ApoE基因多态性与中国人2型糖尿病及其肾病并发症的关系

目的 研究 Apo E基因多态性与中国人 2型糖尿病及其肾病并发症的关系。方法 以载脂蛋白 E(Apo E)基因为候选基因 ,运用聚合酶链反应——限制性片段长度多态性 (PCR- RFL P)方法检测了 2 6 5例 2型糖尿病患者 ,其中未合并肾病者 10 6例 ,合并肾病者 15 9例 ,后者又分为蛋白尿者 12 2例 ,肾功能不全者 37例及 110例非糖尿病对照者的Apo E基因型。结果 12型糖尿病合并肾病组与 2型糖尿病未合并肾病组相比 ,等位基因 ε2频率显著升高 (P=0 .0 0 894 ) ;基因型 E2 (E2 / 2 +E2 / 3)组频率也显著升高 (P=0 .0 0 194 )。 2 2型糖尿病组与非糖尿病对照组相比基因型频率及等位基因频率均无显著性差异 (均 P>0 .0 5 )。结论 Apo E等位基因 ε2可能是 2型糖尿病合并肾病的危险因子。Apo E基因多态性与中国人

我国小型水库现状及整治对策

根据大坝安全定期检查资料,这些水库大坝普遍存在着防洪标准低、稳定性差、渗漏严重、破损严重、管理缺位、设施不全、维修资金欠缺等问题。据统计我国小水库中病险水库2.90万座,病险率高达35%,制约了当地经济的发展,给人民群众的生命财产安全造成威胁。针对我国小型水库的安全现状和存在的问题,分析了病险小水库的特点与机理,提出了相应的整治措施。

粉煤灰对混凝土抗渗性能的影响

通过试验 ,论证粉煤灰对混凝土抗渗性能的影响 ,探讨混凝土最佳掺灰量 。

致密储层分析实验方法探讨——以三塘湖盆地芦草沟组为例

致密油勘探是当今热点,但由于致密油往往在非常规储层中,常规实验方法难以满足地质研究的需求,三塘湖盆地芦草沟组储层非常致密、岩性复杂且相变快,需要利用新技术新方法满足勘探开发实际需求。通过三塘湖盆地芦草沟组岩性识别及储层实验方法对比研究,利用岩心、全岩X衍射、扫描电镜、QEMSCAN扫描电镜、薄片、碳酸盐含量测定等方法组合,提出全岩X衍射为主鉴定成分,结合薄片、手标本解释成因,并参考区域环境特征等方法最终定名的岩石学鉴定方法,并利用铸体薄片、氩离子剖光扫描电镜、纳米CT,常规孔隙度与渗透率测定、GRI,高压压汞等方法优选组合,最终找到有效评价致密储层物性的方法组合,对三塘湖盆地芦草沟组致密油下一步勘探起到了积极作用,并对其它地区致密储层研究中实验方法的优选提供了较好的范例。

粉煤灰对混凝土的需水量、坍落度和泌水性的影响

研究了粉煤灰对新拌混凝土工作性能的影响。研究结果表明,随着粉煤灰掺量增加,胶凝材料的相对需水量将降低,坍落度增大,坍落度经时损失减小,泌水及离析得到改善。

CD90和IGF1R蛋白在原发性胆囊癌中的表达及意义

目的：探讨CD90、IGF1R蛋白产物在原发性胆囊癌中的表达特点及关系。方法：应用免疫组化S-P法检测36例原发性胆囊癌中CD90、IGF1R的阳性表达率,并以同期20例慢性胆囊炎作对照（对照组）。结果：（1）原发性胆囊癌CD90蛋白阳性表达率63.89%、IGF1R蛋白阳性率47.22%,均显著高于对照组的0%、10%：（2）CD90蛋白在有淋巴结远处转移、NevinⅣ-Ⅴ期患者中阳性率（79.17%）高于无转移、NevinⅠ-Ⅲ期的患者（33.33%）：IGF1R在低分化、有淋巴结远处转移阳性率（84.62%、62.50%）高于高中分化、无转移（26.09%、16.67%）：（3）IGF1R与CD90两者呈正相关（P〈0.05）：（4）CD90阳性（IGF1R阳性）患者生存率明显低于CD90阴性（IGF1R阴性）患者。结论：联合检测CD90、IGF1R蛋白在原发性胆囊癌中表达有助于反映原发性胆囊癌生物学特性、为预后判断提供参考指标。

