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细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测7型腺病毒感染
被引量:
5
1
作者
尚定昆
申宝玲
+2 位作者
郑晓群
彭颖
林新新
《中华医院感染学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期594-597,共4页
目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的检测7型腺病毒(ADV7)感染的技术。方法A549细胞分离培养鼻咽分泌物中的腺病毒纯化后,以感染复数(MOI)为0.1、0.5、5.0和10.0的纯化病毒感染A549细胞,分别在感染后3、6、12和24h提取总RNA进...
目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的检测7型腺病毒(ADV7)感染的技术。方法A549细胞分离培养鼻咽分泌物中的腺病毒纯化后,以感染复数(MOI)为0.1、0.5、5.0和10.0的纯化病毒感染A549细胞,分别在感染后3、6、12和24h提取总RNA进行ADV7E1A基因的实时荧光RT-PCR检测并测序验证;最后用该法直接检测鼻咽分泌物标本中的7型腺病毒。结果实时荧光RT-PCR最快可在感染后3h检测出0.5MOI病毒感染的早期转录物;感染后6h可检测出0.1MOI病毒感染的早期转录物;鼻咽分泌物标本直接感染后6h即可检测到病毒的早期转录物。结论细胞培养结合实时荧光RT-PCR法能快速、灵敏、特异地检测出感染性的7型腺病毒,具有一定的推广应用价值。
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关键词
腺病毒
细胞培养
实时
RT-PCR
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职称材料
7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达
被引量:
1
2
作者
沈鑫烽
申宝玲
+3 位作者
黄燕燕
余雪娇
彭颖
吕建新
《细胞生物学杂志》
CSCD
2008年第2期196-200,共5页
为了研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的致病机制,分离了Ad7d2病毒株,构建了Ad7E1A基因的真核表达体系。用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒,应用重叠延伸PCR扩增Ad7E1A基因外显子,产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo,构建重组子pIRES-Ne...
为了研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的致病机制,分离了Ad7d2病毒株,构建了Ad7E1A基因的真核表达体系。用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒,应用重叠延伸PCR扩增Ad7E1A基因外显子,产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo,构建重组子pIRES-Neo-Ad7E1A并转染A549细胞,利用Western印迹对其表达产物进行鉴定。克隆测序显示扩增的Ad7E1A基因外显子包含了完整的编码区基因,pIRES-Neo-Ad7E1A转染A549细胞的表达产物经Western印迹鉴定与设计相符。成功建立了Ad7E1A基因的真核表达体系。
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关键词
7型腺病毒
E1A基因
克隆
真核表达
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职称材料
实时荧光定量HCV RNA与ALT检测在丙肝筛查中临床价值的研究
被引量:
3
3
作者
申宝玲
刘建华
李静丹
《标记免疫分析与临床》
CAS
2021年第6期913-916,共4页
目的探讨抗-HCV抗体阳性时,实时荧光定量HCV RNA与ALT检测在丙肝筛查中临床价值的研究。方法回顾选择2019年1月至2019年12月首都医科大学附属房山区良乡医院收治的患者109例为研究对象,均留取外周静脉血,测定血清抗-HCV抗体、HCV RNA,...
目的探讨抗-HCV抗体阳性时,实时荧光定量HCV RNA与ALT检测在丙肝筛查中临床价值的研究。方法回顾选择2019年1月至2019年12月首都医科大学附属房山区良乡医院收治的患者109例为研究对象,均留取外周静脉血,测定血清抗-HCV抗体、HCV RNA,丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。结果在收集的109例抗-HCV抗体阳性患者样本中,以HCV RNA为金标准作为丙型肝炎的诊断,HCV RNA阳性患者占20.2%(22/109),HCV RNA阴性患者占79.8%(87/109),两组样本经独立样本配对t检验,P值为0.006,差异有统计学意义(P<0.05),以HCV RNA检测为金标准,用SPSS 23.0软件对抗-HCV的S/CO值及ALT进行ROC曲线处理,HCV抗体S/CO值对丙型肝炎的ROC曲线下面积(AUC)为0.851,ALT对丙型肝炎的ROC曲线下面积(AUC)为0.831。结论HCV RNA阳性患者ALT平均值明显高于HCV RNA阴性患者的ALT平均值。抗-HCV的S/CO值及ALT对于丙型肝炎的筛查都有一定的价值,且抗-HCV抗体优于ALT的筛查。临床上,患者筛查丙型肝炎抗体阳性时,可同时进行ALT的检测,可为丙型肝炎早期诊断提供依据,以免延误治疗时机。
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关键词
丙型肝炎病毒
实时荧光定量PCR
抗-HCV抗体
ALT
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职称材料
题名
