致衰不过精血俱耗,治衰不离补精养形--朱丹溪论治精血虚衰思想初探

“精血虚衰”理论及由此衍生的“补精养形”之学术思想在中医药防治衰老与老年病的历史长河中地位斐然。金元四大家之朱丹溪承接《黄帝内经》“阴虚致衰”的学术精髓,确立了“精血俱耗致衰”学说,开启了“补精养形治衰”之先河。临床上强调味厚以补精,针对精血虚衰之老年病擅用大量味厚之品;重视温存以养形,倡导老年人温存养气、保全形体的养生之法,提示了在老年病的防治中补益精血与温存养形的缺一不可性。文章先溯“精”与“精血”之源,后基于丹溪《格致余论》中“精血虚衰”的核心学术理论,凝练丹溪“精血俱耗乃衰老之本”的学术精髓以及由此开创的“补精养形”之治衰大法,无疑对后世医家产生了深远的影响。

证候蛋白质组学与中医证候学相关性探讨

以蛋白质组学为代表的后基因组时代的到来,必然使分子生物学经历从局部观走向整体观、从线形思维走向复杂思维的转变。基于蛋白质组学的发展趋势,总结了近年来中医证候学研究方法,提倡用二维电泳及生物信息学方法鉴定不同的蛋白质。将蛋白质组学引入中医证候分类及证候演变规律的研究,对从分子流行病学水平来探讨中医学与蛋白质组学乃至现代分子生物学研究相结合都是必须的。而蛋白质组学与传统中医药在研究生命科学的思维方法上逐步趋于一致,相互渗透,说明在探讨复杂性生命现象时中西医两种医学相结合的必然性和重要性。

从血管老化角度探讨动脉粥样硬化中医防治策略

动脉粥样硬化是随增龄不断增长、以中老年人为主要发病人群的慢性退行性疾病,抗血管细胞老化正逐渐成为动脉粥样硬化治疗的新策略。动脉粥样硬化演进过程中,内皮细胞更新加快,出现多种诱导血管老化的生物学功能紊乱,引起端粒、端粒酶的变化,造成内皮细胞老化及功能异常。在炎症等致病因素与AS斑块形成之间,端粒、端粒酶可能起着关键性的桥梁作用。我们以往工作发现,补肾为主的中药复方在明显改善衰老症状和功能的同时也表现出抑制动脉粥样硬化的显著作用。应积极探讨中医对动脉粥样硬化从肾论治、补肾中药从端粒途径调控动脉粥样硬化血管细胞老化的作用机制,为建立基于血管老化的动脉粥样硬化中医防治策略提供依据。

首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者血脂及炎症因子的影响

目的:观察首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者外周血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及炎症因子C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)的影响。方法:156例颈动脉粥样硬化患者随机分为中药组83例和西药组73例。中药组服用首参颗粒,西药组口服普法他汀片,疗程均为6个月。于治疗前、治疗后3、6个月分别观察血脂及CRP、IL-6的变化。结果:中药组治疗后TG、TC/HDL-C比值较治疗前均下降明显(P<0.05或P<0.01),HDL-C值上升明显(P<0.01),与西药组同期比较差异无统计学意义(P>0.05);中药组治疗后CRP、IL-6表达较治疗前均明显下降(P<0.01),与西药组同期比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:首参颗粒可改善颈动脉粥样硬化患者脂质代谢紊乱,降低CRP、IL-6水平进而有效干预治疗颈动脉粥样硬化病变。

