miR-214-3p通过靶向MFN2诱导胃癌细胞线粒体分裂及凋亡的机制

目的探讨miR-214-3p靶向MFN2诱导胃癌细胞及线粒体分裂凋亡的作用及机制。方法收集43对胃癌组织及癌旁正常组织,采用基因芯片筛选胃癌组织及癌旁正常组织中差异表达的miRNAs并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测差异表miRNAs表达水平;此外,使用SGC7901细胞进行功能验证及机制研究,分为阴性对照(NC mimic)组,过表达miR-214-3p(miR-214-3p mimic)组,过表达miR-214-3p和线粒体融合蛋白(MFN)2(miR-214-3p mimic+MFN2)组,过表达miR-214-3p和线粒体抑制剂处理(miR-214-3p mimic+Mdivil)组;RT-qPCR检测miRNAs及MFN2表达;CCK-8实验检测细胞活力;TUNEL实验检测细胞凋亡;活性氧(ROS)、线粒体膜电位、三磷酸腺苷(ATP)及线粒体通透性转换孔检测线粒体功能;Western印迹检测细胞色素C、促凋亡蛋白[半胱氨酸蛋白酶(caspase)3,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)]和抗凋亡蛋白Bcl-2,MFN2蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因检测miR-214-3p与MFN2的靶向调控关系。结果与癌旁组织相比,芯片结果显示胃癌组织中差异倍数>2的10个miRNAs,其中胃癌组织中miR-214-3p表达明显降低;此外,与NC mimic组相比,miR-214-3p mimic组明显抑制细胞增殖,促进了细胞线粒体分裂及细胞凋亡,并抑制了MFN2的mRNA和蛋白的表达;双荧光素酶报告基因结果证明了miR-214-3p与MFN2靶向结合抑制荧光素酶活性;与miR-214-3p mimic组相比,同时过表达MFN2或使用Mdivil明显促进了细胞增殖,抑制了线粒体分裂及细胞凋亡,促进了MFN2的mRNA和蛋白的表达。结论miR-214-3p通过靶向并抑制MFN2表达,从而促进线粒体分裂并诱导胃癌细胞凋亡。

无机纳米填料对植入硅橡胶生物相容性的影响

背景:硅橡胶是人体组织、器官外科修复重建的常用生物材料,但其自身存在生物相容性缺陷,无机纳米填料为植入硅橡胶的生物相容性改良和构建具有特定功能的复合材料提供了新契机。目的:综述植入硅橡胶添加无机纳米填料改性在生物相容改良研究方面已取得的成果及不足。方法:在PubMed、Web of Science和Medline等英文生物医学数据库,输入“siloxane,silicone rubber,inorganic nano-filler,metal nano-filler,metal oxide nano-filler,carbon nanoparticles”关键词,在万方、CNKI和维普等中文数据库输入“硅橡胶、无机纳米填料、纳米金属、纳米金属氧化物、纳米碳”关键词,分别检索出与无机纳米填料改性硅橡胶的相关文献,时间跨度从2014年1月至2020年10月。结果与结论:利用纳米金属及其氧化物和纳米新碳填料对植入硅橡胶本体或表面进行改性,增进了硅橡胶的生物相容性,可在细胞生长、抗凝血、表面特性、力学性能、耐久性、抗感染功能化等方面产生积极影响。未来需研究不同纳米填料对硅橡胶表面性质(如拓扑结构、电荷、湿润性)造成的细胞增殖移行机制、纳米金属杀菌剂在硅橡胶表面控释阳离子的细菌-纳米粒子相互作用调节策略,以及植入后潜在的纳米毒性。

