Co-IP联合质谱分析筛选中华蜜蜂气味受体OR1和OR2的互作蛋白

【目的】中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是我国特有的蜜蜂品种,其高度灵敏的嗅觉系统能在复杂气味环境中识别群体内化学信号以及区分食物源散发的特异性气味分子,气味受体(Odorant receptors,ORs)在中蜂识别气味分子的行为过程中起到了重要而又关键的作用。通过分析筛选OR1和OR2的互作蛋白,为深入探究OR1和OR2蛋白在蜜蜂嗅觉系统中的功能提供理论依据。【方法】通过构建OR1和OR2基因的真核表达载体pFastBac-OR1和pFastBac-OR2载体,转染Sf9细胞,提取细胞总蛋白,利用免疫共沉淀(Co-IP)联合质谱分析技术筛选鉴定与OR1和OR2互作的细胞蛋白,并对这些互作蛋白进行GO功能注释、KEGG信号通路和蛋白互作网络分析。【结果】IP组和IgG组重组蛋白在细胞内得到正确表达,利用Co-IP联合质谱分析技术共筛选到273个与OR1互作的细胞蛋白和204个与OR2互作的细胞蛋白,主要为微管蛋白、热休克蛋白、核糖体蛋白等。对这些蛋白进行GO功能富积分析,发现这些蛋白质涉及多种生物学功能,包括RNA剪接、核糖体和能量运输有关。KEGG信号通路分析结果表明互作蛋白参与调节了多条细胞内的重要通路,包括核糖体、剪接体、RNA转运等与核糖体相关的通路,丙酮酸代谢、硫胺素新陈代谢、脂肪酸生物合成、淀粉和蔗糖代谢、FoxO信号通路,Hedgehog信号通路等。【结论】OR1和OR2可能通过与多种蛋白直接或间接的相互作用调控并影响其嗅觉感受。

中华蜜蜂Smoothened基因的鉴定、表达及生物信息学分析

旨在明确中华蜜蜂Smoothened基因(AcerSmo)的序列特征及表达特性,为进一步研究其在蜜蜂体内的功能奠定理论基础,对中华蜜蜂AcerSmo基因DNA序列进行扩增鉴定,运用多种生物信息学软件对其进行结构和功能分析,并采用RT-qRCR对中华蜜蜂不同组织和发育时期的表达特性进行检测。序列分析结果表明,基因cDNA全长3 495 bp(GenBank登录号:OP616035),其中开放阅读框(ORF)区域2 952 bp,共编码936个氨基酸。该蛋白理论分子质量为111.15 ku,理论等电点为8.82,属于不稳定的两性蛋白。该蛋白N-末端有一段含21个氨基酸的信号肽,有6个跨膜结构域,亚细胞定位主要在内质网和细胞核。该蛋白二级结构和三级结构以无规则卷曲(50.76%)为主,其次为α-螺旋(25.33%),从昆虫到哺乳动物,AcerSmo蛋白序列高度保守;荧光定量PCR结果表明,AcerSmo在30日龄中华蜜蜂不同组织中均存在表达,而在触角与头的表达量显著高于其他组织,在中华蜜蜂触角与头组织中,5日龄时AcerSmo的mRNA表达量最高。AcerSmo蛋白具有Smoothened蛋白的保守结构,且在触角中呈高丰度表达,推测AcerSmo基因可能在蜜蜂的嗅觉识别过程发挥着重要作用。

输血致医疗纠纷后医疗机构举证不利原因分析与对策

目的探讨输血导致医疗纠纷后医疗机构举证不利因素的原因和对策。方法通过对国家血液管理相关法律、法规的解读,结合医疗机构在临床治疗工作中的实际进行分析。结果医疗机构存在:(1)客观因素:现阶段国家相关法律、法规、条例、规范涉及不全面而导致医院举证困难;(2)主观因素:医疗机构自身未严格按照国家各项法律、法规、条例、规范执行而导致举证困难。结论通过行政主管部门对国家法律、法规、规范、条例中未涉及的方面进行细化和补充;建立和完善输血的社会保险机制,制定临床输血的各项质量管理目标,加强医疗机构执行国家法律法规力度和合理用血的管理,最大限度减少输血纠纷,保障临床用血安全。

谈素质教育对教师的要求

教师是人类永恒的职业,但社会对教师职业条件的选择并不是永恒的,时代对教师的要求越来越高.要对学生实施素质教育,必须首先提高教师的自身素质.……

简论门诊是健康教育的主战场

加强健康教育是新形势向医院提出的新要求。而门诊是整个医院的“前沿阵地”，是“主战场”．开展健康教育是门诊工作在新形势下必然的选择。健康教育已成为门诊工作中不可分割的重要组成部分，同治疗一样，健康教育有着十分重要的意义，这是对健康教育进行科学地、实事求是地分析的结果。