基于差异蛋白质组学解析一贯煎对大鼠肝硬化形成的影响

目的:基于差异蛋白质组学探讨一贯煎干预肝硬化的部分效应机制。方法:48只Wistar雄性大鼠随机分为正常组(n=12)及造模组(n=36),采用50%四氯化碳(carbonte tra-chloride,CCl4)-橄榄油溶液1mL/kg腹腔注射(2次/周,共9周)制备大鼠肝硬化模型。于开始造模后3周和6周分别随机处死6只大鼠,作药物干预前的动态观察,其余24只模型大鼠于开始造模后第7周首日随机分为模型组(n=12)及一贯煎干预组(n=12)。大鼠于第9周末全部处死取材。双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离肝组织总蛋白,基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱及数据库查询鉴定差异表达蛋白质;差异蛋白质铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,Cu/Zn SOD)和DJ-1表达采用蛋白印迹法及免疫组织化学方法进行验证。结果:获得分辨率高、重复性好的肝组织2-DE图谱,经质谱鉴定的50个差异蛋白质中,与氧化应激相关的5个蛋白质分别是Cu/ZnSOD、DJ-1、谷胱甘肽合成酶、谷胱甘肽S-转移酶Yb-1亚基、醛酮还原酶7,A2。与正常组大鼠比较,模型组肝组织Cu/ZnSOD、DJ-1、谷胱甘肽S-转移酶及醛酮还原酶7,A2的表达均显著降低,其中Cu/ZnSOD、醛酮还原酶7,A2在造模3周、6周及9周后呈梯级下降,而DJ-1、谷胱甘肽S-转移酶于造模3周、6周及9周后均呈低水平表达;谷胱甘肽合成酶表达显著升高。治疗结束后与模型组比较,一贯煎组Cu/ZnSOD、DJ-1、谷胱甘肽S-转移酶及醛酮还原酶7,A2表达均明显增高,谷胱甘肽合成酶表达显著降低。蛋白印迹法及免疫组织化学验证了Cu/ZnSOD、DJ-1在蛋白表达水平的差异,与蛋白质组学结果基本一致。结论:抗氧化应激功能降低是CCl4致大鼠肝硬化的重要病理环节,提高抗氧化应激功能相关蛋白的表达可能是一贯煎治疗CCl4所致大鼠肝硬化的主要效应机制。

健胃愈疡颗粒对乙酸性胃溃疡复发大鼠作用的蛋白质组学研究

目的分析健胃愈疡颗粒(JWYY)对乙酸性胃溃疡复发大鼠蛋白质表达谱的影响,寻找JWYY抗胃溃疡复发作用的相关蛋白。方法采用二维凝胶电泳(2-DE)分离JWYY处理组和JWYY未处理组大鼠胃组织的总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图,NCBInr及SWISS-PROT数据库搜索鉴定蛋白质。结果所获2-DE图谱分辨率高、重复性好,质谱分析共鉴定了12个差异蛋白质点,其中JWYY处理组有8个蛋白质点表达上调,4个蛋白质点表达下调,大多数蛋白与溃疡复发的形成、生长、凋亡及免疫等环节相关。结论JWYY抗胃溃疡复发作用可能与多种蛋白直接或间接相关,这些蛋白质的鉴定及进一步研究有助于抗溃疡复发药物新型靶标的发现。

首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者临床疗效的初步评价

目的观察补肾中药复方首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者的临床疗效。方法将80例患者随机分为两组,对照组口服普伐他汀,治疗组服用首参颗粒,疗程均为6个月。于治疗前后采用彩色多普勒超声检测颈动脉硬化患者颈动脉内膜-中层厚度(IMT),动脉硬化仪检测肱踝脉搏波传导速度(baPWV),并观察用药前后患者的血脂变化及肝、肾功等安全性指标。结果治疗后6个月,对照组IMT、TC、TG、LDL-C及TC/HDL-C比值较治疗前均明显降低,HDL-C较治疗前明显升高;治疗组baPWV较治疗前明显降低,TG、TC/HDL-C比值较治疗前降低,HDL-C较治疗前明显升高。结论首参颗粒可通过降低IMT、baPWV及改善脂质代谢进而有效干预治疗颈动脉粥样硬化病变。