自制大黄苏打片药包外敷辅助治疗阑尾周围脓肿的疗效观察

目的观察自制大黄苏打片药包外敷辅助治疗阑尾周围脓肿的临床疗效。方法纳入2016年1月—2017年6月内江市第一人民医院普外科收治的阑尾周围脓肿患者43例,按随机数字表法将这些病例进行随机分配,其中21例患者在常规的治疗护理中外加自制大黄苏打片药包外敷辅助治疗(观察组),22例行常规治疗(对照组),比较两组临床疗效相关指标。结果两组均无死亡病例,观察组在住院时间[[(10.6±3.1)d vs.(14.5±4.2)d]、腹痛消退时间[(3.7±1.4)d vs.(5.8±1.7)d]、白细胞数恢复正常时间[(7.4±2.1)d vs.(9.3±2.8)d]、恢复进食时间[(3.3±1.1)d vs.(5.1±1.6)d]、抗生素使用时间[(9.5±2.4)d vs.(11.2±2.7)d]、住院费用[(0.54±0.12)万元vs.(0.72±0.21)万元]方面均小于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。而两组在治疗有效率(85.7%vs.77.3%)、中转手术发生率(14.3%vs.22.7%)、复发率(9.5%vs.13.6%)方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论在常规治疗阑尾周围脓肿过程中,应用自制大黄苏打片药包外敷辅助治疗阑尾周围脓肿显示出良好的疗效,在临床工作中值得推广应用。

miR-195-5p靶向HMBOX1调控胃癌细胞增殖迁移侵袭及凋亡的机制

目的探讨miR-195-5p在胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡中的作用与机制。方法运用qRT-PCR法检测正常胃上皮细胞(GES)-1、胃癌细胞N87、SGC-7901、HGC-27中miR-195-5p、含有1的同源框(HMBOX1)的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-195-5p组(转染miR-195-5p mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-HMBOX1组(转染si-HMBOX1)、miR-195-5p+pcDNA组(共转染miR-195-5p mimics和pcDNA)、miR-195-5p+pcDNA-HMBOX1组(共转染miR-195-5p mimics和pcDNA-HMBOX1)转染至HGC-27;Western印迹检测细胞中HMBOX1、survivin、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2的蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞荧光活性。结果相比于正常胃上皮GES-1细胞,胃癌细胞N87、SGC-7901、HGC-27中miR-195-5p表达显著降低,HMBOX1表达显著升高;过表达miR-195-5p或敲减HMBOX1均可抑制HGC-27细胞增殖、迁移侵袭及促凋亡,下调survivin、MMP2、MMP9、Bcl-2,上调P21、Bcl-2相关X蛋白(Bax);miR-195-5p可靶向HMBOX1;过表达HMBOX1可恢复miR-195-5p对胃癌细胞的作用。结论miR-195-5p能抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡,机制与靶向HMBOX1相关,将可为胃癌的诊断及治疗提供依据。

microRNA-34a增加奥沙利铂对结肠癌细胞敏感性的实验研究

目的:构建奥沙利铂耐药结肠癌细胞株(SW480/ADR),观察miRNA-34a对SW480/ADR细胞奥沙利铂敏感性的影响。方法:使用浓度梯度法构建奥沙利铂耐药细胞株(SW480/ADR)。miR-34a慢病毒转染SW480/ADR细胞,MTT法检测细胞增殖,Real-time PCR定量检测miR-34a表达,Western blot检测蛋白表达。结果:SW480、SW480/ADR和过表达miR-34a-SW480/ADR细胞miR-34a的2-△△Ct值为0.15±0.03、0.12±0.02和0.74±0.13,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。奥沙利铂对SW480、SW480/ADR和过表达miR-34a-SW480/ADR细胞的IC50值分别为8.64±1.54、24.16±3.72和11.52±1.22μmol/L,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。SW480、SW480/ADR和过表达miR-34a-SW480/ADR细胞OCT-4蛋白的相对灰度值为0.096±0.014、0.352±0.053和0.136±0.017,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-34a可以显著降低结肠癌奥沙利铂耐药细胞OCT-4蛋白表达,逆转结肠癌细胞对奥沙利铂的耐药。

