石花菜醇提物成分分析

目的:研究石花菜的成分,为其功能食品的研发提供基础数据。方法:采用薄层色谱、液-质谱联用方法分析石花菜醇提物的化学成分的丰富度。通过硅胶柱、高效液相等色谱方法对其进行分离纯化,并用气-质谱联用、核磁结合文献确证化合物结构;并对部分化合物抗氧化活性进行测定。结果:薄层色谱、液-质谱联用分析表明石花菜醇提物中含有丰富的次级代谢产物,且很可能是甾醇类成分。采用气-质谱联用方法从中鉴定到29个化合物(5个为甾醇类化合物),其中棕榈酸(46.76%)、棕榈酸乙酯(13.82%)、胆甾醇(7.20%)、胆甾-4,6-二烯(4.99%)为含量最高的4个化合物。经色谱分离、核磁鉴定出9个单体化合物,分别为胆甾醇(1)、1,2-二醇植烯(2)、帕格甾醇C(3)、6-羟基-胆甾-4-烯-3-酮(4)、胆甾-5-烯-7-酮(5)、胆甾-5-烯-3β,7α二醇(6)、胆甾-5-烯-3β,7β二醇(7)、胆甾-4-烯-6-酮(8)、3-羟乙基-2-甲基-马来酰亚胺(9)。其中,化合物7清除DPPH自由基和ABTS自由基能力最好,其IC_(50)值分别为180μg/mL和12.2μg/mL。结论:首次系统研究了石花菜醇提物的成分,化合物3、8、9为新天然产物。部分甾醇类化合物具有较好的抗氧化活性。

石花菜醇提物提取工艺及抗氧化、抗菌活性研究

在单因素实验基础上,通过响应面法优化石花菜醇提物的提取工艺。将石花菜醇提物经石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,研究不同萃取相的抗氧化和抑菌活性。结果表明,石花菜醇提物的最佳提取工艺为:60%乙醇溶液、料液比1∶35、提取时间64 min、超声功率350 W、提取温度55℃。在此条件下,石花菜醇提物得率为0.0165 g/g,DPPH自由基清除率为58.29%(质量浓度2 mg/mL)。不同萃取相抗氧化和抗菌活性均具有浓度依赖性,其中乙酸乙酯相活性最强,清除DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基的IC50值分别为672.4,14.1,599.7μg/mL。对金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为156.3,156.3μg/mL,最小杀菌浓度(MBC)分别为625,312.5μg/mL。

深海来源真菌Penicillium sp. F00120代谢产物的研究

利用硅胶柱色谱、凝胶柱、反向柱色谱和高效液相色谱等手段对深海来源的真菌Penicillium sp.F00120在高盐培养基中的代谢产物进行分离纯化,从中分离得到了9个化合物。通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照,鉴定了化合物的结构分别为：麦角甾醇（1）、4-methyl-5,6-dihydro-2-pyranone（2）、citreohybridonol（3）、1-linoleoylglycerol（4）、5α,6α-Epoxy-（22E,24R）-ergosta-8（14）,22-diene-3β,7β-diol（5）、macrophorin（6）、purpurogemutantin（7）、3-（2S,4S-dihydroxypentyl）-6,8-dihydroxyisocoumarin（8）、5-hydroxy-7-（2＇-hydroxypropyl）-2-methylchromone（9）。化合物2~4、6~9均为首次从深海沉积物真菌中分离得到。

深海来源真菌Aspergillus sp.SCSIO Ind09F01代谢产物的研究

利用硅胶柱色谱、凝胶柱、反向柱色谱和高效液相等手段对深海来源的真菌Aspergillus sp.SCSIO Ind09 F01的代谢产物进行分离纯化,从中分离得到了13个化合物。通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照,鉴定了化合物的结构分别为:sydowinin B(1)、pinselin(2)、1,6-dihydroxy-3-methyl-8-carbom ethoxyxanthone(3)、MT-1(4)、1-hydroxy-6,8-dimethoxy-3-methyl-9,10-anthraquin one(5)、methyl orsellinate(6)、orcinol(7)、mrlactone1(8)、Janthinone(9)、cyclo-(L-trptophyl-L-phenylalanyl)(10)、13-O-acetylsydowinin B(11)、7-Hydroxy-2,5-dimethylchromone(12)、Acremolin(13)。

南海软海绵Halichondria sp.化学成分研究

利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、ODS柱色谱和HPLC等手段对南海软海绵Halichondria sp.化学成分进行分离纯化,从中分离得到了7个化合物。通过通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照,鉴定了化合物的结构分别为:4α-Isocyanogorgon-11-Ene(1),homoverrucosanol(2),neoverrucosanol(3),5α,6α-环氧-(22E)-麦角甾-8,14,22-三烯-3β,7α-二醇(4),5α,8α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(5),(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6α,9α-四醇(6),3β,5α,9α,14β-四羟基-(22E)-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(7)。以上7个化合物都是首次从该属海绵中分离得到。对7个化合物进行了体外毒性实验,化合物1和3对HeLa肿瘤细胞株显示较弱的细胞毒性,其IC50值为33.7μM和43.8μM.

