人G-CSF基因组基因的克隆和序列测定

用 PCR方法 ,以提取的正常中国人染色体 DNA为模板 ,成功地扩增出 1 .5kb的人G- CSF基因组基因。将其克隆至 p UC1 9,构建成重组质粒 p GG- 2。在酶切证实正确的基础上 ,将其酶切成三个片段进行了亚克隆。利用 p UC1 9的正反通用引物进行序列分析。自动测序结果表明其编码区的序列是正确的。

利用PCR方法从人染色体DNA中扩增G-CSF基因的研究

以正常中国人脐带血提取的基因组ＤＮＡ为模板，采用ＰＣＲ方法扩增人Ｇ－ＣＳＦ基因组基因．通过优化和筛选扩增条件，使用不同的ＤＮＡ聚合酶，采用碱变性模板和热启动等方法，成功地获得了１．５ｋｂ的Ｇ－ＣＳＦ基因．

转基因动物的生产效率及乳腺定位表达重组蛋白质

本文综述了转基因动物的生产效率及外源基因在转基因动物乳腺表达和纯化的研究进展。讨论了转基因大动物建立的费用以及现有的技术 ,阐述了转基因表达及产物纯化方面存在的优势及问题 。

通过转基因小鼠生产肿瘤治疗药物G-CSF的研究

粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＧＳＦ）对中性粒细胞减少症的治疗有良好的作用，对于肿瘤治疗有重要意义．利用小鼠ＷＡＰ基因的调控序列指导人Ｇ－ＣＳＦ基因所构建的融合基因，注射小鼠受精卵，获得了乳腺表达Ｇ－ＣＳＦ的转基因小鼠，为大规模生产提供了资料和方法．

β-半乳糖苷酶基因在小鼠乳腺细胞表达的研究

构建了以乳清酸蛋白（ＷＡＰ）５′区２．６ｋｂ为调控序列，指导β－半乳糖苷酶基因的真核表达质粒，采用直接注射质粒于乳腺的方法在小鼠乳腺中表达出β－半乳糖苷酶活性，证实ＷＡＰ基因调控序列的功能正确性，可以用于转基因动物乳腺表达研究，同时证实该方法可以作为一种暂时性表达载体的验证方法．