LncRNA PCAT1对结直肠癌Colo320细胞的影响及作用机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)前列腺癌相关转录本1(PCAT1)对Colo320细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的影响及其作用机制。方法:实时荧光定量PCR检测LncRNA PCAT1、miR-145-5p和肌动蛋白结合蛋白1(FSCN1)在结直肠癌组织、Colo320和5-Fu耐药细胞株中的表达;分析LncRNA PCAT1和miR-145-5p、miR-145-5p和FSCN1之间的作用靶点。检测下调PCAT1、miR-145-5p、FSCN1对Colo320细胞增殖和侵袭的影响;检测5-Fu耐药细胞株细胞活力和凋亡率的变化;检测上调LncRNA PCAT1对Colo320细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的影响。结果:结直肠癌组织和Colo320细胞中LncRNA PCAT1和FSCN1表达上调,miR-145-5p表达下调;5-Fu耐药细胞株中LncRNA PCAT1和FSCN1表达下调,miR-145-5p表达上调。LncRNA PCAT1靶向miR-145-5p;miR-145-5p靶向FSCN1。上调LncRNA PCAT1通过miR-145-5p促进Colo320细胞增殖和侵袭。结论:LncRNA PCAT1通过miR-145-5p/FSCN1轴调控Colo320细胞增殖、侵袭及其化疗敏感性。

脾修补术、部分切除术及动脉栓塞术治疗创伤性脾破裂的疗效以及对患者免疫功能的影响

目的探讨对比脾修补术、部分切除术及动脉栓塞术治疗创伤性脾破裂的疗效及对患者免疫功能的影响。方法回顾性分析2015年1月—2018年12月海南医学院第一附属医院普外科收治的160例创伤性脾破裂患者,男性84例,女性76例;年龄37~68岁,平均45.86岁。其中50例行脾修补术(修补组),55例行脾部分切除术(切除组),55例行脾动脉栓塞术(栓塞组)。对三组患者的手术情况、手术疗效及手术前后外周血T淋巴细胞变化进行对比、分析。结果栓塞组的手术时间为(116.42±34.37)min,显著低于另外两组的(224.36±42.58)min和(218.74±36.04)min;栓塞组的术后住院时间为(7.85±1.30)d,显著低于另外两组的(10.36±2.74)d和(11.09±3.14)d;栓塞组的术中输血量为(205.80±46.68)mL,显著少于另外两组的(576.32±51.74)mL和(560.68±49.92)mL(P<0.05)。三组的手术总有效率分别为94%、87%和95%,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与术前相比,三组术后2周的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+、IgG、IgA及IgM水平均明显降低,术后4周较术后2周有所提高。栓塞组术后4周的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+、IgG、IgA及IgM水平分别为(60.95±3.77)%、(36.07±4.45)%、(1.21±0.14)%、(11.20±1.84)g/L、(1.59±0.36)g/L、(0.96±0.27)g/L,均与术前对应值接近,但均显著高于另外两组对应值(P<0.05);栓塞组术后2周CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+、IgG、IgA及IgM水平分别为(50.96±2.14)%、(32.20±3.17)%、(1.09±0.07)%、(9.05±1.66)g/L、(1.21±0.35)g/L、(0.82±0.23)g/L。栓塞组术后并发症总发生率为7%,显著低于修补组(24%)和切除组(20%),P<0.05。结论脾修补术、部分切除术和动脉栓塞术治疗创伤性脾破裂均有较好的效果,其中脾动脉栓塞术的操作更简单、创伤更小、并发症更少、免疫功能恢复更快,应用优势更显著。

纳米铁填料对聚二甲基硅氧烷磁性能的影响

聚二甲基硅氧烷在磁性靶向载药控释和磁流变方面具有较好使用价值。纳米铁具有较强的软磁性。将纳米铁微粒填入聚二甲基硅氧烷制备出聚二甲基硅氧烷/纳米铁复合材料。扫描电镜显示纳米铁均匀分散于聚二甲基硅氧烷基胶中,X线衍射谱表明分散在聚二甲基硅氧烷中的纳米铁的组份稳定,磁性能测试分析表明纳米铁的填入增强了聚二甲基硅氧烷的磁性能,聚二甲基硅氧烷/纳米铁复合材料呈现软磁材料特点。