survivin启动子调控肿瘤干细胞标记CD133基因siRNA增殖型溶瘤腺病毒的构建及对肝癌细胞生长的抑制作用

目的构建survivin启动子调控的靶向CD133基因的siRNA增殖型溶瘤腺病毒,研究其对肝癌细胞生长的影响。方法 RT-PCR法扩增survivin启动子,测序鉴定,双酶切连接,获得p H-XC2-survivin。酶切p H-XC2-survivin、p ZD55-CD133-siRNA获得survivin启动子表达框的亚克隆和CD133-siRNA基因表达框的亚克隆,连接获得survivin启动子调控的siRNA增殖型溶瘤腺病毒表达载体质粒p T-ZD55-CD133-siRNA。增殖型溶瘤腺病毒survivin-T-ZD55-CD133-siRNA经PCR和测序鉴定。qRT-PCR法检测CD133表达,Western blot法检测E1A,CCK-8法检测细胞生长,流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功构建增殖型溶瘤腺病毒survivin-T-ZD55-CD133-siRNA。qRT-PCR法检测CD133 mRNA明显下降,Western blot证实survivin-T-ZD55-CD133-siRNA在肿瘤细胞中表达E1A能抑制肝癌细胞CD133表达及生长。结论构建的增殖型溶瘤腺病毒可有效降低肝癌细胞CD133的表达,用于肝癌基因治疗的进一步研究。

无机粘结胶的物理力学性能及其应用

首先对无机粘结胶的物理力学性能进行研究，然后将其应用于普通混凝土和高强混凝土的粘结修补工程。无机粘结胶不仅具有很高的强度，而且具有与混凝土和钢材等相近的膨胀系数；无机粘结胶的力学性能优于混凝土，物理性能与混凝土接近，在混凝土修补工程中，能很好地将断裂混凝土修补完好，使其强度达到或超过原混凝土强度。

济南段黄河标准化堤防建设移民监理分析

对济南段黄河标准化堤防建设移民监理情况进行了分析,认为移民监理使移民工程更加规范化,弥补了业主与移民实施单位技术力量的不足,保证了移民工程的科学性、公正性。针对移民监理工作存在的问题,提出了以下建议:①健全移民管理机制;②努力提高监理队伍的整体素质。

Notch信号报告系统在前列腺肿瘤细胞系中的建立

目的在前列腺肿瘤细胞系LNCa P中建立Notch信号报告系统。方法采用In-Fusion酶系统将巨细胞病毒(CMV)启动子和Notch蛋白胞内结构域(ICD)细胞核内DNA结合蛋白CSL的8拷贝串联DNA序列克隆入p LVX-ac GFP-N1慢病毒载体,构建Notch信号报告重组慢病毒表达质粒(p LVX-8XCSL-ac GFP)。在人胚肾293T细胞中转染p LVX-8XCSL-ac GFP质粒或对照质粒p LVX-ac GFP,6 h后再转染Notch受体的细胞内结构域(NICD)的表达质粒p ETP-NICD(过表达NICD)或对照质粒p ETP。转染48 h后用荧光显微镜观察GFP的表达,用流式细胞仪进行荧光定量分析。然后将p LVX-8XCSL-ac GFP质粒及对照质粒包装成慢病毒转导前列腺癌细胞系LNCa P,72 h后荧光显微镜观察绿色荧光,用流式细胞仪分选出GFP荧光强度最强5%及最弱5%的细胞。提取这两部分细胞的RNA,采用qRT-PCR方法检测细胞中Notch1、Notch2以及Notch信号通路下游靶基因Hey1的表达。结果在转染p LVX-8XCSL-ac GFP的293T细胞中,转染p ETP-NICD的细胞荧光强度较转染p ETP对照质粒的细胞增加了约10倍;而在转染p LVX-ac GFP的293T细胞中,转染p ETP-NICD的细胞与转染p ETP对照质粒的细胞荧光强度无明显差异。根据p LVX-8XCSL-ac GFP荧光强度分选出的LNCa P细胞,荧光强度高的细胞Notch1、Notch2、Hey1表达高于荧光强度弱的细胞(P均<0.05)。结论在LNCa P细胞中p LVX-8XCSL-ac GFP可以作为报告Notch信号水平的有效工具。

