血府逐瘀汤对肺动脉内皮细胞间质转化的影响及机制

目的 研究血府逐瘀汤对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)内皮间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition, EndMT)的影响,并从TGF-β1/Smad信号通路进一步分析其作用机制。方法 采用TGF-β1(5μg·L^(-1))建立EndMT细胞模型。实验分组为正常组,模型组(TGF-β1,5μg·L^(-1)),血府逐瘀汤低、中、高浓度组(3、10、30 mg·L^(-1)XFZYD+5μg·L^(-1)TGF-β1),SB 431542阳性药组(5μmol·L^(-1)SB 431542+5μg·L^(-1)TGF-β1)。观察细胞形态,鬼笔环肽染色观察细胞骨架,免疫荧光法观察内皮细胞标志物-血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)和间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。蛋白免疫印迹法检测血府逐瘀汤对CD31、α-SMA、Snail、p-Smad2、p-Smad1/5蛋白表达的影响。结果 TGF-β1刺激后,细胞形态由鹅卵石形向梭形转变。CD31、p-Smad1/5表达明显减少,α-SMA、p-Smad2、Snail表达则显著升高。血府逐瘀汤干预后,与模型组相比,细胞形态不同程度的接近于正常组,CD31和p-Smad1/5表达呈上升趋势,α-SMA、p-Smad2、Snail表达呈下降趋势。结论 血府逐瘀汤可以减轻大鼠肺微血管内皮细胞发生内皮间质转化,其作用可能是通过影响TGF-β1/Smad信号通路实现的。

中医院校本科生层次递进式开展流式细胞术实验方法课程的实践

目的探索在本科生中开展流式细胞术的实验教学与实践,激发本科生的主观能动性,将学到的理论知识进行拓展应用,以便应用到未来的科研中。方法文章以参与“橘井青苗”计划的本科生为研究对象,层次递进式开展流式细胞术实验方法课程的实践与初探。此实践计划设置了2个递进层次的教学科研一体的实践范例,初阶为小鼠成肌细胞缺氧造模,并通过CCK-8法检测细胞的存活率,进阶为应用流式细胞仪检测小鼠成肌细胞的凋亡情况等。结果本科生在一周时间内全程参与到实践计划中,通过实验设计和实践,学生掌握细胞扩增、细胞存活率检测、细胞凋亡检测与数据分析,提高了学生的动手能力和创新能力,调查问卷课程满意度达到95%以上。结论层次递进式开展流式细胞术实验方法课程适合本科生,这种融合科研创新思路、课题设计与执行能力的教学培养方法,能带动学生在实验研究中进行科学规划和使用大型仪器。

强骨抗萎膏通过调控MFN2及抑制内质网应激改善失重状态下大鼠骨丢失

目的观察强骨抗萎膏对尾吊大鼠骨细胞凋亡和内质网应激的影响,探讨强骨抗萎膏防治模拟失重状态下骨丢失的机制。方法60只SD大鼠分为对照组、模拟失重组、强骨抗萎膏组、阿仑膦酸钠组,骨疏康颗粒组,每组12只。采用尾部悬吊模拟失重状态,尾吊28 d;对照组和模拟失重组给予每日等体积生理盐水灌胃,其它3组复制模型,分别每日给予中药强骨抗萎膏2.4 g/kg,阿仑膦酸钠0.007 g/kg,骨疏康颗粒0.26 g/kg灌胃。持续给药4周后处死大鼠,TUNEL法检测骨细胞凋亡情况;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和线粒体融合蛋白2(MFN2)表达,RT-PCR和Western blot检测骨组织中蛋白激酶R样内质网激酶(PERK),肌醇依赖性激酶1α(IRE1α)、活化转录因子6(ATF6)及C/EBP同源蛋白(CHOP)的基因和蛋白表达。结果TUNEL结果显示模拟失重组骨细胞凋亡较对照组增加,强骨抗萎膏可抑制骨细胞凋亡。与对照组大鼠比较,模拟失重组PERK基因表达量明显增高(P<0.05),强骨抗萎膏组较模拟失重组PERK基因表达量下降(P<0.05);与对照组比较,模拟失重组的GRP78、PERK、CHOP和ATF6蛋白含量明显增高(P<0.05),MFN2蛋白表达降低(P<0.05),强骨抗萎膏组较模拟失重组GRP78、PERK、CHOP和ATF6蛋白含量均明显降低(P<0.05),MFN2表达量升高。结论强骨抗萎膏可以改善模拟失重大鼠骨细胞凋亡,通过抑制骨组织内质网应激相关因子GRP78、PERK、ATF6和CHOP,上调MFN2表达,从而改善失重条件下的骨丢失。

