流感患儿177例,对照组纳入有呼吸道感染症状但甲、乙型流感病毒阴性的患儿153例。分别比较三组白细胞(white blood cell,WBC)、中性粒细胞(neutrophil,NEU)、淋巴细胞(lymphocyte,LYM)和中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)的水平,并对结果进行统计学分析。结果在<4岁组和≥4岁组中,四项指标与对照组相比差异有统计学意义(<4岁组χ^2=48.721~159.45,≥4岁组χ^2=36.79~93.56,均P<0.001)。<4岁组,四项指标的受试者特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC)的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.765,0.904,0.742和0.924,当NLR取临界值1.12时,敏感度为87.8%,特异度为86.3%。≥4岁组,四项指标的ROC-AUC分别为0.823,0.937,0.799和0.977,当NLR取临界值1.65时,敏感度为94.1%,特异度为94.8%。进一步对甲、乙流感组进行比较,<4岁组中,两组之间WBC,NEU和NLR差异有统计学意义(P<0.001)。结论 NLR优于其他三项常规感染指标,有望作为诊断儿童甲、乙流感病毒感染的潜在指标。

2022—2023年北京市某儿童医院流感样疾病患儿呼吸道病原体流行病学特征分析

分析2022—2023年北京儿童医院流感样疾病(ILI)患儿呼吸道病原体感染情况及流行病学特征。于2022年1月至2023年3月,采用双扩增技术对就诊于北京儿童医院有流感样症状的门诊和住院患儿(0~18岁)进行甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)、肺炎支原体(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)和肺炎衣原体(CP)7种常见呼吸道病原体核酸检测。共检测患儿43663例,其中呼吸道病原体阳性27903例,总检出率为63.91%。Flu A检出率居首位为69.93%(27332/39084);其后是MP为13.22%(380/2875);RSV,PIV和ADV这3种病原体总检出率为7.69%(131/1704);Flu B为0.16%(64/39084);未检出CP。双重感染共检出7例,检出率为0.41%(7/1704)。采用χ^(2)检验对病原体在不同性别、年龄组和不同季节间检出率的差异进行分析显示,7种病原体中,仅Flu A在性别上差异有统计学意义(χ^(2)=16.712,P<0.001)。Flu A和MP病原体检出率呈现随年龄增长而增长的趋势(均P趋势<0.001),而RSV和PIV检出率呈现随年龄增长而降低的趋势(均P趋势<0.001)。Flu A在冬季和春季呈流行高峰,检出率分别为61.30%(3907/6374)和77.47%(23207/29958);MP和PIV在秋季检出率较高(分别为25.14%和7.64%);RSV在冬季出现流行高峰(检出率为8.69%);研究期间Flu B和ADV检出率较低(分别为0.16%和1.17%)。综上,2022—2023年流感样疾病患儿以单种呼吸道病原体感染为主,偶见双重病原体感染;其中Flu A检出率最高,仅Flu A的检出率有性别差异;随着患儿年龄的增长,Flu A、MP检出率呈增长趋势,而RSV和PIV呈现降低趋势。Flu A、Flu B、MP、PIV和RSV的流行有季节性。

尿液肾损伤标志物联合检测对儿童紫癜性肾炎的诊断价值

目的探讨检测儿童紫癜性肾炎(HSPN)患儿尿液和血清中肾损伤标志物的临床意义及其诊断价值。方法回顾性选取2018年1月至2019年12月期间来首都医科大学附属北京儿童医院就诊未治疗的HSPN患儿216例为研究对象,纳入同期健康体检儿童216例作为对照组。检测6项肾损伤标志物的水平,包括尿液中的转铁蛋白(TRF)、免疫球蛋白G(IgG)、微量白蛋白(mAlb)、α1微球蛋白(α1-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG),以及血清中的胱抑素C(CysC),对2组的各项指标进行比较分析,评价其诊断价值,并构建Logistics回归模型。另外,纳入2021年11月至2022年2月期间的HSPN患儿60例,以及同期健康体检儿童60例作为验证队列,对Logistics模型进行验证,用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对于诊断HSPN的价值。结果HSPN组的尿液TRF、IgG、mAlb、α1-MG和NAG以及血清CysC水平均高于健康对照组(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,尿液中TRF、IgG、mAlb、α1-MG和NAG及血清CysC对诊断HSPN的曲线下面积(AUC)分别为0.749、0.719、0.810、0.648、0.828及0.790,差异有统计学意义(P均<0.05)。Logistics回归分析显示,尿液中IgG、mAlb、TRF是诊断HSPN的影响因素(OR=1.083、1.105、1.704,P均<0.001);以此建立模型并以模型判断HSPN的预测值绘制ROC曲线,AUC为0.916,诊断敏感度为87.4%,特异度为96.2%。通过独立队列验证Logistics模型,AUC为0.973,模型拟合较好,敏感度为95.0%,特异度为98.3%。结论HSPN患儿尿液中TRF、IgG、mAlb、α1-MG、NAG及血清CysC水平升高。本研究建立的包括尿IgG、mAlb、TRF这3项标志物的Logistic回归模型对儿童HSPN有良好的临床诊断价值。

