戊型肝炎病毒研究进展

戊型肝炎病毒(HEV)是单股正链RNA病毒,主要经粪口途径在人和动物间传播。HEV感染已经成为全球性的公共卫生问题,多流行于卫生条件较差的地区。尽管HEV感染多为自限性,但仍有较高几率导致孕妇以及妊娠动物发生流产甚至死亡,并且越来越多的证据表明其可导致诸如神经系统症状等在内的肝外损伤。HEV作为一种人畜共患病原,具有广泛的宿主适应性,对猪、兔等经济动物的健康造成了较大威胁,同时也危害人类动物性食品安全,因此,有关HEV流行和感染机制的研究成为公共卫生和医学领域的热点问题。近年,随着HEV体外培养和动物模型探索成果的相继问世,HEV的生活史及其致病机制也有了新的研究进展。本文综合近年来HEV相关的研究进展,对其流行病学、分类、致病机制、研究模型以及面临的问题等进行简要阐述。

三聚氰胺对小鼠肾脏病理损伤的初步观察

为观察三聚氰胺对小鼠肾脏病理损伤情况,以浓度700、350、175mg/kg体重给28天昆明小鼠连续灌胃,玉米油做溶剂,观察肾脏组织病理学变化及细胞化学变化。结果发现,三聚氰胺可引起小鼠肾脏肾小管管腔中出现黄色或棕黄色结晶,肾小管上皮细胞变性、坏死,细胞核固缩,肾小管管腔扩张,上皮细胞脱离基底膜。试验表明高剂量的三聚氰胺可引起小鼠肾脏的严重损伤,造成肾小管上皮细胞变性、坏死,特征性的变化是肾小管管腔中三聚氰胺产物结晶沉积,此变化具有证病意义。

将健康中国理念融入《兽医公共卫生学》课程教学

习近平同志在全国高校思想政治工作会议上强调:“提升思想政治教育亲和力和针对性,满足学生成长发展需求和期待,其他各门课都要守好一段渠、种好责任田,使各类课程与思想政治理论课同向同行,形成协同效应”[1]。推进课程思政建设,是守好一段渠、种好责任田,使各类课程与思政课同向同行、形成协同效应的重要举措,旨在使德育与智育相统一,推动实现全员全程全方位育人。高等院校不仅要肩负起培养具有专业技能的人才的任务,也要强化对学生人文素养、职业道德、思政素质的培养,将立德树人作为根本任务,不断建设课程主渠道,发挥课程的育人作用。

3-甲基-4-硝基酚对大鼠睾丸组织的损伤作用

为从病理学角度探讨3-甲基-4-硝基酚(PNMC)的生殖毒性,采用24只SPF雄性SD大鼠随机分为4组,染毒组分为100 mg/kg体重、10 mg/kg体重和1 mg/kg体重三组,连续5 d皮下注射,对照组皮下注射等量的溶剂(PBS+0.05%tween80)。最后一次染毒后24 h,无痛处死大鼠,称取睾丸湿重并计算其指数。将已固定的睾丸组织进行石蜡切片,采用H.E和免疫组化染色的方法观察PNMC对大鼠睾丸的病理损伤及其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。结果显示各个染毒组与对照组相比较,睾丸大体湿重和睾丸指数明显下降(P<0.05或P<0.01);H.E染色结果显示各试验组睾丸曲细精管生精细胞均有不同程度的空泡变性兼或坏死;免疫组织化学染色观察发现:各实验组睾丸中Bax蛋白表达量显著高于对照组(P<0.01),而Bc1-2蛋白表达量却明显低于对照组(P<0.01),Bc1-2/Bax也显著低于对照组(P<0.01)。研究结果表明,PNMC不仅可引起雄性大鼠睾丸曲细精管生精细胞变性、坏死,还可促进生殖细胞的大量凋亡。