同步荧光法测定血清维生素E

同步荧光扫描法测定血清维生素Ｅ有效地消除了溶剂拉曼光谱的干扰，提高了测定方法的灵敏度和准确性。维生素Ｅ含量在０．０１～２０．０μｇ／ｍｌ范围内与同步荧光峰高度成线性关系，ｒ＝０．９９９；回收率９９．９５％；批内ＣＶ２．２１％～２．４１％；批间ＣＶ２．８２％～２．９６％；该法操作简单、快速。

导数-同步荧光光谱法测定尿液肾上腺素和去甲肾上腺素

为了解决肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）氧化产物的荧光光谱严重重叠难题，将同步荧光与导数光谱两种技术结合起来用于尿液Ｅ、ＮＥ测定。结果发现，在激发波长与发射波长相差Δλ＝４０ｎｍ时获得的Ｅ、ＮＥ二阶导数－同步荧光光谱中，４５０ｎｍ处Ｅ的荧光强度的导数信号不受ＮＥ的干扰；４３２ｎｍ处，ＮＥ的荧光强度的导数信号不受Ｅ的干扰，Ｅ、ＮＥ含量在１～２００ｎｇ／ｍｌ范围内成线性关系；最低检测限为０．５ｎｇ／ｍｌ；批内ＣＶ３．２１％～３．９５％，批间ＣＶ４．２６％～５．１０％，Ｅ和ＮＥ的回收率分别为９４．９％～９５．４％、９４．７％～９６．３％；该法操作简单、快速、成本低廉，适合于％批量测定，是测定尿液Ｅ、ＮＥ较为理想的常规方法。

某排水隧洞设计招标评标办法分析与探讨

在水利工程设计招标中,需要针对设计的特点制定相应的评标办法,以便更好地选择设计单位并指导投标单位合理报价。本文结合某排水隧洞设计项目的特点,从评标因素选择及量化、投标人资格设定、报价得分计算等方面对评标办法进行了分析总结,为进一步提高招标效果,提出了建议。

如何实现传统农业向现代农业转变

一、传统农业和现代农业及其特点 传统农业就是农业发展史上沿传下来的生产习惯。按照长期以来形成的固有的方式去指挥农业、发展生产。其特点是：使用工具落后，科技含量低，生产力水平不高，以自给自足为主，不注重生活环境。思想观念落后，小富即安。现代农业就是用现代工业、现代科学技术和现代管理方法武装的农业。

解偶联蛋白3基因-55C→T变异与中国人体脂代谢、含量、分布及2型糖尿病的关系

目的 研究解偶联蛋白 3(uncoupling protein 3,UCP3)基因 - 5 5 C→ T变异与中国人体脂含量、体脂代谢、体脂分布及 2型糖尿病的关系。方法 用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性检测了 16 5名糖耐量正常者 (男 /女为 6 9/ 96 )及 15 1例 2型糖尿病患者 (男 /女为 6 2 / 89) UCP3基因 - 5 5 C→ T变异的基因型 ,核磁共振检测局部体脂含量 ,酶法及硫酸葡聚糖 -锰沉淀法测血总胆固醇及血高密度脂蛋白胆固醇 ,并用公式计算低密度脂蛋白胆固醇。结果 (1)非糖尿病中国人与白种人比较等位基因频率及基因型频率差异均无显著性 (P分别为 0 .112 0和 0 .0 6 4 6 ) ,与 Pima印地安人比较差异均有显著性 (P分别为 0 .0 10 5及 0 .0 314 )。 (2 )逐步回归分析发现 ,UCP3基因 - 5 5 C→ T变异的独立相关变量 :糖耐量正常男性组为血高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇 ,糖耐量正常女性组为股部脂肪面积 ,2型糖尿病男性组为血甘油三酯 ,2型糖尿病女性组为腰臀比。 (3) 2型糖尿病组与糖耐量正常组相比 ,等位基因频率的差异有显著性 (P为 0 .0 35 8)。携带 T等位基因发生 2型糖尿病的相对风险的比数比为 1.4 34(95 %可信区间为1.0 31～ 1.995 )。结论 UCP3基因 - 5 5 C→ T变异与中国人局部体脂含量、体脂代?

