全反式维甲酸联合长春新碱对视网膜母细胞瘤细胞增生的抑制作用

背景 肿瘤细胞对传统化学治疗药物产生耐药性是视网膜母细胞瘤（RB）化学疗法失败的主要原因,如何提高化学治疗药物的敏感性是RB治疗过程中亟待解决的问题,已有研究表明全反式维甲酸（ATRA）能够抑制肿瘤细胞的生长,但其是否能够提高肿瘤细胞对传统化学治疗药物的敏感性尚不清楚.目的 观察ATRA联合长春新碱对SO-RB50细胞增生的抑制作用. 方法 对SO-RB50细胞进行常规培养,培养液中分别添加不同浓度的ATRA或不同质量浓度的长春新碱,用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法分别测定ATRA及长春新碱作用48 h后对SO-RB50细胞的半数抑制浓度（IC50）.将常规培养的SO-RB50细胞分为正常对照组、ATRA组、长春新碱组和联合用药组,分别将不同药物根据IC50量添加至培养液进行细胞培养,采用CCK-8法于培养后每24小时检测细胞增生情况,连续测定6d,绘制细胞生长曲线.用流式细胞仪检测各组细胞用药72h后不同细胞周期的比例,annexin V/碘化丙啶（PI）法检测各组药物处理48 h后SO-RB50细胞的凋亡情况. 结果 ATRA作用于SO-RB50细胞的IC50值为12.84 μmol/L,长春新碱为0.11 μg/ml.正常对照组SO-RB50细胞生长曲线随着培养时间的延长逐渐上升,但ATRA和长春新碱处理后细胞增生曲线平缓,以联合用药组细胞增生量最低,曲线最平缓.药物作用48 h,正常对照组、ATRA组、长春新碱组和联合用药组细胞的吸光度（A450）分别为1.078±0.022、0.611 ±0.038、0.596±0.031和0.483±0.030,药物作用72 h分别为1.380±0.021、0.799±0.016、0.668±0.041和0.532±0.033,总体比较差异有统计学意义（F分组=1 115.207,P=0.000;F时间=257.781,P=0.000）,ATRA组、长春新碱组和联合用药组A450值均明显低于正常对照组,差异均有统计学意义（均P=0.000）.SO-RB50细胞经药物处理后72 h,各组细胞周期发生变化,与正常对照组比较,ATRA组G0/G1期细胞比例显著增加,S期细胞百分数显著减少,长春新碱组G0/G1期细胞百分数减少,而G2/M期细胞比例显著增加,总体比较差异有统计学意义（FG0/G1=130.565、Fs=57.435、FG2/M=114.290,均P＜0.05）.SO-RB50细胞经药物处理48 h后,正常对照组、ATRA组、长春新碱组及联合用药组细胞的凋亡率分别为（7.17±0.18）％、（27.34±1.36）％、（27.49±2.45）％和（34.50± 1.84）％,总体差异有统计学意义（F=147.555,P＜0.05）,联合用药组的细胞凋亡率显著高于正常对照组、ATRA组和长春新碱组,差异均有统计学意义（均P=0.000）.结论 ATRA可以在一定程度上提高SO-RB50细胞对长春新碱治疗的敏感性,2种药物的联合应用可增强对SO-RB50细胞的抑制作用,其作用机制可能与参与细胞周期调控、促进细胞凋亡有关.

杀葱蝇高毒力真菌菌株的筛选

从实验室保存的真菌菌株初步筛选获得6株对葱蝇有一定致病力的白僵菌菌株,通过室内生测进一步测定不同菌株对葱蝇幼虫的毒力。测试结果表明,在相同浓度的孢子悬浮液处理下(1×107孢子/m L),菌株CQBb119的致死率最强,第14 d对葱蝇幼虫的致死率达到77.78%,僵虫率达到58.52%,致死中时(LT50)为6.10 d。使用不同浓度孢子悬浮液处理葱蝇的各个虫态,结果显示,在不同浓度孢子悬浮液处理下,随着孢子悬浮液浓度的增加,葱蝇的死亡率逐渐升高,致死中时降低。在1×108和1×109孢子/m L浓度的菌液处理下,第14 d对葱蝇幼虫的LT50分别为5.48和4.94 d;LC50为1.35×106孢子/m L。菌株CQBb119对葱蝇成虫和蛹也有一定致死作用,但成虫和蛹的死亡率均未能达到50%。结果表明,球孢白僵菌菌株CQBb119对葱蝇幼虫具有良好杀虫活性,可以用于防控葱蝇的潜在生防制剂开发。