噻虫嗪对意大利蜜蜂田间毒性效应及残留分析

为评价噻虫嗪在大田环境下施用对意大利蜜蜂采集蜂的影响,本研究在田间种植的荞麦上施用田间推荐一倍量及半量噻虫嗪,以清水作为对照,监测各处理组意蜂采集蜂死亡数量、采集行为、采粉量的变化及蜜蜂体内、巢内蜂粮和蜂蜜农药残留量。倍量噻虫嗪处理组,暴露1 d、2 d、3 d、4 d,蜜蜂平均死亡数量分别为315.33±47.25、131.33.00±35.13、20.33±2.31和9.00±1.41头,均显著高于对照组(P<0.05);暴露0 d、1 d、2 d,访花蜜蜂数量分别为1.40±0.49、1.60±0.49和1.20±0.40头,显著低于对照组(P<0.05);暴露1 d,蜜蜂归巢数量为27.58±10.50头,显著低于对照组(P<0.05)。半量噻虫嗪处理组,暴露1 d,蜜蜂平均死亡数量为99.00±22.11头,显著高于对照组(P<0.05);暴露0 d,访花蜜蜂数量为2.00±0.63头,显著低于对照组(P<0.05)。整个试验期间,各处理组的蜜蜂出勤量和采粉量与对照组均无显著差异(P>0.05)。倍量噻虫嗪处理后,暴露9 d,蜜蜂体内噻虫嗪残留量为10.66±0.02μg/kg,暴露20 d,蜂蜜和蜂粮中噻虫嗪残留量分别为2.82±0.22μg/kg,11.95±0.5μg/kg,均显著高于对照组(P<0.05);半量噻虫嗪处理后,暴露9 d,蜜蜂体内噻虫嗪残留量为9.94±0.24μg/kg,显著高于对照组(P<0.05),暴露20 d,蜂蜜和蜂粮中噻虫嗪残留量分别为0.67±0.05μg/kg,3.83±0.2μg/kg,与对照组无显著差异(P>0.05)。且得到噻虫嗪在蜜蜂体内、蜂蜜和蜂粮中的半衰期分别为2.33~3.02 d、4.8~9.5 d和5.3~5.6 d。结果为噻虫嗪在田间科学合理使用提供理论依据。

程控交换机维护与常见故障处理

虽然在交换机运行过程中出现种种故障是在所难免的,然而,在故障出现后,维护人员应该迅速地进行处理,尽快查处故障点,从而使故障尽快排除。但是,了解交换机故障的类型是分析和处理故障的前提所在。在本文中,笔者首先介绍了故障的几种分类,在此基础上以故障处理为基础对故障处理分析和处理的方法进行探讨。

谈如何使高中政治教学更高效

高中思想政治课教学实现高效化是每一位任课教师都关注的主题,世界经济快速发展、世界政治格局持续动荡的当今时代,高中思想政治课要不断突破现有的教学水平,获得更高更好的教学效果就要从理论的高度进行统筹布局,在实践层面积极改革实践,在个人层面不断学习提高教学水平,如此才能使得高中思想政治课教学效果不断提升。

思想政治课运用网络教学要处理好几个矛盾

进入21世纪，由于信息技术渗透到各个领域，网络课成为了校园教学的“时髦”。在网络教学方兴未艾之时，我校的非信息技术课运用网络教学，首当其冲的是思想政治课。

实现文言文的教学价值——以《〈论语〉十则》为例

《〈论语〉十则》分别引自《论语》中的《学而》、《为政》、《里仁》、《述而》、《泰伯》、《子罕》、《卫灵公》等七个篇目共十则内容，主要涉及求知的态度、学习方法和修身做人等方面。对于《〈论语〉十则》的教学，传统的做法仅仅把它作为学习古汉语的语料．讲解一下文言词句，介绍孔子所倡导的学习态度、学习方法等，对该篇目的教学价值没有全面把握。如何有效地实现这类篇目的教学价值呢？

