HPLC法测定保健食品中酪蛋白磷酸肽

目的：建立保健食品中酪蛋白磷酸肽的高效液相色谱测定方法。方法：样品经处理后，采用不同比例的乙腈、0．1％醋酸溶液梯度洗脱，用带有紫外检测器的高效液相色谱仪测定。结果：方法检测限为10μg／ml，相对标准偏差为3．2％，回收率为91％～103％。结论：本方法前处理简便、检测灵敏度高，适用于保健食品钙片中酪蛋白磷酸肽含量的测定。

消毒洗剂中酮康唑的高效液相色谱测定法

目的建立消毒洗剂中酮康唑含量的高效液相色谱(HPLC)测定法。方法采用ODSC18色谱柱分离,流动相为甲醇+水(80+20),流量为1.00ml/min,检测波长为239nm。结果该方法线性范围为1.00～100μg/ml,r=0.9999。回收率为98.1%～99.8%,日内、日间相对标准偏差均小于2%,方法检出限为1.08μg/ml。结论该方法简便、快速、准确,适用于酮康唑洗剂的测定。

食品中的黄曲霉毒素(B_1B_2G_1G_2)HPLC法测定探讨

目的探讨高效液相色谱法测定食品中的黄曲霉毒素（B1、B2、G1、G2）的测定方法。方法样品经处理、净化、衍生后，采用不同比例的乙腈、水梯度洗脱，用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定。结果方法的检测限为AFT（B1、G1）1、5μg/kg；AFT（B2、G2）0．5μg/kg。四种黄曲霉毒素的回收率均在87．2％～101．3％，四种黄曲霉毒测定结果的RSD在1．17％～2．76％。结论方法简单、快速、准确，检出限低，回收率高。

硒与乙型肝炎关系的初步探讨

硒与乙型肝炎关系的初步探讨王美霞，孙爱民，陈洪涛，孟林敏，买凯，田随安，杨改霞（河南省医学科学研究所肝病研究室郑州４５００５２河南省卫生防疫站郑州４５００５３）关键词乙型肝炎；硒；分析七十年代后期，我国的科学家证实硒可以预防克山病、大骨节病［１］，１...

河南省吸毒人群HIV/HCV感染状况分析

目的了解河南省吸毒人群人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)感染状况及其相关危险因素,为针对其制订艾滋病防治措施提供科学依据。方法于2009年1月-2010年6月对河南省美沙酮维持治疗门诊收治的836名吸毒者进行行为学和血清学调查,分析其HIV、HCV感染的危险因素。结果 836名吸毒者HIV抗体阳性者12例,阳性率为1.44%,HCV抗体阳性者32例,阳性率为3.83%;HIV/HCV合并感染率为0.8%(7/836);近半年吸毒方式为单纯注射的人群合并感染率为12.1%(7/58);曾共用针具人群的合并感染率为9.5%(2/21);20.5%(171/836)的吸毒者曾注射过毒品;66.7%(565/836)的吸毒者曾戒毒,但均未成功;在进入美沙酮门诊时59.7%(499/836)的研究对象尿检阳性,提示近期曾使用毒品。结论吸毒人群是HIV、HCV感染的易感人群,同时其存在多种导致HIV传播的危险因素;应加强美沙酮维持治疗,降低吸毒人群高危行为,遏制艾滋病在该人群中的传播。

高效液相色谱法测定红曲米中莫拉可林K的研究

目的：建立用HPLC法测定红曲中莫拉可林K含量的方法。方法：样品经过处理后,用甲醇、水洗脱,用带有紫外检测器的高效液相色谱仪测定。采用ODS C18分离;流动相为甲醇-水-磷酸（77＋23＋0.025）;流量1.00 ml/min;检测波长238 nm。结果：该方法检出限为5.3 ng,相对标准偏差为3.29%,回收率为93.8%-98.8%。结论：该方法简便、快速、灵敏度高,有良好的稳定性和重现性,适用红曲中莫拉可林K含量的测定。

