亚慢性镉中毒致鸡肝细胞凋亡及硒拮抗效果的研究

以90 只100 日龄依沙褐公鸡为试验动物,在日粮中添加一定浓度的镉及硒镉,复制了鸡的亚慢性镉中毒及硒拮抗模型,通过显微结构和超微结构观察,探讨镉对动物肝的毒性作用机理及硒对其毒性作用的拮抗效应。结果显示,亚慢性镉中毒可引起鸡肝组织细胞凋亡,加硒后可有效减少肝细胞凋亡数量及损伤程度。

镉中毒对鸡体内GSH-Px、SOD的影响及硒颉颃效应的研究

选用90只100日龄依沙褐公鸡,随机平均分为3组,对照组饲喂基础日粮,加镉组饲喂基础日粮+CdCl2150 mg/kg,加硒镉组饲喂基础日粮+CdCl2150 mg/kg+Na2SeO322 mg/kg,通过在日粮中添加一定剂量的镉或硒与镉,建立亚慢性镉中毒及硒颉颃模型;亚慢性镉中毒可致鸡体内血清和肝脏谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性降低,构成了镉损伤肝脏的病理学基础。加硒后可有效地提高机体的抗氧化能力。

鸡亚慢性镉中毒及硒颉颃效应的肝脏亚微结构变化

为深入探讨镉致动物肝毒性的机制及硒颉颃效应,选用90只100日龄伊沙褐公鸡随机分为3组,通过在日粮中添加一定剂量的镉及硒与镉,建立亚慢性镉中毒或硒颉颃模型;用透射电镜观察亚慢性镉中毒及硒颉颃鸡肝脏的亚微结构变化。证实亚慢性镉中毒可引起鸡肝脏细胞的损伤,造成线粒体、溶酶体等细胞器受损;出现大片细胞萎缩、坏死、凋亡。结果表明,硒能有效地降低镉对细胞器的损伤,减少细胞凋亡数量。

猪肉β-受体激动剂UPLC-MS/MS检测方法建立与应用

建立超高效液相色谱串联质谱法（UPLC—MS／MS）检测猪肉中溴布特罗、西布特罗、西马特罗、克伦特罗等13种β-受体激动剂残留方法。选用盐酸葡萄糖醛苷酶／芳基硫酸酯酶水解，混合型阳离子交换固相萃取净化，以0．1％甲酸水溶液-0．1％甲酸乙腈溶液-甲醇为流动相，超高效液相色谱串联质谱法检测，在0．3、1．0、10ng·mL^-1浓度添加水平，空白肌肉组织中13种药物添加平均回收率范围68．3％-97．2％，日内变异系数范围6．6％～16．9％，日间变异系数范围8．8％～23.3％。该方法检测限为0．1ng·mL^-1，定量限为0．3ng·mL^-1，具有准确敏感特性。在黑龙江省采集202份猪肉样品验证检测13种β-受体激动剂，样品均未检出残留物。

亚慢性镉致鸡肝脏酶组织化学变化的影响及硒颉颃效果的研究

通过酶组化法检测,证明镉能影响鸡肝脏组织中酶的活性,即SDH、ALP、M g2+-ATPase、G-6-Pase、C a2+-ATPase活性降低和ACP活性升高,导致肝脏组织损伤。硒可不同程度地减轻这些损伤作用。

亚慢性镉中毒对鸡体内NO代谢影响及硒颉颃效应的研究

亚慢性镉中毒可致鸡血清和肝脏组织匀浆中一氧化氮合酶(NO S)活性及一氧化氮(NO)含量升高,构成了亚慢性镉中毒损伤肝脏的病理学基础。补硒后提高机体的抗氧化能力。

中俄边境地区野生候鸟禽流感的流行病学调查

为了建立中俄边境地区禽流感监测和防控体系,2009—2010年,在黑龙江中俄边境地区进行野生候鸟禽流感流行病学调查。分别于黑河、逊克、抚远、密山、虎林、俄罗斯阿穆尔州6个中俄边境地区采集野鸭、鸳鸯等19个品种的候鸟咽喉拭子、泄殖腔拭子、粪便、血清等样品2 029份,应用鸡胚传代病毒分离试验、RT-PCR试验、ELISA试验对样品进行禽流感病毒感染情况调查。结果表明:共检出17份禽流感抗体阳性样品,12份禽流感病毒阳性样品,病毒阳性样品经国家禽流感参考实验室鉴定为H3N8型低致病力禽流感病毒。说明候鸟是低致病力禽流感病毒的携带者,要高度重视禽流感病毒通过候鸟传播问题。

