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艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制实验研究
1
作者
吴洁
田鑫越
+3 位作者
秦耐宇
朱爱玲
孙佳琦
朱颖静
《陕西医学杂志》
CAS
2024年第8期1041-1046,1050,共7页
目的:探讨艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:收集26例肝癌患者的癌组织和癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织和细胞微小RNA(miR)-449b-5p和转化生长因子-β诱导因子同源盒2(TGIF2...
目的:探讨艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:收集26例肝癌患者的癌组织和癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织和细胞微小RNA(miR)-449b-5p和转化生长因子-β诱导因子同源盒2(TGIF2)mRNA表达。选取上述基因变化最显著的细胞进行后续实验。将肝癌SK-Hep-1细胞分为对照组(正常培养)、艾司氯胺酮-L组(1 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H组(2 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组(转染inhibitor NC+2 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H+miR-449b-5p inhibitor组(转染miR-449b-5p inhibitor+2 mmol/L艾司氯胺酮处理)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot检测细胞中肿瘤增殖细胞核抗原(Ki-67)、半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、TGIF2蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449b-5p和TGIF2的靶向关系。结果:肝癌组织和细胞TGIF2 mRNA表达水平升高,miR-449b-5p表达水平降低(均P<0.05)。与对照组比较,艾司氯胺酮-L组、艾司氯胺酮-H组以及艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组SK-Hep-1细胞中miR-449b-5p表达水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,TGIF2 mRNA表达水平、OD_(450)值(24、48 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGF-A、TGIF2蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组比较,艾司氯胺酮-H+miR-449b-5p inhibitor组SK-Hep-1细胞miR-449b-5p表达水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,TGIF2 mRNA表达水平、OD_(450)值(24、48 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGF-A、TGIF2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。miR-449b-5p mimic+TGIF2-WT组荧光素酶活性低于miR-NC+TGIF2-WT组(P<0.05)。结论:艾司氯胺酮通过上调miR-449b-5p/TGIF2轴抑制肝癌细胞的恶性生物学行为。
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关键词
肝癌
艾司氯胺酮
微小RNA-449b-5p
转化生长因子-β诱导因子同源盒2
细胞增殖
细胞迁移
细胞侵袭
细胞凋亡
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职称材料
题名
艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制实验研究
1
作者
吴洁
田鑫越
秦耐宇
朱爱玲
孙佳琦
朱颖静
机构
如皋市人民医院消化内科
出处
《陕西医学杂志》
CAS
2024年第8期1041-1046,1050,共7页
基金
江苏省卫生健康委员会医学科研项目(ZD20210079)。
文摘
目的:探讨艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及可能的作用机制。方法:收集26例肝癌患者的癌组织和癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝癌组织和细胞微小RNA(miR)-449b-5p和转化生长因子-β诱导因子同源盒2(TGIF2)mRNA表达。选取上述基因变化最显著的细胞进行后续实验。将肝癌SK-Hep-1细胞分为对照组(正常培养)、艾司氯胺酮-L组(1 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H组(2 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组(转染inhibitor NC+2 mmol/L艾司氯胺酮处理)、艾司氯胺酮-H+miR-449b-5p inhibitor组(转染miR-449b-5p inhibitor+2 mmol/L艾司氯胺酮处理)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞侵袭能力。流式细胞术检测细胞凋亡情况。Western blot检测细胞中肿瘤增殖细胞核抗原(Ki-67)、半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、TGIF2蛋白表达量。双荧光素酶报告基因实验验证miR-449b-5p和TGIF2的靶向关系。结果:肝癌组织和细胞TGIF2 mRNA表达水平升高,miR-449b-5p表达水平降低(均P<0.05)。与对照组比较,艾司氯胺酮-L组、艾司氯胺酮-H组以及艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组SK-Hep-1细胞中miR-449b-5p表达水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,TGIF2 mRNA表达水平、OD_(450)值(24、48 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGF-A、TGIF2蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与艾司氯胺酮-H+inhibitor NC组比较,艾司氯胺酮-H+miR-449b-5p inhibitor组SK-Hep-1细胞miR-449b-5p表达水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,TGIF2 mRNA表达水平、OD_(450)值(24、48 h)、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数及Ki-67、MMP-9、VEGF-A、TGIF2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。miR-449b-5p mimic+TGIF2-WT组荧光素酶活性低于miR-NC+TGIF2-WT组(P<0.05)。结论:艾司氯胺酮通过上调miR-449b-5p/TGIF2轴抑制肝癌细胞的恶性生物学行为。
关键词
肝癌
艾司氯胺酮
微小RNA-449b-5p
转化生长因子-β诱导因子同源盒2
细胞增殖
细胞迁移
细胞侵袭
细胞凋亡
Keywords
Liver cancer
Esketamine
miR-449b-5p
Transforming growth factor-β-induced factor homeobox 2
Cell proliferation
Cell migration
Cell invasion
Apoptosis
分类号
R36 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
艾司氯胺酮对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制实验研究
吴洁
田鑫越
秦耐宇
朱爱玲
孙佳琦
朱颖静
《陕西医学杂志》
CAS
2024
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