上海房价跌幅全国之首：正解还是误读

今年3月初，国家发改委、国家统计局联合发布的调查结果，显示在全国70个大中城市房价上涨5.5％的同期，上海房价下跌1.1个百分点。就在全国上下为调控终于取得阶段性成效而松一口气时，从上海又传来了最新消息。依据最新统计显示，2006年3月上海的商品住宅交易量达179.67万平方米，与2月82万平方米的成交面积相比，环比增幅高达119％。调控年多只下降了1，1个百分点，现在一月内成交猛增近1，19个百分点！可谓一朝回到调控前。

PAX6基因及其下游促分化基因在视网膜母细胞瘤分化过程中的作用

目的检测在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中,眼发育调控基因PAX6及其下游促分化基因MATH5和BRN3b在蛋白水平的表达情况,从而探讨PAX6基因在RB分化过程中的作用。设计病例对照研究。研究对象新鲜RB组织10例,正常视网膜组织10例。方法实验组:RB组织;对照组:正常视网膜组织。采用WesternBlot法检测新鲜视网膜母细胞瘤组织和正常视网膜组织中Pax6、Math5、Brn3b蛋白质水平的表达情况并作比较。主要指标Pax6、Math5、Brn3b蛋白质的表达水平。结果本研究中RB组织和正常视网膜组织中均可检测出Pax6、Math5、Brn3b蛋白的表达。与正常视网膜组织相比较,RB组织中Pax6、Math5、Brn3b蛋白的表达水平增高(P均<0.001);Math5与Pax6蛋白表达具有线性相关性(r=0.949,P<0.001),Brn3b与Math5蛋白表达具有线性相关性(r=0.927,P<0.001)。结论在RB组织中,PAX6基因上调下游促分化基因MATH5和BRN3b表达水平,促进RB组织的分化。

原发性虹膜基质囊肿一例

患者男性,19岁.因右眼视物不清2个月,发现右眼内肿物1个月,偶有眼胀感,于2013年2月1日到北京同仁眼科中心就诊.患者2周前曾在外院眼科就诊,诊断“右眼虹膜肿物,左眼弱视”,未行进一步治疗.患者自幼左眼弱视,否认眼部外伤史及眼部手术史,否认眼部药物史,否认全身疾病史,否认全身手术史（包括胎儿期间羊膜穿刺史）.眼部检查：视力：右眼0.7,左眼0.2.BCVA：右眼0.7,左眼0.2.非接触眼压：右眼24.0 mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）,左眼15.9 mmHg.

上方角膜缘角结膜炎一例

患者女性，31岁。双眼磨、流泪1周，于2011年4月2日至首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心就诊。患者于6周前曾在外院确诊为甲状腺功能亢进，并进行药物治疗。

以囊肿为主的结膜色素痣一例

患者女性，69岁。体检中发现右眼上方球结膜色素性肿物5天。眼部检查：双眼最佳矫正视力1．0。眼压正常。双眼睑未见异常。

视网膜母细胞瘤PAX6、Ki-67和MMP-9的表达及其与组织病理学的关系

目的检测PAX6、Ki-67及MMP-9在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达,探讨其与RB临床组织病理学特征之间的关系及临床意义。设计实验性研究。研究对象石蜡包埋RB组织40例,其中<3岁组27例,≥3岁组13例。方法采用免疫组织化学Elivision法检测PAX6、Ki-67及MMP-9在40例RB组织中的表达情况,分析该3种蛋白表达与患者性别、眼别、年龄、视神经受侵情况以及是否化疗等临床组织病理学特征的关系,并分析3种蛋白表达之间的相关性。主要指标RB组织中PAX6、Ki-67、MMP-9的表达及临床组织病理学特征。结果 40例RB组织中,PAX6、Ki-67及MMP-9的阳性表达率分别为52.5%、55.0%、57.5%。Ki-67在年龄大于3岁组的阳性表达率高于年龄小于3岁组(χ2=6.825,P=0.016),PAX6(χ2=0.631,P=0.511)及MMP-9(χ2=0.129,P=1.000)的表达与年龄无显著相关性。3种蛋白的表达均与性别及眼别无显著相关性。PAX6、Ki-67及MMP-9在球后视神经受侵袭组的阳性表达率均高于未受侵袭组(χ2=14.401,P=0.017;χ2=11.831,P=0.046;χ2=13.961,P=0.038)。PAX6及Ki-67在未化疗组的阳性表达率均高于化疗组(χ2=8.120,P=0.010;χ2=6.465,P=0.025)。PAX6和Ki-67的表达呈正相关(r=0.347,P=0.028)。结论 PAX6的高表达促进了RB细胞的增生;PAX6、Ki-67和MMP-9的高表达与RB的侵袭有一定的相关性;化疗对RB中PAX6和Ki-67的表达有一定的抑制作用,在一定程度上可以降低RB侵袭转移的风险。