血清LAMB1在结直肠癌患者中的表达及其临床意义

目的探究血清层粘连蛋白-1(LAMB1)在结直肠癌患者中的表达及其临床意义。方法收集在我院普通外科住院并符合纳入及排除标准的结直肠癌患者及无结直肠癌的同期住院患者,分为结直肠癌组和对照组,每组80例,通过酶联免疫法(ELISA)检测受试者血清中的LAMB1和癌胚抗原(CEA),并分析其对结直肠癌诊断的效果,观察LAMB1的浓度与病理分型的关系。结果结直肠癌组患者血清中的LAMB1和CEA显著高于对照组(P<0.05)。结直肠癌患者血清中的LAMB1和CEA与性别、年龄、肿瘤直径及肿瘤类型无相关性(P>0.05),但与肿瘤浸润深度及TNM分期均呈正相关,其与结直肠癌分化程度呈负相关,单分析LAMB1、单分析CEA及同时分析LAMB1与CEA对结直肠癌诊断时的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.887、0.842及0.901,LAMB1鉴别结直肠癌患者与无结直肠癌患者(对照组)优于CEA。此外,LAMB1联合CEA可进一步提高诊断性能。结论 LAMB1在结直肠癌患者血清中的表达情况可反映患者病理分型,且有望作为结直肠癌诊断的一种标志物。

MicroRNA-27b介导沉默同源盒蛋白HOXB8对人胃癌干细胞样特性的调节作用

目的:探究胃癌组织中miR-27b与同源盒蛋白HOXB8的表达水平,及两者调控人胃癌干细胞样特性的机制。方法:收集本院30例胃癌组织及对应癌旁正常组织,实时荧光定量PCR检测组织中miR-27b、HOXB8表达差异,生物信息学工具TargetScan7.2和双荧光素酶报告基因技术预测验证miR-27b与HOXB8的靶向关系;免疫磁珠分选法从胃癌细胞株SGC-7901中分选出胃癌干细胞,利用脂质体介导法将miR-27b mimic及阴性对照(miR-27b NC)转染至胃癌干细胞,实时荧光定量PCR检测转染后胃癌干细胞中miR-27b表达,Western blot检测转染后胃癌干细胞中HOXB8蛋白表达,CCK-8法检测胃癌干细胞活性,EdU实验检测胃癌干细胞增殖,细胞成球实验和细胞克隆形成实验检测胃癌干细胞自我更新能力。结果:胃癌组织中miR-27b的表达水平高于癌旁正常组织,而HOXB8则低于癌旁正常组织(P<0.01);miR-27b与HOXB83’-UTR在特定区域内存在碱基互补,miR-27b mimic和WT-HOXB83’-UTR重组质粒共转染的细胞相对荧光值较miR-27b NC和WT-HOXB83’-UTR重组质粒共转染的细胞降低(P<0.01);分选后得到高纯度CD44+标记的胃癌干细胞,并成功转染miR-27b mimic至胃癌干细胞;与空白对照组比较,miR-27b mimic组胃癌干细胞内miR-27b表达升高(P<0.01),HOXB8蛋白表达下降(P<0.01),细胞活性下降(P<0.01),EdU标记的阳性细胞减少(P<0.01),细胞成球个数少,球体积变小,细胞克隆形成数目减少(P<0.01)。结论:胃癌组织中miR-27b表达降低、HOXB8表达增高,miR-27b通过靶向沉默HOXB8表达调控胃癌干样细胞的增殖与自我更新能力。