高效液相色谱法测定天麻素片中天麻素的研究

目的：建立用HPLC法测定天麻素片中天麻素含量的方法。方法：样品经过处理后,用乙腈、磷酸水洗脱,用二级管阵列检测器的高效液相色谱仪测定。采用ODS C18分离;流动相为乙腈-水-磷酸（5＋95＋0.05）;流量1.00 ml/min;提取波长：220 nm。结果：该方法检出限为4.5 ng,相对标准偏差为4.54%,回收率为91.1%～96.6%。结论：该方法简便、快速、灵敏度高,有良好的稳定性和重现性,适用天麻素片中天麻素含量的测定。

河南省2005-2008年艾滋病抗病毒治疗评估：患者CD4＋T淋巴细胞计数和病毒载量分析

目的 为评估和预测河南省艾滋病抗病毒治疗状况,分析患者CD4＋T淋巴细胞和病毒载量.方法 通过＂河南省艾滋病检测实验室网络数据库＂收集河南省艾滋病人群2009年CD4＋T淋巴细胞计数和病毒载量检测结果及相关信息.对其中未治疗和2005-2008年加入一线抗病毒治疗人群（＞13岁）的检测结果构成比进行横断面研究.结果 在2009年上、下半年河南省未治疗的艾滋病人群中,CD4＋T淋巴细胞检测＜200个/μl者均＞20%（χ2=2.059,P=0.151）,200～350个/μl者的构成比则由上半年27.61%上升到下半年的29.41%（χ2=4.636,P=0.031）,＞350个/μl者的构成比从上半年51.49%下降到下半年的48.60%（χ2=9.767,P=0.002）.在未治疗的艾滋病人群中,病毒载量＞10 000 copy/ml和＞30 000 copy/ml者所占百分比分别为34.53%和19.65%.2005-2008年间加入一线抗病毒治疗的艾滋病人群中,治疗时间越长,CD4＋T淋巴细胞＞350个/μl者的构成比越高（χ2=148.689,P＜0.001）,＜200个/μl者的构成比则越低（χ2=46.686,P＜0.001）;同时,病毒载量＜500 copy/ml者的构成比越低（χ2=9.066,P=0.003）,＞10 000 copy/ml者的构成比则越高（χ2=6.597,P=0.010）.结论 河南省多年来进行的艾滋病一线抗病毒治疗疗效显著,但随着治疗时间的增加,治疗失败的风险也逐渐加大,应及时进行耐药监测,更换治疗方案.同时应加强未治疗人群的检测,加大抗病毒治疗的投入并扩大纳入治疗的范围.

2012年河南省丙型肝炎病毒感染状况及基因型分布调查

目的调查2012年河南省丙型肝炎病毒（HCV）感染状况和基因型分布。方法采用多阶段随机抽样的方法，于2012年3—6月在河南省抽取1～74岁常住人群32203名，对其进行问卷调查，收集一般人口学信息、既往病史以及危险因素的暴露史等。采集5ml静脉血，经ELISA和巢式RT—PCR法分别进行HCV抗体和HCVRNA检测；并对HCVRNA阳性样本进行非结构蛋白5区（NS5B）基因扩增和测序，对所测序列进行系统进化树分析和基因分型；分析不同特征调查对象抗-HCV、HCV—RNA阳性率及HCV基因亚型分布的差异。结果在32203名调查对象中，抗-HCV和HCVRNA阳性率分别为0．48％（153／32203）和0．24％（78／32203），其中男性分别为0．42％（65／15634）和0．23％（36／15634），女性分别为0．53％（88／16569）和0．25％（42／16596），性别间阳性率差异均无统计学意义（χ2值分别为2．26和0．18，P值均〉0．05）。NS5B基因分型与分子进化分析结果显示，在71份HCVRNA阳性样本中，共有6种亚型，分别为1b、6a、3a、2a、3b和1a，所占比例分别为56．3％（40／71）、19．7％（14／71）、11．3％（8／71）、8．5％（6／71）、2．8％（2／71）和1．4％（1／71）；感染者HCV基因亚型主要集中在1b和6a这两个分支上，两种亚型的Bootstrap值均为0．95。结论2012年河南地区HCV流行处于较高水平，基因型亚型以1b和6a型为主。