黄斑囊样水肿患者自发荧光与黄斑色素密度的关系

目的探讨黄斑囊样水肿(CME)眼底自发荧光与黄斑色素密度的相关性,以提供对其预后有临床价值的技术参数。设计回顾性病例系列。研究对象2009年8月至2010年7月于北京同仁医院确诊CME的视网膜中央静脉阻塞、视网膜分支静脉阻塞及糖尿病视网膜病变的患者18例(24眼)。24只正常眼选自年龄及性别相匹配者。方法对所有患眼及正常对照眼行彩色眼底照相、荧光素眼底血管造影(FFA)及相干光断层扫描(OCT)确诊CME。采用海德堡公司HRA-2共焦激光扫描系统的IR(infrared)及FA(不注入荧光素钠)模式进行眼底自发荧光及黄斑色素密度的检测。黄斑色素密度按Zhang等分期法分为完整的黄斑色素、部分黄斑色素及黄斑色素缺失三级。采用Monte Carlo精确检验说明不同分级的黄斑色素密度与自发荧光的相关性,线性相关卡方检验分析两个变量之间的变化趋势。主要指标眼底自发荧光的分布及形态、黄斑色素的分布及密度。结果 24只CME眼自发荧光均为阳性(100%),并在黄斑区呈花瓣样表现,而正常对照眼的黄斑自发荧光均为阴性。CME眼中黄斑色素缺失22眼(91.7%),部分黄斑色素2眼(8.3%);正常对照眼黄斑色素密度均为完整的黄斑色素(100%)。黄斑色素密度与自发荧光的出现在本次研究中呈现负相关(χ2=45.123,P=0.0001)。结论 CME患者中黄斑色素密度大小与黄斑区自发荧光呈负相关,黄斑区自发荧光可做为其随诊的临床评价指标。

转录因子PaPho与丝状真菌Podospora anserina中磷元素的吸收和利用研究

作为生物体必需的营养元素之一,磷在物质代谢、信号传导和能量储存中起着关键作用。【目的】研究丝状真菌Podospora anserina中调控磷酸盐代谢相关转录因子的作用,可进一步阐明真核微生物中磷元素吸收的调控机制。【方法】利用同源重组的方法定点敲除P.anserina中2个磷代谢相关转录因子PaPho1和PaPho2,遗传杂交构建双重突变体ΔPaPho1ΔPaPho2;通过表型分析、无机磷含量测定和酸性磷酸酶活性测定分析各突变菌株的变化;利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析磷代谢相关基因的表达情况。【结果】在无机磷作为唯一磷来源的培养基上,ΔPaPho1ΔPaPho2无法生长;在添加有机磷的培养基中,ΔPaPho1ΔPaPho2和野生型菌株生长无显著性差异。在同时添加有机磷和无机磷的培养基中,ΔPaPho1ΔPaPho2的无机磷含量和酸性磷酸酶活性比野生型菌株的分别下降了25.0%和61.9%,ΔPaPho1ΔPaPho2中无机磷酸盐转运蛋白基因的表达水平显著降低。【结论】在P.anserina中,PaPho1和PaPho2作为调控磷酸盐代谢信号通路转录因子,对无机磷的吸收起到关键作用,但并不参与有机磷的代谢调控。该研究可为阐释丝状真菌P.anserina对无机磷吸收的调控机制提供参考。

带状疱疹病毒性角膜炎

男性。48岁。左眼磨3个月伴视物模糊、畏光就诊。视力：右眼0．7，左眼0．3；左侧头部及额部皮肤可见疱疹瘢痕，双眼睑皮肤未见明显异常，右眼前节未见异常，左眼角膜瞳孔区鼻上方可见一树枝状角膜浅层溃疡，