抑癌基因甲基化位点定量检测在宫颈癌早期诊断中的意义探讨

目的利用Sequenom定量检测宫颈癌抑癌基因(SOX-1、NKX6.1、PAX-1、LMX1A、ONECUT1、WT1)甲基化的程度和甲基化的位点。方法利用石蜡切片提取组织DNA,对提取的DNA进行甲基化位点的保护并设计针对抑癌基因转录起始点前的富含CPG岛区域的引物进行PCR扩增,将扩增出的DNA转录成RNA后使用Sequenom质谱分析仪进行基因甲基化程度的定量检测和甲基化位点的检测。结果正常对照组和宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ级组各个基因的甲基化程度较低(<20%),无统计学意义(P>0.05),CINⅢ级组各个基因的甲基化程度较高(>45%),与正常对照组相比有统计学差异(P<0.05)。结论通过定量研究宫颈癌抑癌基因甲基化的程度可以为宫颈癌的早期预防和治疗方式提供靶标和理论指导。

2020年北京地区儿童常见呼吸道病原体流行情况分析

目的探讨新型冠状病毒疫情常态化期间北京地区儿童常见呼吸道病原体的流行特征改变。方法收集2020年1—12月因急性呼吸道感染就诊于首都医科大学附属北京儿童医院的9728例患儿血清标本,采用间接免疫荧光法对8种常见呼吸道病原体的IgM抗体进行检测,并对数据进行统计学分析。8种常见呼吸道病原体包括甲型流感病毒(influenza virus A,FluA)、乙型流感病毒(influenza virus B,FluB)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、腺病毒(adenovirus,ADV)、副流感病毒(parainfluenza virus,PIV)、肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)、肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cp)、嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,Lp)。结果9728例患儿呼吸道病原体检出率为41.71%(4058/9728),呼吸道病毒(FluA、FluB、RSV、ADV、PIV)占检出病原体的46.18%(2343/5074)。3种常见病原体(Mp、FluB、FluA)占检出病原体的84.73%(4299/5074),其检出率分别为24.27%(2361/9728)、11.49%(1118/9728)、8.43%(820/9728)。其中846例检出双重病原体,最常见的组合是Mp+FluB。男女患儿检出率分别为37.56%(2089/5562)、47.26%(1969/4166),不同性别间总病原体检出率、PIV检出率及Mp检出率差异有统计学意义(P<0.05)。学龄期患儿(6~12岁)检出率最高,为52.26%(1535/2937)。不同月份呼吸道病原体的检出率在30.12%(203/674)~49.81%(268/538)之间,秋冬季节检出率较高[42.45%(1304/3072)、43.29%(1618/3738)]。FluA、FluB分别在夏季[11.46%(195/1701)]、冬季[14.63%(547/3738)]检出率较高,RSV在夏季检出率较高[1.35%(23/1701)],Mp检出率全年均较高,尤其冬春季节[27.21%(1017/3738)、25.64%(312/1217)]。门诊组呼吸道病原体的检出率高于住院组[46.48%(1583/3406),39.15%(2475/6322)],重症组检出率为26.10%(71/272)。总病原体、FluB及Mp的检出门诊患儿高于住院患儿,差异有统计学意义(P<0.05);FluA、PIV及ADV的检出住院患儿高于门诊患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。总病原体、FluB及Mp的检出轻症患儿明显高于重症患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。RSV的检出重症患儿明显高于轻症患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。结论COVID-19疫情常态化期间采取的防护措施,可以有效预防呼吸道病毒的传播,对呼吸道病原体高发人群及典型季节性分布有一定的影响,但对于Mp的防控作用影响较小,尚且需要研究新的预防措施,应对儿童高发季节的Mp感染。