五味扶正益精汤对苯并(a)芘致雄性大鼠生殖毒性的改善作用及机制研究

目的观察苯并芘(BaP)连续灌胃对雄性大鼠的生殖毒性并初步探讨五味扶正益精汤对其生殖毒性的改善作用机制。方法24只性成熟雄性Wistar大鼠随机分成空白组、染毒组和中药干预组,每组8只。空白组给予20 mg·kg^(-1)·d^(-1)食用玉米油灌胃,染毒组给予20 mg·kg^(-1)·d^(-1) BaP工作液灌胃,中药干预组给予同浓度BaP工作液和7.8 g·kg^(-1)·d^(-1)五味扶正益精汤进行保护性灌胃30d。采用精子染色质结构分析法(SCSA)检测精子DNA碎片率(DFI),酶联免疫吸附试验(ELISA)评估血清睾酮(T)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,WST-1法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)、一氧化氮(NO)的活性表达水平,TUNEL法检测大鼠睾丸生精细胞凋亡变化。结果与空白组相比,染毒组睾丸生精细胞凋亡增多、DFI上升,且血清SOD、ATP、T水平下降,MDA、NO、FSH、LH水平增高(P<0.05);与染毒组相比,中药干预组睾丸生精细胞凋亡减少、DFI下降,血清SOD、ATP、T水平升高,MDA、NO、FSH、LH水平降低(P<0.05)。结论五味扶正益精汤可以对BaP造成的生殖毒性起到改善作用,其作用机制可能与修复氧化应激损伤和抗生殖细胞凋亡,纠正性激素紊乱有关。

基于代谢组学探讨益肾通络方修复苯并(a)芘染毒大鼠精子DNA异常甲基化的机制

目的通过代谢组学探讨益肾通络方修复苯并(a)芘致精子DNA异常甲基化的作用机制。方法采用随机数字法将30只SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组、BaP染毒组及治疗组,每组大鼠各10只。除对照组外其余两组均按0.1mg/(kg·d)浓度的BaP进行染毒,持续60d;自BaP染毒第31天起,治疗组每日灌胃益肾通络方水煎液,共30d。末次给药后对3组大鼠实施乙醚吸入麻醉,取左侧睾丸制备睾丸样本,最后通过代谢组学技术对大鼠睾丸组织中代谢物的进行趋势分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。结果经趋势分析后发现有41个代谢物呈现良好的回调趋势。与染毒组比较,益肾通络方可上调其中的8个代谢物物(P<0.05),下调其中的33个代谢物物(P<0.05)。通过富集分析发现其主要代谢通路为胆碱代谢通路;甘油磷脂代谢通路;维生素的消化和吸收;硫胺素代谢以及维生素B6代谢共5条代谢通路。结论益肾通络方对BaP染毒诱导的精子DNA异常甲基化的治疗作用可能与改善睾丸中维生素B6以及胆碱和甘油磷脂的代谢活动有关。