利用套式PCR检测牛羊乏质体

为同时检测和鉴定牛边缘乏质体、中央乏质体及绵羊乏质体,根据这3种病原体的msp4基因核苷酸序列,自行设计、合成了针对3种乏质体的2对通用引物,及分别针对三者的特异引物,通过PCR条件优化,建立了检测乏质体及分别鉴定3种乏质体的套式PCR方法,并与OIE推荐的msp5半套式PCR比较。结果显示:该方法对牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫、伊氏锥虫均未扩增出特异性片段。套式PCR检测乏质体DNA量为0.2pg(相当于6个感染红细胞)。检测1 119份来自6个不同地区的奶牛、肉牛、水牛及羊的临床样品,阳性106份,经鉴定边缘乏质体46份,中央乏质体15份,绵羊乏质体35份,混合感染中央乏质体和绵羊乏质体4份,混合感染边缘乏质体和绵羊乏质体3份,混合感染边缘乏质体和中央乏质体3份。首次在分子生物学水平证明中央乏质体存在于中国。同时,证明牛可以混合感染边缘乏质体和中央乏质体或绵羊乏质体,以及混合感染中央乏质体和绵羊乏质体。上述848份样品用OIE推荐的msp5半套式PCR同时检测,两者符合率为98.5%(835/848)。检测结果表明,msp4套式PCR特异、敏感,可用于边缘乏质体、中央乏质体、绵羊乏质体的检测和鉴定。

亚慢性镉中毒对鸡体 MDA 含量影响及硒颉颃效应的研究

镉是环境中广泛存在的有毒金属元素之一,1974年联合国环境规划署(UNEP)建议将镉作为食物的检测项目,1984年UNEP/WHO把镉列为近年研究的重点之一,同年UNEP提出具有全球意义的12种危险化学物中,镉被列为首位.这充分说明镉已经成为威胁动物和人类健康的重要环境污染物,并且在世界范围内得到了广泛的研究和重视.试验以鸡为试验对象,研究亚慢性镉对鸡体内丙二醛(MDA)代谢的影响及硒颉颃效应,进一步揭示镉致动物肝毒理的机制.

实时荧光PCR检测牛边缘无浆体方法的建立及应用

根据牛边缘无浆体表面蛋白4的保守基因序列设计特异引物AMOC9/AMOC5、AMOC10/AMOC12和特异性探针MP,首次建立了牛边缘无浆体的实时荧光PCR检测方法,检测DNA的最低限度为200 fg。对中央无浆体、绵羊无浆体、牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊莫氏巴贝斯虫、山羊泰勒虫、温氏附红细胞体、东方巴贝斯虫、刚地弓形虫和伊氏锥虫进行检测,无荧光检测信号。本研究用所建立的方法检测采自江苏和哈尔滨的180份抗凝血(奶牛和肉牛),其阳性率为8.9%。结果表明,建立的实时荧光PCR检测牛边缘无浆体的方法具有较高的特异性和敏感性,可用于牛边缘无浆体病的流行病学调查、检疫和监测。

旋毛虫实时荧光PCR检测方法的建立与应用研究

根据旋毛虫隔离种线粒体Ls-rRNA基因序列,设计一对特异性引物及TaqMan MGB探针。以Ls-rRNA阳性重组质粒为模板,建立了旋毛虫实时荧光PCR检测方法。该检测方法对各旋毛虫隔离种具有良好的特异性,而对小鼠、狗和猪正常肌肉组织、猪鞭虫、猪蛔虫、猪钩虫、犬蛔虫等无交叉反应。最小检出量为1.32×102拷贝(10-5条旋毛虫),建立的标准曲线拟合良好,扩增方程Y=-3.43X+19.70,相关系数R2=0.9984,扩增效率为95%。平行检测组内变异系数为1.11%(n=20),同一组不同浓度梯度样本(n=9)间隔30d重复检测,结果无显著性差异。人工感染不同剂量猪旋毛虫的小鼠,在攻虫14d后检出率100%。对经压片镜检、人工胃液消化、胶体金试纸条检测结果为阴性的63份送检狗肉样本中敏感地检出8个阳性。

应用改进消化法检测冷冻猪肉中旋毛虫

为建立检测冷冻猪肉中旋毛虫的快速检验方法，分别改变消化法的绞碎方法、消化液浓度、消化液温度、消化时间、沉淀时间、漂洗方法等诸因素，观察其对旋毛虫检出率的影响。结果：绞碎８０００ｒ／ｍｉｎ３ｓ，反复３次；浓度１：４０；温度４０℃±０．５℃，时间３０ｍｉｎ；沉淀２０ｍｉｎ；离心漂洗，反复漂洗至液体澄清为最佳方法。改进消化法检测－２１℃９０ｄ冷冻猪肉中旋毛虫与镜检法比较，检出率最高可达１００％。结果表明，改进消化法适用于冷冻猪肉中旋毛虫检测。

