尼氟灭酸对CCI模型鼠DRG神经元TMEM16A表达的抑制作用

目的：观察尼氟灭酸（niflumic acid,NFA）干预后,TMEM16A在坐骨神经压榨性损伤（chronic constriction injury,CCI）模型鼠背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）神经元上的表达,研究TMEM16A是否参与神经病理性疼痛。方法：制备CCI模型,热板实验检测热缩足反射潜伏期（thermal withdrawal latency,TWL）。在模型制备后第1 d开始以腹腔注射形式给予不同浓度的NFA干预14 d,取大鼠L4-6 DRG神经元进行实验。免疫荧光实验明确TMEM16A在DRG神经元中的分布;运用RTPCR技术和Western Blot技术在给予不同浓度NFA干预后,检测CCI模型DRG神经元上TMEM16A的mRNA水平和蛋白的表达。结果：（1）CCI组的TWL较正常组明显缩短,给予10μM、50μM和300μM的NFA干预后,各组TWL较CCI组均明显延长（P〈0.01,n=6）;50μM的NFA干预组较10μM的NFA干预组TWL也明显延长（P〈0.05,n=6）;但300μM的NFA干预组与50μM的NFA干预组相比,TWL时间差异无统计学意义。（2）免疫荧光显示TMEM16A主要存在于DRG神经元上;（3）CCI组mRNA水平较正常组明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元TMEM16A的mRNA水平较CCI组逐渐降低,差异具有统计学意义（P〈0.01,n=6）。（4）CCI组TMEM16A蛋白表达较正常组的明显增高;随着NFA浓度的增加,DRG神经元上TMEM16A蛋白表达较CCI组逐渐减低,差异具有统计学意义（P〈0.01,n=6）。结论：尼氟灭酸能抑制神经病理性疼痛大鼠DRG神经元TMEM16A的表达,而且与尼氟灭酸的剂量相关,提示钙激活氯通道可能参与或调控神经病理性疼痛的发生。

低氧对苯肾上腺素诱导的豚鼠肠系膜动脉收缩反应的影响

目的：探讨不同时段低氧对苯肾上腺素（phenylephrine,PE）诱导的豚鼠肠系膜动脉收缩反应的影响及其作用机制。方法：应用压力肌动图技术,在急性分离的豚鼠肠系膜动脉2级血管（直径300~400μm）上,观察20、40和60 min低氧（95%CO2和5%O2混合）对内皮非依赖的血管收缩剂PE收缩血管直径的影响。结果：PE（0.1~100μmol/L）可以浓度依赖性收缩豚鼠肠系膜动脉。低氧引起生理盐溶液p H值从7.4下降到6.3。低氧能显著抑制PE引起的血管收缩幅度,用正常生理盐溶液洗脱20 min此抑制作用仍难以恢复。低氧抑制PE引起的肠系膜动脉的收缩反应具有时间依赖性,抑制程度依次为低氧60 min〉40min〉20 min。将生理盐溶液p H降低至6.3也可抑制PE对血管收缩的作用。结论 ：低氧能够时间依赖性地抑制PE对豚鼠肠系膜动脉的收缩作用,其作用机制可能与p H的下降有关。