“兽医组织病理学技术及应用”课程思政教学探索

"兽医组织病理学技术及应用"课程思政教学协同育人模式探索以习近平总书记的系列重要讲话为指导思想,将社会主义核心价值观、家国情怀、社会责任、奋斗精神等思政元素,以及唯物主义辩证法分析问题的思维纳入教学计划和课堂讲授中,将兽医组织病理学技术专业知识的传授与思政教育有机结合,引导学生树立正确的人生观、价值观和世界观。培养德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人,履行学校育人使命,做好"三全育人"工作。

白眉长臂猿感染戊型肝炎病毒的病理学观察

2010年3月8日,北京动物园1只白眉长臂猿突发死亡,通过组织病理学和免疫组织化学等方法对该病死白眉长臂猿死因进行分析。大体剖检观察显示心脏表面可见灰白色病灶,肝脏表面散在大小不一黄白色病灶,肾脏成土黄色,肺脏大面积出血,胃黏膜有散在出血点,肠道水肿,肠系膜淋巴结肿大。病理组织学观察结果显示心肌坏死严重,肺脏严重出血并含有大量炎性细胞浸润,肝脏肝细胞变性坏死并有大量的炎性细胞浸润,肾脏肾小管上皮细胞变性坏死,肾小管管腔中含有黄绿色的小结晶体,肠黏膜水肿。免疫组织化学检测肝脏、肾脏戊型肝炎病毒ORF 2阳性。综合诊断该白眉长臂猿因感染戊型肝炎病毒而导致抵抗力减弱,从而导致肾脏肾小管蛋白凝集发生结晶,引发尿毒症,而后导致心肌坏死,从而导致死亡。

本科生创新实践项目在兽医学科中的应用与探索

实施创新实践教育是高等教育教学改革的重要内容,高校的创新创业教育也是建设与实现创新型社会的有效途径之一。对于畜牧兽医专业学生来说,除了掌握基础理论知识外,科研能力与实践能力训练更是必不可少,这就需要国家、各农业高等院校和相关企业提供支持。该文以中国农业大学为例,介绍了动物医学专业本科生科研训练和创新实践项目的实施情况,分析了项目的优势与不足,并提出了相应的对策措施。

大肠埃希菌感染对家兔圆小囊组织结构及VIP表达的影响

应用组织病理学、免疫组织化学等方法,探讨大肠埃希菌感染对实验兔圆小囊的组织病理学损伤及血管活性肠肽(VIP)在兔圆小囊组织内的分布。结果显示,与对照组相比,感染组圆小囊黏膜层出现了明显的病理性损伤,黏膜下层淋巴滤泡的长度极显著变短(P<0.01)。免疫组织化学染色结果显示,感染组兔圆小囊组织中的VIP的表达显著高于对照组(P<0.05)。上述结果表明,大肠埃希菌感染可引起兔圆小囊组织结构明显的病理损伤,并导致圆小囊组织中VIP的表达明显增多。

模拟失重对大鼠睾丸组织结构及AR和HSP70表达的影响

采用-30°尾部悬吊模拟失重生理效应,32只Wistar雄性大鼠随机分为7d对照组、14d对照组、悬吊7d组和悬吊14d组4组,运用HE染色和免疫组织化学染色方法,分别观察模拟失重7d、14d大鼠睾丸组织的组织病理学变化,同时定量对比观察了对照组、模拟失重组大鼠睾丸组织中AR和HSP70的表达和定位。结果显示,悬吊7d和14d的大鼠睾丸组织均出现了明显的组织病理学变化,表现为睾丸曲细精管内生精上皮细胞排列紊乱,出现不同程度的变性、坏死;悬吊14d的大鼠睾丸的病变比悬吊7d的更为明显。免疫组化染色结果表明,模拟失重7d、14d的大鼠睾丸组织中,AR表达量均极显著降低(P<0.01);而HSP70表达量均极显著升高(P<0.01),在组织间隙和间质渗出物中出现大量eHSP70。研究表明,模拟失重状态对雄性大鼠生殖器官睾丸的组织结构会造成严重的病理损伤,导致睾丸生精上皮不可逆损伤,使睾丸组织分泌表达AR的功能减退,引起HSP70的过量表达和大量释放形成eHSP70,以至造成睾丸实质的严重损伤。

