广东沿海地区拟穴青蟹呼肠孤病毒和双顺反子病毒-1的分子流行病学调查

运用双重巢式PCR方法于2014年10月和11月份对广东省阳江市、台山市、中山市、惠州市(大亚湾地区、惠东地区)、汕尾市(东涌地区、红海湾地区)等主要拟穴青蟹(Scylla paramamosain)养殖地区的青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)和青蟹双顺反子病毒-1(mud crab discistrovirus-1,MCDV-1)流行情况进行检测调查和序列分析。结果表明在调查的地区中,60%—100%的拟穴青蟹至少携带一种病毒。10月份阳江地区、台山地区、中山地区、汕尾东涌和汕尾红海湾地区拟穴青蟹MCRV携带率分别为71.42%、68.97%、70%、72.41%和64%,MCDV-1携带率分别为61.29%、24.14%、63.33%、13.79%和12%;各地区两种病毒双重感染率均在50%以下。11月份阳江地区、台山地区、中山地区、惠州大亚湾地区和惠州惠东地区拟穴青蟹MCRV携带率分别为50%、95.65%、100%、93.1%和82.76%,MCDV-1携带率分别为10%、100%、93.1%、37.93%和27.59%,台山和中山地区地区两种病毒双重感染率均在90%以上,惠州、汕尾地区以单独感染为主。五个地区获得的27株MCRV序列中,各个地区内获得的核酸序列同源性均在99.2%—100%之间,MCRV序列遗传进化基本无地域差异;获得35株MCDV-1序列中,各个地区内获得的核酸序列同源性均在91.4%—100%之间,MCDV-1序列遗传进化出现一定的地域差异。

番石榴叶水提物对拟穴青蟹抗病毒病能力及部分血清免疫因子的影响

【目的】研究番石榴叶水提物对拟穴青蟹抗病毒病能力及部分血清免疫因子活力的影响,为有效提高拟穴青蟹抗病毒病能力及促进拟穴青蟹养殖业健康发展提供理论依据。【方法】以番石榴叶水提物浸泡携带病毒的拟穴青蟹为试验组、不浸泡番石榴叶水提物为对照组,对比两组拟穴青蟹的成活率、病毒检出率及酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)和酚氧化酶(PO)活性。【结果】经番石榴叶水提物浸泡处理的拟穴青蟹平均成活率为53.3%,较对照组提高50.1%,且死亡拟穴青蟹未检测出呼肠孤病毒和双顺反子病毒-1,而对照组死亡拟穴青蟹的这两种病毒检出率分别为100%和60%。随着试验时间的延长,拟穴青蟹血清ACP、AKP、SOD和LSZ等免疫相关酶活性均呈先升高后降低的变化趋势,其中试验组拟穴青蟹血清AKP和LSZ活性于用药后24 h时达最大值(7.5金氏单位/100 m L和5.1 U/m L),且均显著高于对照组(P<0.05,下同),ACP活性于用药后48 h时达最大值(2.8金氏单位/100 m L),SOD活性于用药后64 h时达最大值(27.1 U/m L),两者也均显著高于对照组;用药后72 h时,对照组拟穴青蟹PO活性急剧升高,显著高于试验组,但其余时间点与试验组间差异不显著(P>0.05)。【结论】番石榴叶水提物能增强拟穴青蟹的免疫功能,提高对青蟹病毒病的抵抗能力,且在浸泡后48 h内效果明显。

2016年苏北地区河蟹养殖情况调查和养殖后期面临的主要问题及管理建议

立秋以后,苏北地区的雌蟹逐渐开始生殖蜕壳,因为公蟹蜕壳较母蟹迟,2016年河蟹生殖蜕壳将持续到9月初。然而由于在6-7月份河蟹三、四壳期间苏北地区连续阴雨,温度和光照不足,造成河蟹蜕壳时间延长,河蟹吃食量偏少,翻壳后体重增加偏低,河蟹规格普遍偏小。我站于8月份共调研盐都、兴化地区100多个以家庭为单位的河蟹养殖塘口,现将2016年苏北地区河蟹池塘养殖主要模式和池塘养殖中常出现的问题,以及养殖经验丰富、养殖效果较好的蟹农在生产实践中的池塘管理做法和经验总结如下，供蟹农参考。

大规格优质蟹种高产高效培育技术

大规格蟹种培育是指将大亲本蟹苗(大眼幼体)通过一年饲养,育成规格100~180只/千克的蟹种(俗称"扣蟹")的过程。大规格优质蟹种通常按只卖,售价高,只要将各环节技术把控到位,就能够获得较高产量,取得较高的效益。现将优质蟹种高产高效培育技术介绍如下。

盐城地区河蟹养殖情况调研与建议

江苏盐城有一片里下河地区水产品丰富的天然湖泊,它就是碧波荡漾、风光旖旎的大纵湖,这里丰富的水域资源、适宜的气候条件、天然的生物饵料造就了大纵湖河蟹肥满劲大、鲜腥甘甜的显著特征。近年来,盐城市盐都区依托大纵湖优质的水域资源,河蟹养殖业发展迅速,2020年河蟹养殖面积206 883亩、新增2 350亩,其中成蟹养殖面积201 037亩、蟹种培育面积5 846亩。

青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用

根据青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的c DNA片段。纯化后的PCR产物用地高辛(DIG)标记制备核酸探针,此探针与青蟹呼肠孤病毒(MCRV)、鲍肌肉萎缩症病毒(Ab SV)、类疱疹病毒(Ab HV)、白斑综合症病毒(WSSV)、虎纹蛙病毒(TFV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性的检测出MCDV-1,检出MCDV-1的灵敏度为8.58×107 copies/μL。采用原位杂交检测方法检测拟穴青蟹组织中MCDV-1的组织分布,结果表明,拟穴青蟹中MCDV-1 RNA的阳性信号主要分布于肝胰腺、神经节、肠道和食管。