内蒙古地区牛病毒性腹泻－粘膜病流行病学调查

采用微量细胞中和试验，对呼和浩特市、包头市、巴盟和伊盟地区部分牛场及旗县进行了牛病毒性腹泻－粘膜病血清抗体检测。共测２１６份血清，阳性１３５份，阳性率６２．５％，个别牛场阳性率高达１００％，证明内蒙古西部地区普遍存在本病。

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究Ⅰ.免疫激发复合物型(ISCOM)亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白（ＯＭＰ）.作为抗原，制备免疫激发复合物型（Immunostimulating Complex,ISOOM）亚单位疫苗。ISCOM型OMP亚单位疫苗在透射电镜下可见笼型颗粒结构，直径为６０ｎｍ～１２０ｎｍ。无菌性检测结果为无菌，具有可靠的安全性。对３周龄雏鸡肌注接种，６周龄攻毒，接种８０μｇＯＭＰ／只１ＳＣＯＭ型亚单位疫苗的雏鸡对鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。

牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离鉴定 Ⅰ.病毒分离培养、理化特性测定、中和试验

用牛睾丸细胞,从呼和浩特市某奶牛场病牛脾脏中分离出1株病毒,并对其细胞培养特性、形态特征、核酸类型和对某些理化因素的敏感性进行了观察和检测,均与BVD—MDV一致,进一步用标准BVD—MDV Oregon C_(24)V阳性血清对分离病毒进行中和试验,结果为阳性。表明该病毒为BVD—MDV。

内蒙古地区鸡沙门氏菌病流行病学调查

对内蒙古呼和浩特、包头、集宁、丰镇、东胜、临河、赤峰、通辽 8个地区的 27个养鸡场随机采取血清样品共 12 824份，采用平板凝集试验，进行鸡白痢、鸡伤寒抗体检测。结果表明，父母代蛋种鸡平均阳性率为 20.66％，最高达 46.25％，最低为 1.33％；商品蛋鸡平均阳性率为 47％，最高达 70％，最低为 32.5％；父母代肉种鸡平均阳性率为 12.66％，最高达 38％，最低为 1.08％；商品肉鸡平均阳性率为 72.9％，最高达 92.5％，最低为 51.67％。

鸡新城疫病毒B_(95)株免疫研究

本试验采用鸡胚增殖培养鸡新城疫B95 株病毒。经对培养的尿囊液病毒价达EID50 107.75。无菌性检验和安全性检验均符合疫苗要求 ,将其选作试验用疫苗进行了试验。结果表明 ,该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为105.75,拌料免疫最小剂量为106.75。以B95 株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡 ,在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力 ,免疫期可达4个月。同居接触免疫鸡能获得了良好的免疫效果 ,攻毒总保护率与滴鼻点眼免疫差异不显著。拌料免疫效果良好 ,与NDV滴鼻点眼免疫差异不显著。B95 株苗在0～4℃条件下保存4个月 ,免疫攻毒保护率达80% ;在室温下保存2个月 ,免疫攻毒保护率达100%。

内蒙地区兔病毒性出血症病毒分离鉴定

从内蒙古武川县分离出2株兔出血症病毒 ,分别命名为RHD -NW1毒株和RHD -NW2毒株 ,对其进行了形态、理化及生物学特性研究。结果表明 ,2株病毒在兔体连续传4代均出现典型兔病毒性出血症症状和病理变化 ,是毒力稳定的强毒株。病毒粒子在电镜下呈球形 ,直径30nm左右 ,无囊膜 ,有实心和空心2种病毒粒子。2株病毒对热 (56℃60min)、酸 (pH3)、乙醚和胰蛋白酶不敏感 ,对人的O、B型红细胞有高度凝集性。

内蒙古地区鸡沙门氏菌病流行病学调查

对内蒙古呼和浩特、包头、集宁、丰镇、东胜、临河、赤峰、通辽8个地区的27个养殖场随机采取血清样品共12824份,采用平板凝集试验,进行鸡白痢、鸡伤寒抗体检测。结果表明:父母代蛋种鸡平均阳性率为20.66%,最高达46.25%,最低为1.33%;商品蛋鸡平均阳性率为47%,最高达70%,最低为32.5%;父母代肉种鸡平均阳性率为12.66%,最高达38%,最低为1.08%;商品肉种鸡平均阳性率为72.9%,最高达92.5%,最低为51.67%。

新城疫病毒B_(95)株的RT-PCR检测

根据文献发表的 F基因序列 ,设计了 1对新城疫病毒 B95株的特异引物 NDV- P1 / P2 ,探讨了以其进行 RT- PCR检测的可行性。结果证明 ,用该引物可以扩增出 1条 310 bp的特异核酸带 ,敏感性为 0 .0 0 4 3mg/ L。

鸡胚免疫接种的研究近况和展望

鸡胚免疫接种是从八十年代开始发展起来的一种新型免疫接种技术.国内外学者进行了鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、鸡新城疫和鸡传染性支气管炎的鸡胚免疫研究.结果表明,鸡胚免疫能够使雏鸡产生主动免疫力,甚至提前获得免疫力.只要疫苗种类和剂量、鸡胚日龄和接种途径合适,鸡胚免疫不影响出雏率和健雏率.这种接种技术便于实现机械化、自动化操作,具有广阔的应用前景.