河南省1922例艾滋病一线抗病毒治疗失败患者中HIV耐药基因突变情况分析

目的分析河南省艾滋病一线抗病毒治疗失败患者中HIV耐药基因突变发生情况。方法利用中国法定传染病监测信息网络直报系统子平台——艾滋病综合防治数据信息管理系统，收集2011年河南省9个地级市中接受一线艾滋病抗病毒治疗〉1年，病毒载量〉1000拷贝／ml的患者的基本信息。删除基本信息缺失（40例）、病例以及耐药检测结果不完整（212例）者，共计1922例艾滋病患者纳入本研究，并对其进行基因型耐药检测。采用多因素非条件logistic回归模型分析含HIV耐药毒株的艾滋病患者发生基因突变的影响因素。结果1922例发生一线抗病毒治疗失败的艾滋病患者中，男性1039例，女性833例，年龄为（45．7±12．1）岁，已婚者占82．73％（1590例），感染途径多为血液传播，占87．93％（1690例）。64．20％（1234例）的患者存在有效的耐药基因突变，核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）、非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）和蛋白酶抑制剂（PI）类药物耐药基因突变的发生率分别为62．59％（1203例），49．74％（956例）和0．94％（18例），同时发生NRTI和NNRTI耐药突变的患者占42．09％（809例）。~ITAM是发生率较高的NRTI耐药基因突变位点，占41．94％（806例），TAM-1和TAM-2的发生率分别是8．48％（163例）和4．24％（81例）。存在K65R／N和Q151M耐药突变复合体患者分别为23和4例。K103N／S是发生率较高的NNRTI耐药基因突变位点，占34．32％（659例）。多因素非条件logistic回归模型分析显示，母婴传播（OR=9．05，95％C1：1．14～72．12）、临床分期为Ⅳ期（OR=I．70，95％CI：1．09～2．66）和治疗5年（OR=I．59，95％CI：1．03—2．47）的患者耐药发生率高；治疗1年（OR=O．19，95％CI：0．13～0．27）的患者耐药发生率低。结论河南省一线抗病毒治疗失败患者的耐药突变多样，模式较复杂，母婴传播、临床分期为Ⅳ期及治疗5年的患者发生耐药基因突变的风险高。

河南省2007-2011年HIV-1流行株及耐药性调查

为观察河南省近年HIV-1流行株的变化及耐药的传播情况，笔者于2007-2011年对当年新确证未治疗的HIV-1感染者或AIDS患者进行连续3次监测，现将结果报告如下。

河南省丙型肝炎流行病学分析

目的了解河南省普通人群丙型肝炎流行状况，探讨联合运用多种实验室检测方法对丙型肝炎诊断的意义。方法采用多阶段随机抽样方法，于2012年4—7月，在河南全省18个省辖市对1—75岁的普通人群进行问卷调查，并采集静脉血标本，采用多种试剂对样本进行丙型肝炎病毒（HCV）检测。结果共调查32203人，河南省1—75岁人群的HCV抗体、HCVRNA标化阳性率分别为0．64％、0．35％；HCV抗体筛查试验1≤S／CO〈3．8和3．8≤S／CO〈10的两组样本蛋白印迹补充试验阳性率差异有统计学意义（χ2=11．23，P〈0．01）；筛查试验1≤S／CO〈10和10≤S／CO〈18．3的2组样本的HCVRNA核酸阳性率差异有统计学意义（χ2=71．84，P〈0．001）。结论河南省属丙型肝炎低流行区，HCV抗体筛查后，须进行补充试验，特别是核酸检测，多种试剂联合检测有助于明确丙型肝炎诊断。