斑点叉尾■溃烂症的病原鉴定和致病特性

为探明斑点叉尾[鱼回](Ictalunes punctatus)溃烂症的病因,从4尾患鱼肝脾中分离纯化出4株优势菌株,并进行病原鉴定、毒力基因检测、动物回归感染和药敏试验。4株优势菌经鉴定并命名为杀鲑气单胞菌无色亚种(Aeromonas salmonicida subsp achromogenes)X-G1,杀鲑气单胞菌杀鲑亚种(A.s subsp salmonicida)X-P2、X-P3和嗜水气单胞菌(A.hydrophila)X-P4。15℃时,杀鲑气单胞菌X-G1、X-P2和X-P3的世代时间(约14 min)均小于嗜水气单胞菌X-P4(约20 min);25℃时,杀鲑气单胞菌X-G1、X-P2和X-P3株的世代时间(约20 min)均大于嗜水气单胞菌X-P4株(约16 min)。X-G1株可检到弹性蛋白酶、溶血素和甘油磷脂胆固醇酰基转移酶等3种毒力基因;X-P2株仅可检到弹性蛋白酶1种毒力基因;X-P3株可检测到弹性蛋白酶、溶血素、细胞毒性肠毒素、丝氨酸蛋白酶、酯酶、气溶素和甘油磷脂胆固醇酰基转移酶等7种毒力基因;X-P4株可检测到鞭毛、弹性蛋白酶、气溶素、细胞毒性肠毒素、热不稳定性肠毒素、丝氨酸蛋白酶和溶血素等7种毒力基因。分离株X-G1、X-P2、X-P3和X-P4在15~17℃水温下腹腔注射攻毒的半数致死浓度(LD 50)依次为0.49×10^4、0.78×10^4、0.53×10^4、3.84×10^4 CFU/g;而在23~26℃水温下测得的LD 50依次为1.48×10^4、1.80×10^4、0.82×10^4、0.68×10^4 CFU/g。分离株混合感染比单一株感染均表现出更强的致死能力。分离菌株对多西环素、恩诺沙星、氟苯尼考均敏感,但因患病鱼不能摄食药饵而导致治疗失败。

青春期前双酚A暴露对雌性大鼠生殖器官发育的影响

本研究旨在从毒性病理学角度探讨双酚A(BPA)暴露对青春期前雌性大鼠生殖器官发育的影响,为研究BPA雌激素样作用提供组织形态学依据。选用21日龄雌性大鼠,经不同浓度的BPA暴露后,检测大鼠脏器指数、血清雌二醇水平,观察子宫和卵巢形态结构。结果显示,BPA给予7 d后与对照组比较,BPA 180 mg/(kg·bw)组大鼠子宫和卵巢指数升高(P<0.05),血清雌二醇水平降低(P<0.05)。光镜观察发现,BPA试验组大鼠与对照组比较,子宫内膜增厚、内膜细胞形态改变,卵巢初级和次级卵泡数量增多。病理半定量分析结果表明,与对照组比较,BPA 180 mg/(kg·bw)组大鼠子宫内膜厚度、内腔面积及外腔直径、总卵泡数量有统计学差异(P<0.05)。表明BPA短期大剂量暴露可促进青春期前雌性大鼠子宫和卵巢发育,其作用存在明显的剂量依赖关系。

猪群戊型肝炎病毒的流行及防控

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一种重要的人兽共患病病原,在全球范围内广泛流行。猪是HEV的重要自然宿主,自然感染率较高,通常为亚临床感染或与其他病原混合感染。HEV主要通过粪口途径在人和动物之间传播,国内外均可见人群HEV聚集性感染的报道。由此可见,HEV的流行不仅对畜牧业生产造成威胁,还严重危害人类的食品安全。因此,了解猪群HEV的流行情况和防控措施具有重要的公共卫生学意义。

芳香烃受体AhR在免疫调节及感染性疾病中的作用

芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AhR)是一种配体依赖性的转录蛋白,其广泛分布于人和动物的各种组织和细胞,且在不同生物体内其蛋白结构具有高度保守性。目前研究证实,AhR的配体主要分为两类,一类是外源性配体如二噁英,另一类为内源性配体,主要为色氨酸代谢产物[1]。非激活状态下,AhR主要位于细胞质中,与热休克蛋白90、X-相关蛋白2和p23等结合形成复合物;当与其配体结合后,AhR即从复合物中解离,进入细胞核,并与核中的AhR核转运蛋白(AhR nuclear transloca-tor,ARNT)结合形成异二聚体.