库存前去除全血中的白细胞的临床应用探讨

目的：为了探讨库存前去除全血中的白细胞即少白细胞的红细胞在输血过程及输血后发生输血反应的状况及输注效果。方法：采用手工制备离心去白膜法。采全血1560袋(每袋300ml)去除其中自细胞为A组；1560袋(每袋300ml)全血为B组；将A、B两组在有效期内随机输注有2次以上输血史的受血者。同时观察全血与少白细胞的红细胞(各60例)输血前后红细胞参数的变化。结果：A、B两组共计3120份血液输血反应率34人(1．1％)，1560份全血反应率26人(1．7％)，明显高于少白细胞的红细胞8例(O．5％)；全血发热患者14例(0．9％)也高于少白细胞的红细胞4例(0．3％)。全血与少白细胞的红细胞输前、输后结果无显著性差异P>O．05(t检验)。结论：少白细胞的红细胞能降低输血反应及其它相关性疾病，同时不会降低疗效而应在临床上大力推广应用。

维生素B_(12)联合鼠神经生长因子治疗脑瘫患儿的疗效

目的研究维生素B_(12)(Vit B_(12))联合鼠神经生长因子治疗脑瘫患儿的疗效及对细胞凋亡的影响。方法选择64例痉挛型脑瘫患儿,随机分为对照组(接受鼠神经生长因子治疗)和观察组(接受Vit B_(12)联合鼠神经生长因子治疗)。治疗前及治疗后6个月,分别进行粗大运动功能分级系统(GMFCS)分级、粗大运动功能评估量表88项(GMFM-88)评分和改良Tardieu量表(MTS)评分,用经颅彩色多普勒检测2组患儿大脑中动脉(MCA)的收缩期峰流速(V_(s))、平均血流速(V_(m))、血管阻力指数(RI),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、Vit B_(12)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平。结果治疗后,观察组患儿的GMFCS分级、MTS评分、MCA的RI及血清Hcy、caspase-3、Bax水平均低于对照组,GMFM-88评分、MCA的V_(s)及V_(m)、血清Vit B_(12)水平高于对照组。结论Vit B_(12)联合鼠神经生长因子治疗痉挛型脑瘫能够改善患儿痉挛状态,可能与降低Hcy含量并抑制细胞凋亡有关。

西双版纳州成分输血的现状及临床应用评价

目的：探讨成分输血在临床应用的情况及效果。方法：通过使用进口冷冻离心机，用物理方法手工制备浓缩红细胞、晶体盐红细胞 (统称 RBC)、浓缩血小板 (PC)、新鲜冰冻血浆 (FFP)等成分。结果： 1999年临床成分输用率 26.6％，其中 RBC、 FFP、 PC各占 19.4％、 5.3％、 1.9％，输血反应率由 1998年使用全血的 7‰降至 1999年全血及成分用量的 3.5‰。全血与 RBC输后 1h测定 Hb值无显著差异 (P>0.05)， 47U pc治疗 7例血小板 (PLT)低于 30× 109／ L的患者，输后 1h PLT计数均不同程度增高。结论：血液成分因其浓度高而纯，能提高疗效，降低输血反应率及一血多用，减少血液浪费。