基于AngⅡ、ApoE表达探讨补肾中药复方首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者的影响

目的基于Ang Ⅱ、ApoE的表达观察补肾中药复方首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者的影响。方法选取2011年6月~2012年1月上海中医药大学附属市中医医院老年病科颈动脉粥样硬化患者80例为研究对象,采用区组随机化方法将其分为观察组(40例)和对照组(40例)。两组分别予以首参颗粒、普伐他汀口服治疗,疗程6个月。于治疗前、治疗后分别采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测患者血清AngⅡ、ApoE表达。结果治疗后6个月,观察组AngⅡ表达较治疗前显著降低(P<0.01),与对照组同期比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组ApoE表达较治疗前明显上升(P<0.01),与对照组同期比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论首参颗粒可能通过调控AngⅡ、ApoE的表达进而实现对动脉粥样硬化的多靶点干预。

基于ApoE^(-/-)小鼠TLR4、MCP-1、ICAM-1表达探讨首参颗粒干预动脉粥样硬化的效应机制

目的观察首参颗粒对ApoE^(-/-)小鼠Toll样受体4(TLR4)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响。方法采用高脂饮食喂饲ApoE^(-/-)小鼠复制动脉粥样硬化(AS)模型,并给予首参颗粒、阿托伐他汀干预15周,采用Western blotting法检测小鼠主动脉TLR4蛋白表达,ELISA法检测血清MCP-1、ICAM-1表达,结合血脂及组织病理学检测。结果与正常组比较,高脂饮食喂饲ApoE^(-/-)小鼠可致明显的AS病变,TLR4、MCP-1、ICAM-1表达上调及TC、LDL-C含量升高;经首参颗粒干预,AS斑块面积显著减小,TLR4、MCP-1、ICAM-1表达下调,TC、LDL-C含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论首参颗粒可通过下调ApoE^(-/-)小鼠主动脉TLR4蛋白表达与血清MCP-1、ICAM-1水平进而有效干预治疗AS。

消化性溃疡从肝脾论治

本文从消化性溃疡与肝脾的生理病理关系、消化性溃疡的发病基础及消化性溃疡的治法等方面阐述了消化性溃疡从肝脾论治的必要性,为消化性溃疡从肝脾论治法提供佐证。

从肝治脾溯源

从“肝与脾五行相克”的角度论述了肝与脾的密切关系,对肝脾两脏的生理病理进行了阐述,并从“肝”治疗消化性溃疡为例,为“从肝治脾”法提供了佐证。

蔡淦运用“脾统四脏”理论治疗心系疾病经验

蔡淦教授运用"脾统四脏"理论治疗内伤杂病,疗效颇佳。本文介绍蔡淦教授运用"脾统四脏"理论治疗心系疾病经验,并附病案三则详述其临床应用。

IL-1β致乙酸性胃溃疡复发大鼠的比较蛋白质组学分析

目的:筛选胃溃疡复发相关的蛋白质,进一步揭示胃溃疡复发的分子机制．方法:以乙酸制备胃溃疡模型,并用IL-1β诱导复发．采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离胃溃疡复发大鼠胃溃疡处组织及正常大鼠相应处胃组织的总蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹图(PMF),搜索数据库鉴定蛋白质．结果:获得分辨率较高、重复性较好的胃溃疡复发大鼠和正常大鼠胃组织的2-DE图谱,质谱分析共鉴定了12个差异蛋白质点,其中7个表达上调,含热休克蛋白27(HSP27)、葡萄糖调节蛋白(GRP78)、L-乳酸脱氢酶轻链、磷酸甘油醛脱氢酶、血红蛋白β链、过氧化物酶2、过氧化物酶1:5个表达下调,含膜联蛋白A_2、热休克蛋白60、氯离子通道蛋白1、黏着斑蛋白、凝溶胶蛋白。随即采用免疫组化法检测差异蛋白质HSP27和GRP78在两类组织中的表达,结果显示胃溃疡复发组HSP27和GRP78阳性细胞百分率均显著高于正常对照组(HSP27:27．90%±5．34% vs 22．10%±3．67%, P＜0．05:GRP78:43．00%±4．52% vs 26．30%±3．95%,P＜0．01)．结论:差异蛋白如HSP27和GRP78等可能以不同的方式参与了胃溃疡的复发过程,为揭示胃溃疡复发的机制提供了线索．

