浅谈秸秆饲料化的推广应用

2023年中央一号文件明确提出,要“大力发展青贮饲料,加快推进秸秆养畜”,这对秸秆饲料化推广利用是重大利好。经过多年来的推广探索和积累沉淀,现在农作物秸秆饲料化推广工作面临新的发展机遇。为更好地推广这项技术,笔者结合多年的基层工作经验,就农作物秸秆饲料化推广的意义、处理方法、存在问题及对策建议进行了整理,供各位同仁参考。

多克隆抗体兔免疫血清取血新方法

兔耳动脉采血获得多克隆抗体免疫血清是一种较实用的方法。利用这种改进的取血方法,在25℃左右,可从免疫后的兔一次性采得100ml左右的血量。该法对动物损伤小,操作简便,可在短期内连续采到较大量的高质量兔血,且血清质量较好,采血后兔仍正常存活。因而非常适合于免疫血清取血,也可用于其它的兔采血实验。

抗人Elp3的N末端抗体制备及在染色质免疫沉淀中的应用

人Elp3(human elongator protein 3,hElp3)具有组蛋白乙酰转移酶活性,是与延伸中的RNA聚合酶Ⅱ结合的elongator复合物的催化亚基,可参与组蛋白的乙酰化修饰与基因的转录延伸.Elp3及其复合物功能异常与人类多种疾病相关.为运用染色质免疫沉淀等手段深入研究Elp3功能,PCR法克隆pYES2-hElp3质粒中编码hElp3的N端亲水区段(1～69氨基酸残基),构建原核表达载体pMXB10-hElp3-210,经IPTG诱导和几丁质柱纯化后,免疫兔制备多克隆抗体.ELISA检测显示,该抗体有较高的效价(不低于1∶2 500).免疫印迹实验结果表明,该抗体可与纯化的及HeLa细胞中的hElp3蛋白特异性结合.运用该抗体对转入elp3Δ菌株的人Elp3的染色质免疫沉淀实验结果表明,人Elp3可参与酵母SSA3基因的转录调控,这可能是人Elp3能够部分补偿酵母SSA3基因延迟表达缺陷的原因.

烟草新驱动蛋白NtTKR过表达对酵母生长的影响

为了解烟草新驱动蛋白NtTKR功能信息,构建了EGFP融合的NtTKR基因酵母表达载体并转入酿酒酵母W303诱导表达,荧光显微镜观察结果表明,诱导条件下的转化细胞发出明亮的绿色荧光,表明转入的NtTKR得到了高效表达.转化株在诱导和非诱导条件下培养3d,可见NtTKR过表达菌落比对照小的多;但通过绘制8h内生长曲线发现二者细胞数目无显著差别;表明NtTKR过表达对酵母细胞生长的抑制可能更多的是因为抑制其体积增大,而非分裂速度减慢引起的细胞数目降低.已知NtTKR在烟草受精卵、发育各个时期的胚、幼叶、根尖及茎尖等细胞分裂旺盛部位均优势表达,推测该基因在烟草中可能与上述各部位新生细胞的体积增大相关.

双元载体提供组蛋白H3/H4拷贝1的elp3Δ菌株的构建

人Elongator是在转录中有功能的组蛋白乙酰转移酶(HAT)复合物,为研究其催化亚基Elp3功能,构建了酵母组蛋白H3/H4拷贝1的双元表达载体pRS316CFT,通过PCR介导的基因敲除,获酵母基因组H3/H4缺失由双元载体提供单拷贝H3/H4的elp3Δ菌株.敏感性实验表明该载体提供H3/H4可维持酵母正常生长.本工作为构建H3/H4乙酰化位点突变菌株,用功能互补在体内研究人Elp3 HAT活性功能奠定了基础.