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究——Ⅱ油乳剂型(OE)亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白，作为抗原，制备油乳剂型（Ｏｉｌ Ｅｍｕｌｓｉｏｎ ＯＥ） 亚单位疫苗。该亚单位疫苗为油包水（Ｗ／Ｏ）型，稳定性良好，安全可靠。对３周龄雏鸡用该疫苗肌注接种，６周龄攻毒，结果表明，接种 ８００ｕｇ ＯＭＰ／只油乳剂型亚单位疫苗的雏鸡对鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。

鸡新城疫病毒B_(95)株的RT-PCR检测方法研究

本试验设计了一对B95 株的特异引物NDV -P1/P2,探讨了对其进行RT-PCR检测的可行性。结果证明 ,用该引物可以扩增出一条310bp的特异核酸带 ,敏感性为0.0043ng/ul。

兔病毒性出血症灭活疫苗的研究

以三株本室分离的病毒作为种毒 ,研制了兔病毒性出血症油乳剂灭活疫苗和氢氧化铝灭活疫苗。所研制的两种疫苗无菌及理化检验均合格。将疫苗大剂量接种实验兔无任何不良反应 ,两种疫苗免疫实验兔后用强毒攻击 ,均获得保护 ,免疫持续期至少5个月。

鸡传染性法氏囊病琼脂扩散试验抗原及阳性血清的研制

采用鸡传染性法氏囊病内蒙地方毒株研制琼脂扩散试验抗原及阳性血清,并对其进行了特异性、敏感性及效价测定,效果均好。

鸡传染性法氏囊病三价弱毒细胞苗免疫效果观察

用本教研室研制的鸡传染性法氏囊病三价弱毒细胞苗和二价弱毒细胞苗免疫易感雏鸡,于16和26日龄进行两次接种,于36日龄时用鸡传染性法氏囊病强毒呼市地区分离株攻击,隔离观察7天。结果表明,三价苗免疫组可完全抵抗地方强毒株的攻击,鸡群生长发育良好,无一死亡;二价苗免疫组约50%可抵抗地方强毒株的攻击,约50%发病,死亡率18.9%,空白对照组所有鸡都发病,且病状明显,死亡率达35.8%。

一大型肉鸡场鸡新城疫的确诊及病因分析

天津市某大型肉鸡场年饲养 AA 肉仔鸡约300万只,每批鸡均进行鸡新城疫、传染性法氏囊病、传染性支气管炎的免疫接种。鸡新城疫的免疫程序是,4～7日龄用 Clone30弱毒疫苗首免(滴鼻),10天后再用 Clone30加强免疫,有时10天后还进行三免。1996年初。

鸡新城疫病毒分离株细胞培养特性的研究

该试验对实验室保存的已适应于鸡胚的鸡新城疫病毒(NDV)分离株进行了鸡胚成纤维细胞(CEF)和仓鼠肾传代细胞(BHK21)的接种传代,同时利用96孔微量多孔板培养BHK21细胞单层,并在其上测定NDV分离株的细胞半数感染量(TCID50)。结果表明:NDV分离株在CEF和BHK21细胞上引起典型的细胞病变,细胞变圆、聚集、脱落,残留的细胞呈拉网状结构。NDV分离株在BHK21细胞上的TCID50为0.02mL10-6.75稀释的病毒液。

H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究

对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型SIV的HAI蛋白在 10、11、2 3、87、2 87位都存在高度保守的糖基化位点 ,此外 ,在 2 76位多了一个“_NTT_”糖基化位点 ,与参考毒株SW /IW / 93/ 0 1一致 ,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征。本研究进一步发现 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G ,具有非高致病力毒株分子特征 ;而其受体结合位点在HA蛋白上第 2 2 6位是Q ,第 2 2 8位是G ,可能具有感染禽的潜力。经同源性比较 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/ 4 75 4 / 94的同源性相对最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到 95 7%～ 96 1%和96 5 %～ 97 2 %。由同源性比较结果和进化树分析可见 。

动物传染病高新诊断及检测技术

自第二次世界大战结束以来,人类社会进入相对稳定发展的和平时期,科学技术得到了充分发展。其中,生命科学是最活跃的学科之一。动物传染病学作为生命科学的重要分支,当然会受到人们的重视,诊断和检测技术研究的进展优为突出。自80年代以来,在免疫学诊断技术不断成熟精化的同时,人们把注意力又集中到了核酸的检测和分析上,从生命的本质进行传染病的诊断和病原微生物的鉴别。

杆状病毒表达SARS冠状病毒纤突蛋白及其抗原性分析

本研究构建了SARS冠状病毒纤突蛋白(S)重组杆状病毒(rBac-SS)。SDS-PAGE及Western-Blot分析表明约190 Ku左右的重组SARS纤突蛋白(rSS)在rBac-SS感染sf9昆虫细胞获得表达,并具有特异免疫反应原性。以rBac-SS感染的昆虫细胞裂解物稀释后直接包被ELISA板,与Vero细胞培养的全病毒裂解物比较,检测SARS-CoV康复病人血清特异抗体,表现出同样的敏感性和特异性;rBac-SS感染的昆虫细胞用于间接免疫荧光,快速检测血清特异抗体反应,具有良好的敏感性和特异性。结果显示,杆状病毒表达的rSS有望替代SARS-CoV全病毒,作为安全、敏感和特异的重组诊断抗原,并为探索重组亚单位疫苗的可行性奠定基础。