应用间接ELISA和AGID检测雏鸡血清与卵黄中禽流感母源抗体的研究

作者对来自3个养鸡场父母代种鸡进行过禽流感H5亚型灭活苗紧急免疫接种的3批次共251只1日龄雏鸡,应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)与琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)进行了血清与卵黄中禽流感母源抗体符合性的比较试验。试验结果表明:应用ELISA法检测1日龄雏鸡卵黄中禽流感母源抗体快速、简易、准确、敏感、检出率高,适用于口岸检疫、国内引种检疫及疫情监测等方面。

禽白血病净化措施的研究——禽白血病卵清琼脂扩散试验的研制(Ⅱ)

本试验选取2批计746只试验鸡,累计对应采取其卵样和羽样1102只次,进行了禽白血病(Avian Leukosis AL)卵清琼脂扩散试验的研制工作。试验证明此法与羽髓琼扩法的阳性符合率较高,检出率的差异不显著(P>0.05),表明其敏感性与羽髓琼扩试验是相近的。通过对3份AL卵清样品检查出禽白血病C型肿瘤病毒粒子,从而证实AL卵清琼扩试验的特异性。试验结果,表明pH8.6的BBS稀释琼脂制板效果优于0.01MpH7.4的PBS。

应用琼脂凝胶免疫扩散试验检测雏鸡卵黄和血清中的禽流感母源抗体

作者对来自3个养鸡场的父母代种鸡进行过禽流感H5型灭活苗紧急免疫接种的3批次共251只1日龄雏鸡应用琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)进行了血清与卵黄中禽流感母源抗体符合率的比较试验。试验结果表明:应用AGID检测1日龄雏鸡卵黄中禽流感母源抗体快速、简易、准确、敏感、检出率高,适用于口岸检疫、国内引种检疫及疫情监测等方面。

应用改进消化法检测冷冻猪肉中旋毛虫

为建立检测冷冻猪内中旋毛虫的快速检验方法,分别改变消化法的绞碎方法、消化液浓度、消化液温度、消化时间、沉淀时间、漂洗方法等因素,观察其对旋毛虫检出率的影响.认为最佳方法是:纹碎8000r·min-1,3s,反复三次;浓度1:40;温度（40±0.5）℃;时间30min;沉淀20min;离心深洗,反复漂洗至液体澄清.用此改进消化法检测—21℃90d 冷冻猪肉中旋毛虫与镜检法对照,检出率最高可达100%.改进消化法适用于冷冻猪内中旋毛虫检测.

用卵黄代替血清净化鸡白痢病的应用试验

目前,国内外均用平板凝集试验(AGGP)检测血清中抗体净化鸡白痢病。国内亦有用琼扩试验(AGP)检验鸡白痢病的报导,但用卵黄代替血清进行鸡白痢病净化检疫的研究未见报导。从《鸡白痢病诊断方法特异性及敏感性的研究Ⅱ血清和卵黄平板法琼扩法及卵黄平板法与琼扩法符合率比较试验》(《黑龙江畜牧兽医》

禽白血病净化措施的研究 Ⅲ.禽白血病阳性鸡羽卵样中gs抗原消长情况的监测

本试验对禽白血病羽卵法阳性鸡的对应羽卵样中抗 gs 原消长情况进行监测,结果表明5.5月龄为1至4次取样或卵样及1次兼取两种试样的最佳月龄。

琼扩法测定雏鸡卵黄中病毒性关节炎和鸡白痢母源抗体

鸡病毒性关节炎和鸡白痢均是进口日龄雏鸡的检疫对象。检测7和21日龄鸡血清中抗体是检疫的规定。这两种病都能垂直传播,母源抗体也可经卵黄传递给子代。关于这两种病的日龄雏鸡血清与卵黄中的母源抗体符合情况的研究尚未见报道。为便利用进口雏鸡死雏的未被吸收的卵黄检测这两种病。

我国与俄白哈海关联盟肉类生产加工要求对比

《海关联盟肉及肉制品安全性技术法规》(CU TR 034/2013)(简称"法规")是欧亚经委会2013年10月9日发布的68号决议,2014年5月1日起正式实施,适用于在海关联盟境内流通的肉类及其制品。法规规定了肉类在生产加工、储藏运输、销售和使用过程中的卫生要求,同时也对产品标签和包装做出了要求。我国与俄白哈海关联盟肉类生产加工要求略有不同,但能够达到与俄罗斯等效的安全卫生水平。虽然现在中俄肉类贸易已经开启,但仍需加强对俄方相关法规和标准的研究,查找异同点,完善我国肉类加工处理、储藏和包装等过程中的程序,以保障我国肉类对俄罗斯出口的稳定发展。