下调miR-221诱导胃癌细胞凋亡的机制及其化疗敏感性研究

目的探究下调miR-221诱导人胃癌细胞凋亡的机制,及其对胃癌细胞化疗敏感性的影响。方法实时荧光定量PCR检测正常胃黏膜上皮细胞NGEC与4种胃癌细胞系(SGC-7901、BGC-823、MGC803、MKN-28)中miR-221表达水平;将SGC-7901细胞随机分为5组:空白对照组(常规培养)、Anti-miR-NC组(转染inhibitor control)、Anti-miR-221组(转染miR-221 inhibitor)、Anti-miR-221+siRNA-NC组(转染miR-221 inhibitor后再转染siRNA阴性对照)、Anti-miR-221+siRNA-Parkin组(转染miR-221 inhibitor后再转染siRNA-Parkin),Lipofectamine 2000脂质体介导法转染SGC-7901细胞。MTT法检测细胞活性;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位;Western blot检测自噬相关蛋白的表达水平;Hoechst 33342染色和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况。使用不同浓度奥沙利铂(2.5、5、10、20、40、80μg/mL)处理各组SGC-7901细胞48 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,计算IC50。结果4种胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC803、MKN-28的miR-221相对表达水平较正常胃黏膜上皮细胞NGEC升高(P<0.05)。与空白对照组比较,Anti-miR-221组SGC-7901细胞在转染24、48、72 h时活性下降,细胞线粒体膜电位下降,Pink1、Parkin蛋白表达水平升高,P62蛋白表达水平下降,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上调,细胞核浓缩并有碎裂的蓝色凋亡体,细胞凋亡率升高,经过奥沙利铂处理后细胞增殖抑制率升高,IC50下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与Anti-miR-221组比较,Anti-miR-221+siRNA-Parkin组SGC-7901细胞在转染48 h和72 h时活性升高,细胞线粒体膜电位升高,Pink1、Parkin蛋白表达水平下降,P62蛋白表达水平升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下调,细胞核浓缩明显减少,细胞凋亡率降低,经过奥沙利铂处理后细胞增殖抑制率下降,IC50升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论下调miR-221表达可通过调节Parkin介导的线粒体自噬途径诱导胃癌细胞发生凋亡,增加胃癌细胞对奥沙利铂的化疗敏感性。

参苓白术颗粒联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎患者Th17/Treg细胞平衡的影响以及疗效分析

[目的]观察参苓白术颗粒联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎(UC)患者Th17/Treg细胞平衡的影响,以及分析临床疗效。[方法]收集本院2017年1月~2018年10月诊治的UC患者132例,数字表法将132例UC患者随机分为对照组和观察组。对照组美沙拉嗪肠溶片口服,每次1.0 g,3次/d,疗程12周;观察组:在对照组基础上加用参苓白术颗粒开水冲服,1袋/次,3次/d,疗程12周。流式细胞仪检测外周血Th17和Treg细胞比例,ELISA法检测患者外周血IL-6和TNF-α表达的使用。[结果]观察组治疗后Th17细胞比例为(8.54±1.26)%,显著低于对照组的(10.45±1.52)%(P<0.05),观察组治疗后Treg细胞比例为(6.38±1.12)%,显著高于对照组的(5.46±1.03)%(P<0.05)。治疗后观察组IL-6和TNF-α分别为(18.28±4.24)μg/mL和(34.23±5.14)μg/mL(P<0.01),显著低于对照组的(26.34±5.81)μg/mL和(47.14±8.63)μg/mL(P<0.01)。治疗后观察组肠镜镜检的充血水肿率、糜烂率和溃疡率分别为24.24%、15.15%和7.58%,显著低于对照组的42.42%、28.79%和16.67%(P<0.05)。观察组治疗有效率为92.42%(61/66),显著高于对照组的75.76%(50/66)(P<0.05)。观察组复发率为4.91%(3/61),显著低于对照组的32.00%(16/50)(P<0.05)。[结论]参苓白术颗粒调节了UC患者Th17/Treg平衡,抑制炎症反应,疗效显著,患者复发率低。