小分子干扰RNA沉默T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3表达对暴发性肝衰竭小鼠Kupffer细胞分泌细胞因子的影响

目的探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白家族3(Tim-3)的小分子干扰RNA(si RNA)质粒对暴发性肝衰竭小鼠肝Kupffer细胞活化的调节作用并探讨其相关机制。方法采用D-氨基半乳糖(D-Galactosamine,D-Gal N)和脂多糖(LPS)建立暴发性肝衰竭小鼠模型。将30只大鼠分成对照组及模型组,每组15只。分离所有小鼠Kupffer细胞,用特异性靶向Tim-3的si RNA片段沉默小鼠肝Kupffer细胞中的Tim-3,同时将模型组小鼠进一步分成空转染组、特异si RNA组及阴性si RNA组。采用Real time PCR和Western blot检测Tim-3的表达,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Tim-3沉默后Kupffer细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及IL-6的表达,并采用ELISA及Western blot检测核因子-κB(NF-κB)通路对炎性细胞因子表达的影响。结果模型组Tim-3 m RNA的表达显著高于对照组(48.3±6.8 vs.10.3±1.8,t=0.007,P<0.05),且特异si RNA组Tim-3 m RNA的表达(18.3±3.5)显著低于空转染组(58.3±7.5)及阴性si RNA组(57.3±7.1)的表达(F=118.5,P<0.05)。在转染后3、6、24 h,特异si RNA组中TNF-α(F=68.76、73.55、92.36,P均<0.05),IL-1β(F=32.1、86.5、112.3,P均<0.05)及IL-6(F=178.9、98.7、89.9,P均<0.05)的表达均显著高于空转染组及阴性si RNA组。同时,特异si RNA组的NF-κB蛋白的表达在转染3 h(F=48.9,P=0.020)、6 h(F=107.4,P=0.002)、24 h(F=148.9,P=0.001)均显着高于空转染组及阴性si RNA组。结论 Tim-3通过NF-κB蛋白表达参与了暴发性肝衰竭小鼠肝Kupffer细胞活化的调节。

尿LDH及其同工酶对上尿路梗阻病人肾功能的估价

为了了解尿乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）及其同工酶对上尿路梗阻病人肾功能判定的意义，对３１例单侧上尿路梗阻病人，采用比色法测定ＬＤＨ活性，电泳法测定尿ＬＤＨ同工酶。结果：轻、中、重度肾积水组和对照组ＬＤＨ活性分别为２８．２±１７．３、６８．９±３１．７、２２６．１±６６．３、２６．１±１６２ＩＵ／Ｌ，轻度肾积水组与对照组比较无显著性差异，中、重度组之间差异有显著性。轻度组和对照组ＬＤＨ同工酶均正常，中度组３例异常，重度组均异常，且梗阻解除后ＬＤＨ_１、ＬＤＨ_２相对量增加，尤以ＬＤＨ_１增加更明显，ＬＤＨ_４、ＬＤＨ_５有所下降。结果认为：尿ＬＤＨ及其同工酶测定可反映肾实质损害程度，并能估价肾功能恢复情况，可能成为肾功能可复性判定的重要指标之一。

应用免疫荧光技术诊断肌营养不良

目的 用免疫荧光技术对迪谢内 (DMD)、贝克 (BMD)、肢带 2D(LGMD2D)和肢带 2C(LGMD2C)型肌营养不良的致病基因编码产物dystrophin、α 肌聚糖和γ 肌聚糖进行检测 ,为临床对肌营养不良的确诊和分型建立特异性的实验诊断手段。方法 用抗dystrophin中央棒状区、C 末端和抗α 、γ 肌聚糖单克隆抗体 ,借助免疫荧光技术对患者骨骼肌细胞膜上的致病基因表达产物进行研究。结果 在 15例临床拟诊为肌营养不良的患者中确诊 9例为DMD ,4例BMD ,1例LGMD2D和 1例LGMD2C。结论 分析骨骼肌细胞膜上DMD、α 肌聚糖和γ 肌聚糖基因表达产物是诊断DMD/BMD、LGMD2D和LGMD2C型肌营养不良的可靠和特异手段。