晚期糖基化终末产物AGEs通过牙周膜成纤维细胞的TLR4途径促进牙周炎症

目的:探讨糖尿病的重要病理产物晚期糖基化终末产物(AGEs)对牙周膜成纤维细胞(PDLC)中Toll样受体4(TLR4)介导的相关炎症因子表达的作用,以阐明AGEs对牙周炎可能的影响。方法:分别使用不同剂量的AGEs(0、100、300、500 mg/L)处理牙周膜细胞。通过免疫荧光染色α-actin,以检测AGEs对细胞骨架的可能作用。通过Western blot检测不同剂量的AGEs对PLDCs表达TLR4及下游炎症因子IL-1β和TNF-α的影响,以及AGEs抑制剂E5564对TLR4激活的阻断作用。通过免疫荧光再次验证AGEs通过TLR4对IL-1β和TNF-α的激活作用。结果:AGEs对PDLCs的培养和形态并未有影响,对细胞结构蛋白α-actin的表达未见明显影响。Western blot结果显示,与对照组相比,300和500 mg/L的AGEs处理明显增加了PDLCs的TLR4的表达,且300和500 mg/L剂量之间未发现统计学差异。AGEs引起的TLR4的激活继续导致了下游IL-1β和TNF-α的表达上调,Western blot和免疫荧光均证明,加入TLR4特异性抑制剂E5564可以逆转TLR4通路诱导的IL-1β和TNF-α激活。结论:AGEs并未对成纤维细胞的形态和骨架有明显影响,AGEs可能通过TLR4通路促进牙周成纤维细胞的炎症因子IL-1β和TNF-α的释放,促进牙周炎的发展。

正畸静压力通过p38MAPK调控牙周膜细胞MMP-2和MMP-9的表达

目的:研究持续性正畸静压力对牙周膜细胞(PDLCs)表达MMP-2和MMP-9的调控及其有关的调控通路。方法:体外培养PDLCs,取4~7代的PDLCs,随机分成5组,分别施加0、2 g/cm^(2)(24 h)、2 g/cm^(2)(48 h)、4 g/cm^(2)(24 h)、4 g/cm^(2)(48 h)的持续静压力,对细胞形态及骨架F-actin进行检测,通过Western blot观察持续静压力对MMP-2、MMP-8、MMP-9的表达的影响。研究相关MAPK通路包括JNK、ERK、p38MAPK在静压力引起MMPs表达变化中的作用。分组添加p38MAPK阻断剂SB203580,分别通过Western blot和免疫荧光观察p38MAPK通路的作用。结果:在不同的持续静压力下,PDLCs形态未见明显变化,F-actin染色显示细胞骨架未有明显区别。Western blot显示静压力对MMP-8表达未见明显影响,MMP-2和MMP-9的表达明显上调。且这种上调作用与p38MAPK通路有关,与JNK和ERK通路无关。结论:持续静压力调控PDLCs MMP-2和MMP-9的表达,这种调控通过p38MAPK途径产生作用,与JNK和ERK通路无关。