河南省四地区一线艾滋病抗病毒治疗失败的耐药分析

目的了解河南省重点地区艾滋病一线抗病毒治疗失败人群的耐药情况。方法对河南省四个重点地区（商丘、开封、周口和驻马店）2010年6月．2011年11月间病毒载量〉1000拷贝／ml且治疗〉一年以上的成年患者进行基因型耐药检测，分析耐药发生情况及其影响因素。结果本研究对2529例一线抗病毒治疗失败的艾滋病患者进行了分析，其中感染途径为采血浆／输血的患者占92．41％。治疗时间和CD4＋T淋巴细胞与耐药的发生有关。63．35％的患者有耐药的发生，非核苷类逆转录酶抑制剂（NNRTI）、核苷类逆转录酶抑制剂（NRTI）和蛋白酶抑制剂（PI）的耐药发生率分别为60．02％、48．95％和1．46％。患者对依非韦伦（EFV）和奈韦拉平（NVP）的耐药发生率均为60．50％，对拉米夫定（3TC）、齐多夫定（AZT）、司坦夫定（D4T）、去羟肌苷（DDI）和替诺福韦（TDF）的耐药发生率分别为：38．87％、35．31％、36．10％、35．03％和27．52％。结论既往采血浆途径感染的患者仍然是河南省艾滋病一线抗病毒治疗病毒学失败患者的重点人群，及时的病毒学监测和有效的方案调整以及更多治疗方案的提供是必须的。

中国部分地区HIV抗病毒治疗停药患者的耐药研究

目的了解艾滋病病毒(HIV)抗病毒治疗停药患者病毒载量水平和耐药情况。方法对河南、湖南、广西、重庆、四川和云南共6个省份的HIV抗病毒治疗停药患者进行横断面抽样调查,收集调查对象社会人口学、治疗情况等数据,采集血液标本进行病毒载量检测,并对病毒载量≥1 000拷贝/m L的样本进行耐药基因检测。结果共调查467例患者,其中72.2%(337例)患者的病毒载量≥1 000拷贝/mL,测序获得336份序列进行耐药分析,19.3%(65/336)患者检出耐药。对核苷类反转录酶抑制剂、非核苷类反转录酶抑制剂和蛋白酶抑制剂的耐药率分别为4.6%(3/65)、87.8%(57/65)和10.8%(7/65)。未婚患者的耐药率要高于在婚的患者(P=0.003)。随着停药时间的增加,病毒载量≥1 000拷贝/mL的比例在上升,而耐药的比例在下降。结论 HIV抗病毒治疗停药人群病毒载量和耐药率均较高,是HIV病毒包括耐药株传播的重要来源。需对该人群加强预防干预,阻断HIV及耐药株的二代传播。

应用BED-CEIA方法估算河南省2009年多类高危人群HIV-1新近感染率

目的了解河南省2009年三类哨点(男男性行为者、吸毒和性病门诊男性就诊者)和单阳配偶人群的艾滋病病毒(HIV)新近感染情况。方法收集2009年河南省男男性行为者、吸毒和性病门诊男性就诊者及单阳配偶人群各534、1 757、4 767及11 468例,通过酶联免疫和蛋白印迹实验检测出HIV-1感染的样品,再应用BED HIV-1发病捕获酶免疫测定法(BED HIV-1 capture enzyme immunoassay,简称BED-CEIA)检测出其中的新近感染样品,进而估算新近感染率。结果河南省2009年男男性行为者、吸毒和性病门诊男性就诊者哨点的新发感染率分别为4.50%、0.46%和0.13%。单阳配偶人群的新近感染率为0.39%。结论河南省2009年男男性行为人群新发感染率较高,同时不同地区单阳配偶人群的新近感染率有较大差别。

河南省抗HIV治疗效果及耐药变异分析

目的研究河南省人类免疫缺陷病毒/艾滋病(HIV/AIDS)患者应用高效抗逆转录病毒治疗后治疗效果及耐药变异产生情况。方法对采用2种治疗方案的河南省HIV/AIDS患者进行病毒载量、CD4+T淋巴细胞数、耐药变异基因型监测。结果2种治疗方案都在部分HIV/AIDS患者身上取得病毒载量抑制和提升CD4+T淋巴细胞数效果,但用药后均有耐药变异发生,2005年D4T/ddI/NVP、AZT/ddI/NVP高度耐药相关突变率分别为19.7%,16.2%;2006年分别为19.4%,19.5%。结论河南省HIV/AIDS患者应用高效抗逆转录病毒治疗(HAART)治疗基本上取得了预期的疗效,但在应用逆转录酶抑制剂后有耐药变异发生,且多为交叉耐药、多药耐药。所以应用逆转录酶抑制剂时要加强耐药监测,规范管理,及时调查用药以节省有限的药物资源并防止耐药株的产生。