戊型肝炎病毒动物模型的研究进展

戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的一种急性的自限性病毒性疾病,主要以粪口途径传播,在全球范围内呈暴发流行或散发传播,目前已被世界卫生组织认定为一个重要的公共卫生疾病。随着对戊型肝炎深入研究,越来越多的HEV动物宿主被证实,这促进了更多动物模型的建立。常见的实验动物模型有非人灵长类动物、猪、兔、啮齿类动物等。HEV动物模型在研究HEV传播、致病机制等方面具有非常重要的意义。本文就近年来HEV动物模型的研究进展进行综述。

抗菌肽对热应激肉鸡生长性能及免疫器官的影响

为了解抗菌肽在热应激条件下对肉鸡生长性能及免疫器官的影响,选用30只2周龄健康AA肉鸡,称重后随机分为3组:常温对照组、单纯热应激组、抗菌肽+热应激组,每组10只,热应激10d。结果,抗菌肽+热应激组与单纯热应激组比较,平均日增重及饲料转化率差异极显著(P<0.01);病理观察发现单纯热应激组肉鸡法氏囊充血、出血,淋巴滤泡星空样变,胸腺皮质区淋巴细胞坏死、排空,脾充血、淤血,淋巴细胞坏死,小肠黏膜水肿脱落,上皮层及固有层炎性细胞浸润;抗菌肽+热应激组无明显病变;免疫组化检测表明,抗菌肽+热应激组肉鸡胸腺、脾、法氏囊中热休克蛋白70(HSP70)的表达少于单纯热应激组。结果表明,在热应激条件下口服抗菌肽可以降低热应激对机体免疫器官的损伤,降低高温对肉鸡增重的影响。

三聚氰胺对小鼠急性毒性试验中消化系统重要组织器官损伤的病理学观察

为探讨三聚氰胺对急性毒性试验中小鼠的胃、小肠和肝的损伤作用,将32只SPF级昆明小鼠随机分为4组,每组8只,雌雄各半,连续灌服不同剂量的三聚氰胺(0、175、350、700 mg/kg),观察试验小鼠的临床表现,剖检死亡小鼠并取材,观察胃、小肠和肝的病理学变化。结果显示,各试验组小鼠48 h内均全部死亡。光镜下可见死亡小鼠胃和小肠的黏膜层弥漫性坏死,肝细胞脂肪变性,肝小叶弥漫性淤血,甚至有片状出血灶,灶内肝细胞坏死。700 mg/kg组小鼠的胃、小肠及肝血管内均可见多个黄色颗粒状结晶体沉着。在透射电镜下,175 mg/kg和350 mg/kg组小鼠的肝细胞胞浆结构疏松,线粒体肿胀,700 mg/kg组小鼠的肝细胞胞浆中充满脂滴,线粒体弥漫性固缩。表明,三聚氰胺可引起小鼠胃肠黏膜发生急性弥漫性坏死,肝淤血,肝细胞变性,散在坏死,高浓度的三聚氰胺可在胃、小肠和肝间质中形成结晶体。

屠宰鸡血清和肝中乙型肝炎病毒的检测

采集了129份屠宰鸡血清样品,采用酶联免疫吸附试验检测了鸡血清样品中HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb等乙型肝炎诊断指标;用免疫电镜方法观察了血清样品中乙型肝炎病毒样粒子。采用免疫组织化学技术检测了肝中乙型肝炎病毒相关抗原的分布,并对鸡肝的S基因进行了PCR检测及同源性比对。结果显示,HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb的血清阳性率分别为28.68%、53.49%、17.05%、4.65%和9.3%,其中3份血清同时呈HBsAg、HBeAg阳性,阳性率为2.33%。电镜负染色样品观察可见大量密集排列的病毒样粒子,形态和大小类似于人乙型肝炎病毒Dane颗粒和小球状颗粒。鸡肝中HBsAg、HBcAg免疫组织化学检测结果显示,阳性率为39.06%～62.07%。应用PCR技术扩增出的2株乙型肝炎病毒的核酸序列片段与人乙型肝炎病毒的同源性分别高达92.2%和97.9%。以上结果说明,部分屠宰鸡可能存在乙型肝炎病毒感染。