犊牛消化不良的预防和治疗

犊牛消化不良症是消化机能障碍的总称，是哺乳期犊牛常见又多发的一种胃肠道疾病。其特点为不同程度的腹泻。该病对犊牛的生长发育危害极大，必须及时诊断治疗。（一）发病原因 1．妊娠母畜的不全价营养。蛋白质、维生素、矿物质缺乏致使母畜的营养代谢紊乱，影响正常发育，犊牛消化不良、体质衰弱、抵抗力下降。

一例鸭疫里默氏杆菌的感染诊断与防控策略分析

鸭疫里默氏杆菌病具有发病率高、死亡率高的特点,会给养鸭业带来严重的经济损失。其主要侵害雏鸭。由于其高发病率和高死亡率,本病是当前国内外造成养鸭业经济损失最主要的疫病之一。本文主要就结合山东枣庄某养殖场发生的一起鸭疫里默氏杆菌感染病例进行研究,对其发病情况、临床症状、剖检变化、实验室诊断及防控策略进行分析,旨在对鸭疫里默氏杆菌病的综合防治提供参考。

獭兔春季管理要点

我国南北方地区气候差异较大,特别是春季。南方地区春季多阴雨,湿度大,病原微生物、寄生虫开始孳生繁殖,野草开始萌发;而北方地区多风沙,昼夜温差大,气候乍暖还寒,常有倒春寒。而经过了一个漫长的冬季,獭兔体质比较虚弱,又处在换毛期,并开始进入配种繁殖高峰期。因此,春季养獭兔,既要确保獭兔身体健康少得病,还要保证饲料营养多产仔。

利用西瓜愈伤组织快速检测CRISPR/Cas9基因编辑效率

西瓜作为重要的园艺经济作物,其CRISPR/Cas9基因编辑效率的快速检测方法仍十分匮乏。以愈伤组织再生能力强的野生西瓜种质ZTC为试验材料,针对西瓜ClPDS基因构建CRISPR/Cas9双靶点敲除载体,利用农杆菌侵染西瓜幼嫩子叶,在含1.0 mg·L^(-1)2,4-二氯苯氧乙酸生长素的MS培养基中诱导愈伤组织形成,通过绿色荧光蛋白标记筛选阳性愈伤组织,检测其编辑效率。结果表明,2个靶点均发生基因编辑,靶点1处的编辑效率为42.95%,靶点2处的编辑效率为29.92%。在愈伤组织中建立了西瓜生长发育早期有效基因编辑效率检测体系,为后续编辑株系的确定节约了大量时间,为基因编辑技术应用于西瓜重要农艺性状改良及优异种质创制提供了技术支撑。

奶牛常见疾病的预防与治疗

一、乳房炎1．接种乳房炎疫苗。乳房炎疫苗是一种预防乳房炎的特效疫苗，许多奶牛场已计划将其纳入乳房炎控制规程。它能有效地预防乳房炎，特别是隐性乳房炎的发生。具体使用方法为：肩部皮下注射3次，每次5毫升，第一次在牛干奶时，30天后注射第2针，产后72小时注射第3针。

羊快疫病的防治技巧

羊快疫是由腐败梭菌引起的一种急性传染病，以突然发病死亡或胃出血和坏死为特征。流行特点本病一般经消化道感染，以2岁以内的羊发病较多；一般呈地方流行，多发于秋、冬气候骤变，阴雨连绵季节；于低洼地、潮湿地、沼泽地放牧的羊易患本病。

羊快疫病的防治

羊快疫是由腐败梭菌引起的一种急性传染病，以突然发病死亡或胃出血和坏死为特征。（一）流行特点本病一般经消化道感染，以2岁以内的羊发病较多。一般呈地方流行，多发于秋、冬气候骤变，阴雨连绵季节；于低洼地、潮湿地、沼泽地放牧的羊易患本病。

雏鸡的管理要点

雏鸡的饲养管理不仅直接影响其生长发育，还关系到将来的生产性能，所以育雏期是蛋鸡生产的关键时期。

秋季山羊管理重点

秋天百草成熟，天气凉爽，正是山羊育肥和母羊配种的大好季节。因此，不失时机地抓好秋季山羊饲养管理，是保障山羊多生、快长、早出栏、提高养殖效益的关键。要突出抓好以下六个方面的管理。