一种新型抗氧化五肽的纯化、鉴定与表征

以黑鲨鱼皮为原料,利用蛋白酶酶解制备和分离纯化抗氧化多肽,并探究其抗氧化机理。以1,1-二苯基-2-苦肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为主要指标,以水解度为辅助指标,优化酶解工艺条件。通过反相高效液相色谱和电喷雾四极杆飞行时间质谱分离纯化和鉴定氨基酸序列并探究其体外抗氧化活性。结果显示,最佳水解蛋白酶为碱性蛋白酶,最优酶解工艺为pH 8.0、酶添加量311 U/mL、底物质量分数3%、酶解温度45℃、酶解时间4.9 h,所得的酶解液DPPH自由基清除率为77.61%,水解度为14.21%。经反相高效液相色谱分离,得到组分F19的DPPH自由基清除能力最强。经鉴定,选择抗氧化活性高的总离子流色谱峰(保留时间为10.02 min左右)进行一级质谱和二级质谱分析,获得纯化的新型抗氧化五肽,其分子质量为461 Da,氨基酸序列结构为Pro-Gly-Gly-Thr-Met,其DPPH自由基清除率为75.01%(1.0 mg/mL),氧自由基吸收能力(以Trolox当量计)为2 490.01μmol/g。新型五肽的Pro和Met在抗氧化中起到关键性作用。本研究为黑鲨鱼皮抗氧化五肽的抗氧化机理及其构效关系提供了一定理论依据。

低场核磁共振技术测定石花菜对酸奶水分迁移及超微结构的影响

利用低场核磁共振及其成像技术对比了石花菜酸奶和酸奶水分迁移特性;并采用环境扫描电镜对石花菜酸奶超微形貌特征进行观察分析。结果表明,石花菜酸奶在发酵及储藏过程中的水分含量变化幅度小于不添加石花菜的酸奶,持水性增强;确定了前期发酵最优时间为6 h,冷藏后熟最优时间为24 h;通过环境扫描电镜观察发现石花菜酸奶中酪蛋白胶束与石花菜琼胶分子间相互缠结,蛋白链球颗粒粘结在致密的琼胶网络结构之中。

红树植物桐花树内生真菌NAcFL10次生代谢产物的研究

对一株红树植物桐花树内生真菌NAcFL10的次生代谢产物进行研究，采用硅胶MPLC、SephadexLH-20凝胶柱色谱、常压硅胶柱色谱以及半制备高效液相色谱仪等手段从红树植物桐花树内生真菌NAcFL10的大米发酵物进行分离纯化得到7个化合物，并通过各种波谱数据、文献对照分别鉴定为：leptosphaerin（1），二氢-4-羟基-5．羟甲基-2-呋喃酮（2），5-羟甲基糠醛（3），3，5，6-三甲基-2，4-二羟基-苯甲酸乙酯（4），胸苷（5），对羟基苯乙醇（6），麦角甾醇（7）。

海绵真菌中一个新的聚酮类化合物

利用硅胶柱色谱、凝胶柱、反向柱色谱和高效液相等手段对海绵来源的真菌Alternaria sp.F49在大米培养基中的代谢产物进行分离纯化,从中分离得到一个新的聚酮类化合物:3R,5R-(-)-talaroflavone(2)和15个已知化合物。Ⅰ及Ⅱ是两个消旋体,通过手性柱分别将它们进行拆分得到1和2、3和4两对对应异构体;通过核磁、质谱和文献比对确定了这些化合物的结构,运用X-单晶衍射及圆二色谱等手段确定了化合物1、2的绝对构型;化合物6、8～10首次从该属真菌(Alternaria)中分离出来;化合物16展示出中等的COX-2酶抑制活性,其IC_(50)为7.3μmol·L^(-1)。

配体垂钓:一种从生物提取物中快速筛选活性化合物的方法

天然产物是新药发现的宝贵资源。迄今为止,从生物提取物中快速筛选活性化合物仍是一项重要而富有挑战性的任务。传统的活性追踪法涉及重复的分离和活性测试步骤,耗时耗力且低效。配体垂钓是一种基于分子间的亲和作用,从复杂的生物样品中亲和选择配体的生物分析方法,具有特异性强、效率高、对样品预处理要求少等特点。本综述总结了配体垂钓的分类以及在酶抑制剂筛选中的应用,并对该技术的发展前景进行了展望。

一株深海热液口嗜热芽孢杆菌SY27F代谢产物活性的研究

【目的】对一株来源于深海热液口嗜热芽孢杆菌的次生代谢产物进行抑菌活性和抗肿瘤活性的初步研究。【方法】采用纸片法和微量肉汤稀释法检测嗜热芽孢杆菌SY27F次生代谢产物的抑菌活性,采用CCK-8法测定其次生代谢产物的抗肿瘤活性。【结果】抑菌实验表明,嗜热芽孢杆菌代谢产物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,其最低抑菌浓度分别为1.56 mg/mL和3.13 mg/mL;细胞实验表明,其代谢产物对肿瘤细胞A549、HepG2、HeLa、MCF-7均有一定的抑制作用,其半致死浓度分别为0.390、0.451、0.704、1.105 mg/mL;与人肝肿瘤细胞(HepG2)相比,其对人正常肝细胞(L02)表现出良好的生物相容性。【结论】嗜热芽孢杆菌SY27F次生代谢产物具有一定的抑菌和抗肿瘤活性,可为寻找新型抑菌抗肿瘤活性物质提供优质资源。

海绵共附生真菌Alternaria sp.F49抗氧化次级代谢产物研究

利用硅胶柱色谱、凝胶柱、反向柱色谱和高效液相等手段对海绵共附生真菌Alternaria sp.F49在PDB培养基中的代谢产物进行分离纯化,从中分离得到了7个化合物。通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照,鉴定了化合物的结构分别为:(8R)-5-O-methyl-orcinotriol(1)、orcinotriol(2)、α-acetylorcinol(3)、3’-hydroxyalternariol 5-O-methyl ether(4)、altenusiol(5)、altenusin(6)和5’-methoxy-6-methyl-biphenyl-3,4,3’-triol(7),其中(8R)-5-O-methyl-orcinotriol(1)是一个未见报道的新苯酚类化合物。体外抗氧化活性测定结果表明,化合物4~7具有强的DPPH自由基清除活性;化合物1~7具有强的ABTS自由基清除活性。