医学院校机能学混合式实验教学模式的探索

机能学是医学院校的核心基础课程,属于实验性科学。目前的实验教学模式趋向于多元化,经查阅文献,案例式教学(CBL)结合问题式教学(PBL)法,云板书和翻转课堂结合教学法,基于虚拟仿真平台的微课结合翻转课堂教学法和“互联网+”混合式教学法4种实验教学模式,有效地将理论与实践相结合,对培养学生的实验能力、科研能力、临床思维及综合素养具有明显的效果。文章从专业特点、实验重点及不同实验教学的方法来探讨如何提高机能学实验教学。

在形态学实验教学中开展数字切片的文献研究

目的基于文献分析在形态学实验教学中开展数字切片的情况。方法以篇名“形态学”“切片”和主题“实验”“教学”为检索式,精确检索中国知网学术文献总库。检索时间:2008年1月1日—2021年2月28日。从发表年代、院校、文献来源、基金、研究内容等方面,对这些检索结果进行统计分析。结果共检出23篇文献,去除不符合标准的文献3篇,获得有效统计文献20篇,均为学术期刊。其中2011年—2014年和2018年—2020年文献数量较多,平均为2.00篇/年和2.67篇/年;开展数字切片的双一流院校有9所,占比45.00%(9/20),普通本科院校有11所,占比55.00%(11/20);文献来源中核心期刊发文量与普通期刊发文量基本持平;70.00%(14/20)的文献研究有基金支持,主要是校级和省、部级的基金;研究内容主要从教学研究和教学改革方面展开。结论数字切片在形态学实验教学工作中发挥着重要作用。此次数字切片的文献研究数量相对较少,文献研究广度有待提升,后续将展开更深入的研究。

中医药院校青年实验技术人员核心素养探究

做好“健康中国2030”背景下青年实验技术队伍核心素养的培养工作,是“十四五”规划期间中医药院校实验队伍建设的重要任务。此文结合北京中医药大学实验教学中心实际情况探讨了中医药院校青年实验技术队伍核心素养的现状,从文献检索统计的角度进行了必要性分析,并就如何提升核心素养提出几点要努力的方向,以期助力中医药院校青年实验技术队伍核心素养的整体提升。

基于外泌蛋白质组的酿酒酵母信号肽元件的分析及鉴定

目的分析鉴定酿酒酵母细胞内源性地促进重组蛋白外泌表达的信号肽元件,并应用于重组蛋白的高效合成。方法利用生物信息学软件SignalP4.1、Phobius、Wolf Psort0.2和ProP1.0对已报道的酿酒酵母外泌蛋白质组所对应的信号肽进行计算分析,确定目标信号肽功能元件;再构建融合表达载体,转化酵母细胞,对获得的阳性克隆在摇瓶培养条件下外泌蛋白的表达进行测定验证。结果通过生物信息学分析,从酿酒酵母外泌蛋白质组中确定了16个含有prepro区的信号肽功能元件,以敲除外切β-(1,3)-葡聚糖酶1(EXG1)基因的酿酒酵母W303-1b/(35)ES为宿主菌,采用酵母α-交配因子的信号肽功能元件作为对照,由EXG1的信号肽功能元件引导外泌的融合蛋白活性是α-交配因子的3倍。结论组合外泌蛋白质组和生物信息学分析的研究策略可以快速准确地分离鉴定促进异源蛋白分泌表达的信号肽功能元件,可应用于生物活性蛋白的高效表达。