妇产科急腹症超声临床诊断及鉴别价值

目的对妇产科急腹症患者应用超声检查,观察并分析此检查方法的诊断效果和鉴别价值。方法150例妇产科急腹症患者,均进行超声诊断及鉴别。重点观察并详细记录病变处包块的位置、大小、形态、边界回声以及血流状况等,观察包块内是否存在孕囊,孕囊内有无胎芽、胎心,盆腔内是否存在积液,积液的量有多少。结果在150例妇产科急腹症患者中,术前超声检查准确诊断143例,诊断符合率为95.33%。其中异位妊娠诊断符合率为95.00%、卵巢囊肿蒂扭转诊断符合率为97.30%、前置胎盘诊断符合率为95.24%、卵巢囊肿破裂诊断符合率为95.83%、盆腔炎症诊断符合率为85.71%。结论对妇产科急腹症患者应用超声检查具有较高的确诊率,可快速、简便的进行诊断与鉴别,且鉴别价值亦高。

经阴道联合经腹超声检查对妇产科疾病的诊断价值探讨

目的探讨妇产科疾病患者采用经阴道联合经腹超声检查的应用价值。方法180例妇产科疾病患者作为研究对象,按照入院时间顺序分为对照组和观察组,每组90例。对照组患者采用经腹超声检查,观察组患者在对照组基础上联合经阴道超声检查。观察两组患者病理检查结果和诊断结果,比较两组患者疾病检出率和诊断满意度。结果观察组患者病理检查结果为异位妊娠45例、黄体破裂16例、盆腔炎14例、子宫肌瘤9例、卵巢囊肿蒂扭转6例;对照组患者病理检查结果为异位妊娠41例、黄体破裂19例、盆腔炎12例、子宫肌瘤10例、卵巢囊肿蒂扭转8例。观察组患者疾病检出率为97.78%,明显高于对照组的87.78%,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者诊断满意度评分为(18.05±0.62)分,高于对照组的(16.94±0.51)分,差异具有统计学意义(t=13.117,P=0.000<0.05)。结论对于妇产科疾病患者采用经腹超声检查具有一定的诊断效果,但误诊率较高,容易影响患者的临床治疗效果。采用阴道联合经腹超声检查能够有效减少误诊情况,便于临床及时给予有效治疗方案,改善患者预后质量,值得临床推广应用。

32例胎儿先天性膈膨升的产前超声及MRI诊断结果分析

目的分析产前超声(US)、磁共振成像(MRI)对胎儿先天性膈膨升(EOD)的诊断结果并探讨诊断价值。方法选取2016年4月至2019年4月我院产前检查疑似孕有EOD胎儿的52例孕妇的临床资料进行回顾性分析,均有完整的产前US及MRI影像资料及胎儿随访结果(产后胸片、手术或尸检病理结果)。以随访结果为"金标准",使用Kappa一致性检验评价产前US和MRI在EOD胎儿产前诊断中的应用价值。结果52例疑似EOD胎儿,经随访结果证实EOD 32例,疝囊型膈疝13例,胸骨后疝7例。产前US诊断EOD阳性46例,误诊16例,产前US诊断EOD与随访结果一致性差(Kappa=0.252),US诊断EOD的灵敏度、特异度和准确度分别为96.88%、25.00%和69.23%;产前MRI诊断EOD阳性34例,误诊2例,MRI诊断EOD与随访结果一致性较好(Kappa=0.917),MRI诊断EOD的灵敏度、特异度和准确度分别为100.00%、90.00%和96.15%。22例单纯性EOD和EOD合并患侧肺不张胎儿出生后经保守治疗或手术治疗后预后良好。结论产前US诊断EOD灵敏度高,可作为筛查的首选,但US特异度较低,易造成误诊,对于US发现的异常情形,结合MRI检查评估膨出物范围及膈肌连续性有助于提高EOD产前诊断的准确性。