蜜蜂对梨和油菜花朵挥发性气味物质的响应研究

【目的】探究同花期的酥梨花和油菜花挥发性气味物质的种类和含量的差异,筛选影响蜜蜂采集偏好的挥发性气味物质,开发能刺激蜜蜂给梨树授粉的诱导剂,也为定向筛选梨树授粉蜜蜂品种提供理论依据。【方法】利用顶空固相微萃取(Solid phase microextraction,SPME)和气相色谱-质谱联用技术(Gas chromatograph-mass spectrometer,GC-MS)分析砀山酥梨Pyrus bretschneideri cv.Dangshansu和甘蓝型油菜Brassica napus的花朵挥发性气味物质,然后利用触角电位技术(Electroantennography,EAG)和Y型嗅觉仪实验分析上述鉴定的气味物质对中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称中蜂)和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称意蜂)的影响。【结果】梨花大蕾期、初绽期和盛开期鉴定出挥发性化合物均为52种,油菜花3个花期鉴定出挥发性化合物分别为73、73和69种;梨和油菜花3个花期中特有的挥发性气味物质分别为40和61种;它们共有挥发性气味物质为12种,梨花3个花期中乙偶姻和1,3-二叔丁基苯相对含量均高于9%,苯甲酸相对百分含量3个花期均差异显著(P<0.05);油菜中乙偶姻、1-辛醇、1,3-二叔丁基苯和2,2,4-三甲基戊二醇异丁酯相对百分含量3个花期均差异显著(P<0.05)。3个花期中,砀山酥梨和甘蓝型油菜花共有的挥发性气味物质中乙偶姻相对含量差异均极显著(P<0.01)。相较于石蜡油,中蜂和意蜂触角对所测试的71种挥发性气味物质均产生电信号响应,其中中蜂对乙酸、丙酸、异戊醇、1-戊烯-3-醇和异己酸乙酯反应较强,意蜂对乙酸、丙酸、异丁酸、乙二醇单异丁醚和异己酸乙酯反应较强。中蜂和意蜂触角对其中22种挥发性气味物质的相对响应值差异显著(P<0.05)。EAG实验表明,中蜂对苯甲醇、邻苯二甲酸二异丁酯、2-羟基-3-甲基戊酸甲酯、辛酸、异戊醇、2-甲基丁醇、芳樟醇、十一烷、十二烷、十五烷和十六烷的相对响应值显著高于意蜂(P<0.05),对苯丙酸乙酯、茴香酸乙酯和1-戊烯-3-醇响应值极显著高于意蜂(P<0.01);意蜂对1,3-二叔丁基苯、辛酸乙酯、乙偶姻、丙酸、己酸和二甲基二硫相对响应值显著高于中蜂(P<0.05),对异丁酸和乙二醇单异丁醚响应值极显著高于中蜂(P<0.01)。在Y型嗅觉仪实验中,中蜂对苯乙醇、苯甲酸甲酯、长叶环烯和芳樟醇的选择率显著高于对照组(P<0.05);对二甲基三硫、乙酸的选择率显著低于对照组(P<0.05)。意蜂对苯甲酸甲酯、甲基庚烯酮、α-法尼烯、植酮、2-甲基丁酸乙酯和异戊醇的选择率显著高于对照组(P<0.05);对二甲基二硫、乙偶姻、乙酸、2-甲基丁酸、1-辛烯-3-醇和辛醇的选择率显著低于对照组(P<0.05)。【结论】梨花中释放的乙偶姻对蜜蜂有趋避作用,油菜花中释放的苯甲酸甲酯对蜜蜂有引诱作用,这可能是影响蜜蜂在梨花和油菜同花期时偏好采集油菜花的原因之一。

12406例输血患者临床输血不良反应调查分析

目的提高临床医护人员对各类输血反应的认识和处理能力,降低输血反应的发生。方法对西双版纳州人民医院2007年1月-2013年12月发生的输血反应进行回顾分析。结果 12 406例输血患者中,发生输血反应111例,总反应率为0.89%,其中输注血浆反应率为1.16%,红细胞悬液反应率为0.81%,血小板、冷沉淀及自体输血无输血反应发生。输血反应类型以过敏性反应居多,占70.27%,非溶血性发热性反应次之,占24.32%,其他反应占5.41%。结论输血反应主要以过敏性输血反应和非溶血性发热性输血反应为主,科学合理用血能有效降低输血不良反应的发生率。

苜蓿田喷施高剂量吡虫啉对蜜蜂采集行为的影响

为研究在大田环境中喷施高剂量吡虫啉对蜜蜂采集行为的影响,在山西省太原市苜蓿田选择相互隔离的地块分别喷施推荐剂量、推荐剂量2倍及推荐剂量4倍的吡虫啉,检测吡虫啉在苜蓿花、叶中的残留情况,考察各处理区内蜜蜂采集、出归巢等情况。结果表明,吡虫啉在苜蓿叶中的降解速度高于在花中的降解速度,降解时间随施药剂量的升高而延长;当提高施药剂量后,蜜蜂在短期内死亡量增加,单花采集时间延长,采集效率降低,携粉归巢蜂量降低,随着药后时间的延长,不同剂量处理间的差距逐渐减小。

引导式教育联合家属参与护理在脑瘫儿童康复护理中的应用效果分析

目的研究引导式教育和家属参与护理联合用于小儿脑瘫中的价值.方法选取2018年2月—2020年1月该院接诊的脑瘫患儿88例,用奇偶数字分组法均分为两组.研究组联用引导式教育和家属参与护理,对照组实施常规康复护理.对比PSQ评分等指标.结果研究组干预后PSQ评分(41.08±4.29)分、GMFM评分(235.14±35.08)分、Gesell评分(68.92±5.06)分,优于对照组(61.97±4.85)分、(172.69±34.46)分、(54.37±4.91)分,差异有统计学意义(P<0.05).研究组家长满意度97.73%,优于对照组84.09%,差异有统计学意义(P<0.05).结论于小儿脑瘫康复护理中联用引导式教育和家属参与护理法,可促进患儿运动功能的恢复,心理问题的解决,智力的发育,及家长满意度的改善,建议推广.