9例大熊猫肝脏和肾脏的器官病理学观察

为了解发病死亡的大熊猫肝脏、肾脏的器官病理学变化特点,本研究采用组织病理学、组织化学和免疫组织化学等方法,对9例发病死亡的大熊猫肝脏和肾脏的组织病理形态学变化进行了系统观察。同时检测观察HBV和HEV抗原在大熊猫肝脏、肾脏组织内的分布定位。组织病理学观察发现,9只大熊猫的肝脏和肾脏均表现出不同程度的病变。肝脏主要表现为淤血、水肿,严重的有出血变化。肝细胞普遍变性,散在单个性坏死或多发性局灶性坏死,个别出现大片坏死、淋巴细胞等炎性细胞浸润、汇管区胆管增生、肝细胞萎缩、纤维结缔组织增生、含铁血黄素沉着等变化。肾脏主要表现为肾球囊扩张,肾小管上皮细胞出现不同程度的变性坏死,肾小管内出现蛋白管型,间质程度不同的纤维化和程度不同的炎性细胞浸润。免疫组织化学观察结果发现,9只大熊猫HBV和HEV的阳性检出率比较高,但各例肝肾组织内免疫组织化学阳性反应信号的强弱不尽相同。Mallory三色染色结果显示,9只大熊猫的肝脏和肾脏均出现不同程度的纤维组织增生。上述结果表明,大熊猫的肝脏和肾脏普遍存在炎症病变,而且大多都有不同程度的纤维组织增生性病变。这些病变的发生可能与肝炎病毒的感染有一定的关系。

双酚A对SPF大鼠脾脏的组织病理学损伤作用

为了进一步研究双酚A的毒性作用,试验将40只22日龄SPF大鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组10只,各组分别灌胃给予植物油及0.5 mg/kg、5 mg/kg、50 mg/kg双酚A,1次/d,连续灌胃4周;取脾脏固定,采用石蜡切片技术观察脾脏的组织病理学变化。结果表明:对照组和低剂量组大鼠脾脏无明显变化,中剂量组和高剂量组大鼠脾脏结构受到损伤。说明一定剂量的双酚A会影响机体的免疫功能。

双酚A对小鼠睾丸组织的损伤作用及对细胞凋亡的影响

目的从毒性病理学角度了解双酚A(BPA)对小鼠睾丸组织病理损伤的作用,为研究BPA毒性作用提供形态学依据。方法选用108只SPF雄性CD-1小鼠,称重后随机分为4个剂量组(0、100、300、600 mg/kg BW)。BPA经口染毒8周,取睾丸组织固定,HE及免疫组化染色后进行光镜和电镜观察,并进行半定量统计。结果 BPA染毒8周后与对照组比较,BPA 300、600 mg/kg BW组小鼠体重降低,睾丸指数呈现下降趋势。光镜观察发现BPA染毒小鼠睾丸曲精小管支持细胞、各级生精细胞变性坏死、脱落,精子数量减少;透射电镜观察发现BPA引起睾丸生精细胞出现核固缩、顶体囊和顶体帽发育不良或发育畸形,基膜增厚。免疫组化检测结果表明,与对照组比较,BPA染毒组小鼠睾丸组织NF-κB表达量明显升高(P<0.01);BPA 300、600 mg/kg BW剂量组Caspase-3表达量明显升高(P<0.01)。TUNEL检测表明BPA染毒组小鼠睾丸凋亡阳性信号与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论上述结果表明经口染毒不同剂量BPA对小鼠睾丸组织均产生了不同程度的损伤,诱导睾丸组织细胞凋亡。