染色体微阵列分析技术联合超声STIC技术筛查胎儿先天性心脏病及心外畸形效果

目的:探究染色体微阵列分析技术(CMA)联合四维超声时空关联成像(STIC)技术筛查胎儿先天性心脏病(CHD)及心外畸形临床效果。方法:选取2020年1月-2021年1月在本院行胎儿心脏检查的高危妊娠孕妇380例,通过二维超声检查与超声STIC技术筛查产前胎儿CHD发生情况,并与解剖病理与产后随访结果对比,分析诊断准确性。对比CAM检测、超声STIC技术筛查胎儿CHD及心外畸形致病性染色体拷贝数变异(CNV)检出情况,分析其临床价值。结果:380例高危妊娠孕妇中,检测CHD胎儿104例,共计301处心脏结构异常。以解剖病理与产后随访结果作为金标准,二维超声诊断CHD的敏感度为91.4%,特异度为98.9%;超声STIC技术诊断CHD的敏感度为96.2%,特异度为99.3%,两种超声诊断CHD有较好一致性(Kappa=0.919、0.960)。两种检查方式检测CHB的符合率、漏检率、误诊率无差异(P>0.05),检出心脏结构异常细节符合率对比有差异(χ^(2)=61.499,P<0.05)。染色体核型分析异常的100例超声STIC技术诊断CHD患者中,单一类型CHD患者66例(66.0%)、复合类型CHD患者34例(34.0%)。其中合并心外畸形CHD患者23例(23.0%),单一类型CHD合并心外畸形15例(15.0%),检出致病性CNV 6例;复合类型CHD合并心外畸形8例(8.0%),未检出致病性CNV。未合并心外畸形CHD患者77例(77.0%),单一类型CHD未合并心外畸形51例(51.0%),检出致病性CNV 6例;复合类型CHD未合并心外畸形26例(26.0%),检出致病性CNV 5例。结论:超声STIC技术在胎儿CHD及心外畸形产前诊断中具有良好价值,CMA应对染色体微重复与微缺失具有良好检出率。

利用发根农杆菌体系检测西瓜CRISPR/Cas9系统的靶位点

西瓜遗传转化技术周期长,过程复杂,CRISPR/Cas9基因编辑系统又存在着一定的脱靶效应,为了保障所选择的靶位点的可行性,本研究选择西瓜ClSPO11-1基因(ID:Cla003301)为靶标,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建双靶点的基因敲除载体,利用发根农杆菌Ar. Qual菌株侵染西瓜子叶外植体,通过简单的组培过程,使西瓜外植体长出不定根,在不定根中检测到了在靶位点1处发生了不同程度的碱基缺失,经过与野生型氨基酸序列比对分析后发现均造成了翻译提前终止和氨基酸的突变,成功实现了对西瓜不定根的基因编辑,该方法周期短,操作简便,实现了快速鉴定在西瓜中选择的靶位点的靶向效率,为研究西瓜基因功能和遗传改良提供了保障。

MRI对膝关节韧带损伤的诊断价值分析

目的探讨磁共振成像(MRI)对膝关节韧带损伤的诊断价值。方法选取120例疑似膝关节韧带损伤患者,分别采用CT、MRI以及关节镜诊断,以关节镜诊断结果为金标准,对比不同诊断方式韧带撕裂诊断符合情况及敏感度和特异度。结果关节镜诊断结果显示:韧带正常患者31例,韧带部分撕裂患者40例,韧带完全撕裂患者49例。CT诊断韧带正常符合率、韧带部分撕裂符合率和韧带完全撕裂符合率分别为74.19%(23/31)、82.50%(33/40)、77.55%(38/49),MRI诊断韧带正常符合率、韧带部分撕裂符合率和韧带完全撕裂符合率分别为93.55%(29/31)、97.50%(39/40)、97.96%(48/49),MRI诊断韧带正常符合率、韧带部分撕裂符合率和韧带完全撕裂符合率均高于CT诊断,差异具有统计学意义(P<0.05)。MRI诊断韧带撕裂的敏感度和特异度分别为97.75%(87/89)和93.55%(29/31);CT诊断韧带撕裂的敏感度和特异度分别为79.78%(71/89)和74.19%(23/31),MRI诊断韧带撕裂的敏感度和特异度均显著高于CT诊断,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论MRI和CT均能有效诊断出患者韧带损伤后伴随撕裂程度,而MRI在诊断时还能表现出更高的敏感度和特异度,较CT诊断结果更精准,临床应用价值更高。