HIV感染病程进展与HLA基因多态性关联性分析

目的分析河南部分地区HIV感染不同疾病进展人群的人类白细胞分化抗原Ⅰ、Ⅱ型分子（HLA—A、B、DRB1）等位基因多态性，探讨HIV感染与HLA位点的关联性，发现HIV感染不同疾病进展人群的HLA位点分布特征。方法本研究收集2016年6月至2017年6月河南尉氏县、上蔡县、西华县、许昌市四地区的48例HIV感染缓慢进展者和80例典型进展者为研究对象，同时以380名健康献血者为对照，采用PCR—SSO流式荧光微珠法对HLA—Ⅰ类（A和B）和Ⅱ类（DRB1）基因进行高分辨率分型检测。比较分析研究对象间HLA等位基因频率分布差异。结果HLA等位基因分布与HIV感染的关联分析显示，HLA—B＊40：02，HLA-DRB1＊04：05显著多见于健康人群，而HLAB＊15：18、B＊44：02、B＊67：01和HLA—DRB1＊14：01均出现HIV／AIDS中。HIV感染不同疾病进展人群比较发现，HLA—A＊02：06、HLA-B＊13：02、B＊40：06在感染缓慢进展组分布高于典型进展组，HLA—B＊46：01仅出现在典型进展组。结论HLA—B＊15：18、B＊44：02、B＊67：01和HLA—DRB1＊14：01位点可能与HIV感染易感性有关。HLA—A＊02：06、HLA—B＊13：02、B＊40：06等位基因可能与延缓本地区HIV感染人群病程有关，而HLA—B＊46：01可能与加速病程相关。

河南省HIV感染长期不进展者及病毒控制者病例特征分析

目的 调查河南省HIV感染者中长期不进展者（LTNP）和病毒控制者（HC）存在情况及其病例特征。方法 利用我国艾滋病综合防治数据信息管理系统和河南省艾滋病检测实验室数据应用平台中的病例信息,及实验室检测结果判定HC和LTNP,并进行调查核实、样本采集和相关检测。结果 148例LTNP和HC中共随访到71例,其中LTNP有58例,HC有22例,同时是LTNP和HC有12例,仅是LTNP有46例,仅是HC有10例;男性50例（70.4%）;≥40岁有55例（77.5%）;均为汉族;职业为农民61例（85.9%）;感染途径为既往有偿供血52例（73.2%）;抗-HCV阳性56例（78.9%）;CD4＋T淋巴细胞计数均值（四分位数）538（445～654） cell/μl,病毒载量的对数均值（四分位数）为3.14（2.03～3.82） log10 copies/ml。HC的病毒载量对数均值低于LTNP（P=0.001）。结论 河南省HIV感染者中LTNP和HC的病例特征显著,更精确的分类有助于下一步研究。