建立并优化胃溃疡复发大鼠蛋白质组分析的双向凝胶电泳技术

目的:建立并优化白细胞介素1β致大鼠乙酸性胃溃疡复发模型大鼠蛋白质组分析所需的双向凝胶电泳技术。方法:实验于2005-04/2006-02在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成。①选用成年SD大鼠60只,雌雄不拘。按随机数字表法分为2组:对照组、模型组,每组30只。采用乙酸复制胃溃疡动物模型及白细胞介素1β复制胃溃疡复发动物模型,正常对照组施予相同的饮食方案。②两组大鼠于复发模型建立成功后24h禁食,48h后处死,收集胃组织,在组织样品离体后立即以冰盐水冲洗以去除组织液和血细胞,并于30min内入液氮速冻,采用化学和高速机械法进行胃组织裂解。采用AmershamBiosciences公司专门针对蛋白质组学研究中的蛋白质抽提方法设计的2DQuantKit定量试剂盒,从而实现准确的蛋白质定量。为了尽量可能多分离蛋白质,选择pH值范围(pH3￣10)的固相线性24cm干胶条和125g/L的均匀SDS聚丙烯酰胺凝胶,采用初始电压为2.5W/胶电泳30min,然后以17W/胶恒功率电泳,直至溴酚蓝指示线到达凝胶底边处停止电泳。结果:以固相pH梯度-IPG胶条(pH3～10)进行第一向等电聚焦,以SDS均一胶(12.5%)的垂直电泳为第二向,成功地得到了两组大鼠胃组织斑点分布均匀、数目较多的双向凝胶电泳图谱。结论:通过对蛋白质双向凝胶电泳的建立及技术的优化,获得了适合于研究胃溃疡复发蛋白质组差异表达。

蔡淦运用膏方调治老年病经验

介绍蔡淦教授运用膏方调治老年病的经验。认为老年病多虚实夹杂、痰瘀互结,治疗首重后天、兼顾先天;用药强调轻清灵动,气血并调,动静结合,补益祛邪,相得益彰。并举验案1则。

蛋白质组学及其在消化系统疾病中的应用

蛋白质组学是以生物体系整体蛋白质为研究对象,其研究以双向凝胶电泳和质谱技术为核心,旨在研究蛋白质表达谱和蛋白质与蛋白质之间相互作用的新领域,已被广泛应用于疾病的相关研究。本文综述了最近几年来蛋白质组学及其在消化系统疾病方面的进展,其研究结果将对生物标记物和药靶的寻找,以及致病机理的阐述具有重要意义,亦为消化系统疾病的探讨提供了新的思路和方法。

健胃愈疡颗粒对胃溃疡复发大鼠胃组织核因子-κBmRNA及其蛋白表达的影响

目的观察胃溃疡复发大鼠胃组织的炎症反应、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA及其蛋白表达和健胃愈疡颗粒的干预作用。方法先后复制大鼠乙酸性胃溃疡及其复发模型,设假手术组、模型组、奥美拉唑组、健胃愈疡组。观察各组大鼠胃组织慢性炎症细胞和中性粒细胞计数、NF-κB mRNA及其蛋白表达的情况。结果灌胃16天和92天时,模型组大鼠胃组织慢性炎症细胞和中性粒细胞计数、NF-κB mRNA及其蛋白表达均较假手术组显著增加(P<0.01),健胃愈疡组慢性炎症细胞和中性粒细胞计数、NF-κB mRNA及其蛋白表达均显著低于模型组(P<0.05或P<0.01),与奥美拉唑组比较差异无显著性。NF-κB mRNA及其蛋白表达均分别与慢性炎症细胞和中性粒细胞计数密切相关(P<0.01)。结论NF-κB可能在调节大鼠乙酸性胃溃疡愈合及其复发的炎症反应中发挥重要作用。健胃愈疡颗粒可能通过抑制胃组织NF-κB的活化和表达抑制炎症反应,这可能是其抗溃疡复发机制之一。