牙龈卟啉单胞菌感染对食管癌细胞内IFNGR1棕榈酰化位点突变的影响

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染对食管鳞癌细胞(ESCC)内IFNGR1棕榈酰化位点突变的机制及临床意义。方法Western blot检测Pg感染不同时间(24、48 h)ESCC细胞KYSE30及KYSE70中IFNGR1蛋白量表达水平。2-BP检测IFNGR1的棕榈酰化作用。构建IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A棕榈酰化位点突变位点质粒,建立IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A稳定细胞系,分别用Pg感染IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A细胞,并分为4组:IFNGR1-WT、IFNGR1-C122A、IFNGR1-WT+Pg和IFNGR1-C122A+Pg组。免疫荧光和click-it实验检测IFNGR1在122位点发生棕榈酰化,以及Pg促进IFNGR1在ESCC内发生棕榈酰化。利用平板克隆、划痕实验及Transwell法检测Pg感染前后,IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A稳转细胞株的体外增殖、迁移与侵袭能力差异。免疫荧光实验检测IFNGR1与溶酶体标记物LAMP2共定位情况。免疫组化检测50例ESCC组织中Pg感染与IFNGR1蛋白的表达情况;采用卡方检验及R Studio软件分析二者与ESCC患者临床病理特征及生存预后之间的相关性。结果Pg感染ESCC下调IFNGR1的蛋白表达。IFNGR1在122位点发生棕榈酰化。Pg促进IFNGR1在ESCC内棕榈酰化。与IFNGR1-WT组相比,IFNGR1-WT+Pg组体外增殖253±6.245 vs 52±2.45、迁移(0.7816±0.0071)%vs(0.4347±0.0366)%及侵袭709.33±14.57 vs 356.3±17.39能力均显著增强(P<0.05);与IFNGR1-C122A组相比,IFNGR1-C122A+Pg组细胞体外增殖137.33±4.726 vs 29.67±3.055、迁移(0.7477±0.0057)%vs(0.2406±0.0028)%及侵袭587.33±5.033 vs 67.33±2.517能力同样均显著增强(P<0.05)。与IFNGR1-WT+Pg组相比,IFNGR1-C122A+Pg体外增殖137.33±4.726 vs 253±6.245、迁移(0.7477±0.0057)%vs(0.7816±0.0071)%及侵袭587.33±5.033 vs 709.33±14.57能力均显著降低(P<0.05)。Pg及ZDHHC3促进IFNGR1在溶酶体内降解;IFNGR1与Pg表达呈负性相关,且IFNGR1的表达降低与更差的病理特征及生存预后相关。结论Pg感染ESCC下调IFNGR1蛋白表达量,同时诱导IFNGR1棕榈酰化,促进ESCC恶性化进展;IFNGR1的棕榈酰化位点突变减少ESCC增殖、迁移和侵袭作用;Pg感染ESCC靶向IFNGR1到溶酶体内降解可能是由于棕榈酰化作用,因此,清除Pg或抑制棕榈酰化作用能有效抑制食管癌的恶性进展。

食管癌肿瘤微环境中癌相关细胞研究进展

长期以来,食管癌领域的研究主要集中在肿瘤细胞本身的癌变机制,但近年来研究发现,在肿瘤发生、发展及浸润转移过程中肿瘤微环境中的免疫细胞以及其他各种间质细胞同样扮演着重要的角色,发挥各自重要的作用。要更加全面地了解食管癌,在关注肿瘤细胞的同时,肿瘤微环境的作用同样不可忽视。肿瘤微环境中含有不同种类的细胞群体及其分泌的各类细胞因子,微环境中癌相关细胞与肿瘤细胞之间相互作用,影响肿瘤的发生发展。本文对食管癌微环境中癌相关细胞及其与食管癌细胞之间的相互作用进行综述。

牙龈卟啉单胞菌在脑转移微环境中的作用概述

肿瘤微环境是指肿瘤细胞存在的周围微环境,包括周围血管、免疫细胞、成纤维细胞、骨髓源性炎性细胞、各种信号分子和细胞外基质(ECM)。约有20%的原发肿瘤会发生脑转移,而肿瘤脑转移的微环境主要由星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞、脑血管周细胞构成。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是慢性牙周炎的主要病原体,同时也是食管癌发生的诱因之一。本文主要从脑微环境的角度描述了Pg对脑微环境的作用,包括Pg定植入脑、星形胶质细胞与Pg的相互作用等。鉴于脑转移的高发生率和其导致的高死亡率,尝试研究了一种潜在的治疗思路,以提高脑转移肿瘤患者的生存率。

蛋白质半胱氨酸棕榈酰化在食管肿瘤免疫中的作用

蛋白质半胱氨酸棕榈酰化,或称为S-棕榈酰化,是蛋白质翻译后修饰的一种,近年来受到越来越多的关注。人体有数千种被修饰过的蛋白质,由于修饰的蛋白质数量众多,更加凸显了S-棕榈酰化的重要性。本文主要从食管肿瘤免疫学的角度介绍S-棕榈酰化的作用,讨论了几个重要的免疫信号传导通路,包括S-棕榈酰化对蛋白质的作用、吞噬调节作用、细胞因子受体介导的信号传导、凋亡信号的调控等。本文着重强调了棕榈酰化在调节食管肿瘤免疫信号传导中的通用性,同时也是对于靶向棕榈酰化治疗食管肿瘤潜力的探讨。

牙龈卟啉单胞菌感染星形胶质细胞对食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的研究牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染的鼠源星形胶质细胞(MAs)对鼠源食管癌细胞(AKR)增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法免疫荧光(IF)法检测MAs感染Pg后细胞趋化因子C-C配体2(CCL2)的表达情况,蛋白质免疫印迹法(WB)检测MAs感染Pg后分泌CCL2的水平,以及AKR与Pg阳性的MAs共培养后C-C趋化因子受体2(CCR2)的表达改变。CCK8细胞增殖实验检测Pg阳性MAs共培养对AKR细胞增殖能力的影响,划痕实验和Transwell实验检测Pg阳性MAs共培养对AKR细胞迁移及侵袭能力的影响。结果IF显示,CCL2主要与MAs特异性的胶质纤维酸性蛋白共定位,Pg感染的MA细胞分泌CCL2的能力显著增加(P<0.05),且与感染Pg的数目正相关。AKR细胞与Pg感染的MAs细胞共培养后CCR2表达上调,增殖、迁移和侵袭能力均显著增强,且上述增强可为CCR2阻断剂抑制。结论Pg感染的MAs分泌CCL2的能力增强,CCL2通过AKR表面的CCR2促进AKR细胞的增殖、迁移及侵袭,CCL2、CCR2可能与感染Pg后脑内微环境的改变及食管癌脑转移有关。