河南省26例HIV感染长期不进展者病程进展及耐药情况

目的分析河南省HIV感染长期不进展人群3次随访过程中病程进展情况及耐药情况。方法于2009年5月，选取河南省艾滋病重点疫情地区尉氏、上蔡、临颍县为研究现场，招募26例经既往采供血途径感染HIV、感染时间〉10年、未接受抗逆转录病毒治疗、CD4^＋T淋巴细胞计数≥350个／μl并未出现艾滋病典型症状的长期不进展者。采用队列分析方法，自2009年开始每两年随访1次，连续随访3次。收集感染途径、感染时间等流行病学信息。每次随访均采集研究对象10ml乙二胺四乙酸抗凝全血，共采集78份。分析2009--2014年期间CD4^＋T淋巴细胞计数、病毒载量、病毒基因的变化情况。采用in．house方法。探讨长期不进展人群的原发耐药状况。采用非参数Kruskal-Wallis检验比较不同随访时间研究对象CD4^＋T淋巴细胞计数和病毒载量变化。结果26例研究对象的年龄为（48．51±6．75）岁，感染时间为（13．42±4．26）年。3次随访中，CD4^＋T淋巴细胞计数的P50（P75～P25）分别为573．5（487．4～789．8）、499．8（403．5～635．7）和418．8（297．6—537．8）个／μl（H=63．99，P〈0．001），病毒载量自然对数的P50（P25-P75）分别为3．93（3．43～4．55）、4．29（3．78～4．75）、4．50（4．01～4．81）（H=3．19，P=0．355）；HIV亚型及系统进化分析显示，感染者以B亚型为主，占88．5％（23／26），3例出现重组变化。18例病毒载量〉1000拷贝／ml的感染者中，有2例出现中高度耐药。结论河南省长期不进展人群CD4^＋T淋巴细胞计数有逐年下降的趋势，少数感染者病毒亚型出现重组变化，同时存在原发耐药现象。

河南省HIV感染长期不进展者随访研究

目的 探讨不同HIV感染长期不进展者（LTNP） HIV相关检测指标的变化特征.方法 招募河南省7个县（区）的HIV感染长期不进展人群,按不同的CD4＋T淋巴细胞水平进行分组.分析2010年7月至2013年8月随访期间LTNP-1组（CD4＋T淋巴细胞≥500个/μl,42例）、LTNP-2组（350个/μl≤CD4＋T淋巴细胞＜500个/μ1,49例）研究对象的免疫状况及病毒载量（VL）的动态变化特征.对随访期间发现艾滋病精英控制者特征进行描述.结果 共招募91例LTNP进行研究,调查对象年龄为38 ～ 65岁,男性和女性分别占56％（51例）和44％（40例）,4年累计随访320人次,期间失访14例,意外死亡2例,抗病毒治疗16例.2010-2013年组内年度纵向分析CD4＋T淋巴细胞、VL指标变化显示,LTNP-1组CD4＋T淋巴细胞分别为654.0（545.2～809.5）、764.5 （600.5 ～ 890.8）、532.5（431.0 ～669.0）、494.0（341.0～574.7）个/μl,LTNP-2组分别为493.0 （429.5 ～ 770.0）、476.5（324.2 ～610.0）、467.0（375.0 ～601.0）、343.5 （253.0～500.8）个/μl,两组CD4＋T淋巴细胞随感染时间逐年下降（x2值分别为50.32、31.03,P值均＜0.01）.2010-2013年LTNP-1组lg（VL）值依次为3.52（3.15 ～4.27）、3.71（2.70 ～4.55）、3.86（3.59 ～4.55）、3.96（3.25 ～4.36）,LTNP-2组lg（VL）值依次为4.35（3.72 ～4.83）、4.35（3.97 ～4.94）、4.71（3.96 ～4.95）、5.04（4.78 ～5.26）,组内差异均无统计学意义（P＞0.05）.同一年度组间比较显示,4次随访LTNP-1组CD4＋T淋巴细胞高于LTNP-2组（Z值分别为5.23、3.06、2.51、2.47,P值均＜0.05）,LTNP-2组lg（VL）从2011年的4.35（3.97 ～4.94）上升至2013年的5.04（4.78 ～5.26）,均高于同年LTNP-1组VL值（Z值分别为2.28、2.58、2.76,P值均＜0.05）.91例LTNP中有65例丙型肝炎病毒（HCV）抗体阳性,LTNP-1组、LTNP-2组HCV抗体阳性率分别是76％（32/42）、67％（33/49）.4年随访过程发现,LTNP-1组有6例精英控制者保持CD4＋T淋巴细胞≥500个/μl,VL＜1 000拷贝/ml.结论 河南省HIV感染LTNP整体健康状况良好,体内病毒复制相对稳定,CD4＋T淋巴细胞有逐年下降的趋势,合并HCV感染率高.