酵母UDP-葡萄糖合成途径的优化及黄酮葡萄糖苷的合成

目的研究在酿酒酵母细胞内高表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶对工程酵母细胞的葡萄糖苷化反应活性的影响。方法利用PCR方法获得大肠杆菌磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Gal U)基因,构建整合型表达载体,转化酵母;同时共表达具有催化黄酮葡萄糖苷化的UDP-葡萄糖转移酶,研究摇瓶培养条件下PGM和Gal U基因的表达对工程细胞生物催化黄酮类化合物葡萄糖苷化的影响。结果在酵母细胞内表达大肠杆菌UDP-葡萄糖合成途径的2个关键酶PGM和Gal U,提高了组合表达UDP-葡萄糖转移酶的工程菌生物催化合成野黄芩素-7-O-葡萄糖苷的效率,表明PGM和Gal U基因的高表达能促进UDP-葡萄糖的合成;所构建的工程菌也能催化木犀草素、柚皮素、白杨素、汉黄芩素、木蝴蝶素A、黄芩素、槲皮素以及大豆黄酮等黄酮类化合物的葡萄糖苷化。结论组合表达大肠杆菌PGM和Gal U基因能促进酵母细胞内UDP-葡萄糖的合成,进而提高了工程细胞催化合成黄酮葡萄糖苷的效率。

黄土湿陷性对西白地裂缝的影响

渭河盆地位于黄土高原南部,该盆地广泛分布黄土,到2017年已发现252次裂缝。以西白村地裂缝为例,通过钻探和槽探等一系列地质调查,查明了西白地裂缝的平面展布特征和剖面结构特征;通过黄土湿陷实验分析了由黄土湿陷性对地裂缝所造成的影响,并推测了西白地裂缝的成因发展过程,得出了西白地裂缝的产生是由于污水坑的侧向渗漏和黄土的湿陷性所造成的地面不均匀沉降所造成的。研究揭示了黄土湿陷性地裂缝的发育特征,探讨了其成因机理,为黄土地区地裂缝的防治提供了理论指导。

母婴分离产后抑郁大鼠脑内5-羟色胺及其代谢产物的变化及参芪解郁方的干预作用

目的:观察母婴分离产后抑郁大鼠前额叶皮质和海马5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的含量,探讨不同剂量参芪解郁方的干预作用。方法:60只SD孕鼠,随机分为正常组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组和西药组,采用母婴分离法制备产后抑郁大鼠,灌胃两周后检测各组大鼠前额叶皮质、海马5-HT及其代谢产物5-HIAA含量。结果:模型组强迫游泳不动时间较正常组显著增加(P<0.01),蔗糖水消耗量、旷场实验水平得分和垂直得分均较正常组显著降低(P<0.01)。中药高、中、低剂量组和西药组强迫游泳不动时间较模型组显著降低(P<0.01);中药高、中、低剂量组和西药组蔗糖水消耗量、旷场实验水平得分较模型组均显著升高(P<0.01,P<0.05);中药高、中剂量组和西药组旷场实验垂直得分较模型组均显著升高(P<0.01)。模型组前额叶皮质、海马5-HT及其代谢产物5-HIAA含量较正常组均显著降低(P<0.01)。中药高、中、低剂量组和西药组前额叶皮质、海马5-HT及其代谢产物5-HIAA含量较模型组均升高(P<0.01,P<0.05)。结论:参芪解郁方通过调节产后抑郁大鼠单胺类神经递质及其代谢产物水平发挥抗抑郁作用。

天然阿洛糖苷的研究进展

天然糖苷类化合物的药理活性与不同糖基之间有着密切的关系,通过糖基化可以改变整个糖苷分子的构象,提高其水溶性,增强其生物活性,甚至改变其药代特性和药理作用机制等。与生物体内常见的D-葡萄糖相比,D-阿洛糖是D-葡萄糖的C-3差向异构体,单糖本身就是一种低能量、不被消化的安全无毒的食糖替代品,已在膳食、保健、医药等领域发挥着重要的生理功能。但自然界中D-阿洛糖绝大部分以稀有的糖苷形式存在,与常见的糖苷如葡萄糖苷、鼠李糖苷等一样,也具有广泛的生物活性。本文主要简述从植物中分离鉴定的不同类型的阿洛糖苷类化合物,还基于文献对其抗肿瘤、抗糖尿病等多种药理活性及其不同糖基取代的构效关系进行综合分析,为基于糖苷类化合物的新药发现和药物设计提供研究思路。