细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测7型腺病毒感染
被引量:
5
1
作者
尚定昆
申宝玲
郑晓群
彭颖
林新新
机构
乐清市第二人民医院检验科
温州医学院检验医学院、生命科学院
温州医学院附属第二医院检验科
出处
《中华医院感染学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期594-597,共4页
基金
温州市科技发展计划基金项目(Y2006A033)
浙江省自然科学基金项目(Y205188)
文摘
目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的检测7型腺病毒(ADV7)感染的技术。方法A549细胞分离培养鼻咽分泌物中的腺病毒纯化后,以感染复数(MOI)为0.1、0.5、5.0和10.0的纯化病毒感染A549细胞,分别在感染后3、6、12和24h提取总RNA进行ADV7E1A基因的实时荧光RT-PCR检测并测序验证;最后用该法直接检测鼻咽分泌物标本中的7型腺病毒。结果实时荧光RT-PCR最快可在感染后3h检测出0.5MOI病毒感染的早期转录物;感染后6h可检测出0.1MOI病毒感染的早期转录物;鼻咽分泌物标本直接感染后6h即可检测到病毒的早期转录物。结论细胞培养结合实时荧光RT-PCR法能快速、灵敏、特异地检测出感染性的7型腺病毒,具有一定的推广应用价值。
关键词
腺病毒
细胞培养
实时
RT-PCR
Keywords
Adenovirus
Cell culture
Real-time
RT-PCR
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达
被引量:
1
2
作者
沈鑫烽
申宝玲
黄燕燕
余雪娇
彭颖
吕建新
机构
温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室
出处
《细胞生物学杂志》
CSCD
2008年第2期196-200,共5页
基金
浙江省自然科学基金资助项目(No.Y205188)~~
文摘
为了研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的致病机制,分离了Ad7d2病毒株,构建了Ad7E1A基因的真核表达体系。用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒,应用重叠延伸PCR扩增Ad7E1A基因外显子,产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo,构建重组子pIRES-Neo-Ad7E1A并转染A549细胞,利用Western印迹对其表达产物进行鉴定。克隆测序显示扩增的Ad7E1A基因外显子包含了完整的编码区基因,pIRES-Neo-Ad7E1A转染A549细胞的表达产物经Western印迹鉴定与设计相符。成功建立了Ad7E1A基因的真核表达体系。
关键词
7型腺病毒
E1A基因
克隆
真核表达
Keywords
adenovirus type 7
E1A gene
cloning
eukaryotic expression
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
实时荧光定量HCV RNA与ALT检测在丙肝筛查中临床价值的研究
被引量:
3
3
作者
申宝玲
刘建华
李静丹
机构
首都医科大学附属北京康复医院检验科
首都医科大学附属房山区良乡医院检验科
出处
《标记免疫分析与临床》
CAS
2021年第6期913-916,共4页
文摘
目的探讨抗-HCV抗体阳性时,实时荧光定量HCV RNA与ALT检测在丙肝筛查中临床价值的研究。方法回顾选择2019年1月至2019年12月首都医科大学附属房山区良乡医院收治的患者109例为研究对象,均留取外周静脉血,测定血清抗-HCV抗体、HCV RNA,丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。结果在收集的109例抗-HCV抗体阳性患者样本中,以HCV RNA为金标准作为丙型肝炎的诊断,HCV RNA阳性患者占20.2%(22/109),HCV RNA阴性患者占79.8%(87/109),两组样本经独立样本配对t检验,P值为0.006,差异有统计学意义(P<0.05),以HCV RNA检测为金标准,用SPSS 23.0软件对抗-HCV的S/CO值及ALT进行ROC曲线处理,HCV抗体S/CO值对丙型肝炎的ROC曲线下面积(AUC)为0.851,ALT对丙型肝炎的ROC曲线下面积(AUC)为0.831。结论HCV RNA阳性患者ALT平均值明显高于HCV RNA阴性患者的ALT平均值。抗-HCV的S/CO值及ALT对于丙型肝炎的筛查都有一定的价值,且抗-HCV抗体优于ALT的筛查。临床上,患者筛查丙型肝炎抗体阳性时,可同时进行ALT的检测,可为丙型肝炎早期诊断提供依据,以免延误治疗时机。
关键词
丙型肝炎病毒
实时荧光定量PCR
抗-HCV抗体
ALT
Keywords
Hepatitis C virus
Real-time fluorescent PCR
Anti-HCV antibody
ALT
分类号
R512.63 [医药卫生—内科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测7型腺病毒感染
尚定昆
申宝玲
郑晓群
彭颖
林新新
《中华医院感染学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
下载PDF
职称材料
2
7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达
沈鑫烽
申宝玲
黄燕燕
余雪娇
彭颖
吕建新
《细胞生物学杂志》
CSCD
2008
1
下载PDF
职称材料
3
实时荧光定量HCV RNA与ALT检测在丙肝筛查中临床价值的研究
申宝玲
刘建华
李静丹
《标记免疫分析与临床》
CAS
2021
3
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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