人芽囊原虫滋养体的形态及其与致病的关系

为了解人芽囊原虫滋养体的形态及其与致病关系,于2011年3月至2012年3月采集就诊患者新鲜粪便686份(无症状者粪便标本663份,有症状者粪便标本23份),直接涂片法和碘染色法制作玻片标本,光镜下观察人芽囊原虫感染情况和形态。从阳性的无症状者粪便中分离人芽囊原虫,分别接种到洛克氏液-鸡蛋-血清培养基(LES培养基)和10只6-8周龄雌性昆明小鼠腹腔中,观察体内外不同环境中人芽囊原虫滋养体的形态变化。结果显示,686份粪便标本中阳性者103份,其中无症状者粪便标本阳性80份,有症状者粪便标本阳性23份。光镜下可见,无症状者粪便标本人芽囊原虫的颗粒型和空泡型滋养体较小,呈卵圆形,内含多个颗粒,平均直径为(13.2±0.2)μm;有症状者粪便标本人芽囊原虫的颗粒型与空泡型滋养体较大,易见分裂相虫体,可查见阿米巴型滋养体,外形多样,颗粒数十个,体积较大,平均直径为(28.0±0.3)μm。无症状者粪便标本人芽囊原虫经体外培养后,颗粒型和空泡型滋养体形态变化不大;而接种于小鼠腹腔后,两型滋养体的形态结构发生改变,虫体增大,颗粒变多,外形多样,其形态与有症状者粪便标本的人芽囊原虫相似。

湖南浏阳县卫氏并殖吸虫第二中间宿主感染情况报告

目的 :查明疫区卫氏并殖吸虫第二中间宿主感染情况 ,为防治提供流行病学资料。方法 :从湖南浏阳县白沙乡双坪村的溪沟采回凹肢华溪蟹 ,常规镜检囊蚴 ,按体质量、性别分别统计溪蟹的感染率、感染度以及不同部位检出情况。结果 :溪蟹感染率 93.0 0 % (93/ 10 0 ) ,每蟹、每克含囊蚴数分别是 5 1.96、 6 .45个。囊蚴在蟹体的分布 ,以头胸肌最多 (4 4.97% ) ,其次是步足 (2 6 .14% )、螯肢 (15 .0 9% )、腮 (5 .9% )、内脏 (5 .4% )、肝 (1.99% )和腹部 (0 .46 % )。上述各部位的感染率依次是 :95 .70 % ,87.10 % ,82 .80 % ,81.72 % ,78.49% ,5 3.76 %和 15 .0 5 %。结论 :按疫区等级划分 ,该流行区属超高度并殖吸虫疫源地。

《感染与免疫》整合课程教学的探讨

医学课程整合打破了基础医学与临床医学的界线，加强学科之间，基础与临床之间的联系，有利于构建完善的知识结构，培养学生的创新精神和能力，适应医学科学新发展对医学人才培养的要求。为此近年来本校开展了整合课程改革探索，现将《感染与免疫》

LPSp对不同免疫方案中狂犬病毒抗原免疫效果影响的实验研究

目的研究革兰阴性非致病菌成团泛菌脂多糖(LPSp)作为狂犬病疫苗佐剂的免疫效果。方法将120只Balb/c小鼠随机分为空白组、LPSp对照组、铝佐剂疫苗组、狂犬病毒蛋白组、LPSp实验组各24只,其中后四组分别背部注射LPSp、铝佐剂疫苗、狂犬病毒蛋白及狂犬病毒蛋白+LPSp进行12、4、次免疫(各8只);空白组注射等量生理盐水。另取8只小鼠为常规组,按铝佐剂疫苗组免疫4次,并于第28天行第5次免疫。各组均在初次免疫后第7、14、21、304、56、0天通过小鼠眼内眦静脉采血,分离血清,用ELISA法检测血清抗狂犬病毒IgGI、gM滴度。结果①免疫2、4次后LPSp实验组IgG抗体滴度均显著高于狂犬病毒蛋白组和铝佐剂疫苗组(P<0.05),且4次免疫后抗体滴度在第60天仍呈上升趋势,而铝佐剂疫苗组IgG抗体滴度在45 d已达高峰,其后逐渐下降;各组免疫12、次者免疫效果均欠佳,免疫2次后LPSp实验组IgG抗体滴度达高峰时间显著早于狂犬病毒蛋白组和铝佐剂疫苗组(P<0.05)。②LPSp实验组免疫4次者各时间点IgG抗体滴度均显著高于常规组,且可维持更长时间(P<0.05);LPSp实验组免疫2次者IgG抗体滴度与铝佐剂疫苗组免疫4次者效果相当。③LPSp实验组免疫1次后第7天IgM抗体滴度显著高于狂犬病毒蛋白组与铝佐剂疫苗组(P<0.05),第7天后IgM抗体滴度下降,但再次免疫时又出现以上趋势。结论 LPSp作为狂犬病毒蛋白疫苗的佐剂可显著提高小鼠产生抗狂犬病毒IgGI、gM抗体的滴度,且可延长抗体的维持时间、减少接种次数,其效果优于铝佐剂。

胆道蛔虫症伴发胰腺炎一例

患者男性,28岁,广西博白县农民.诉2000年8月中旬出现上腹部阵发性疼痛,多呈绞痛,偶感钻痛,并向背部、右肩胛部及两侧腰部放射,每次持续1～2 h,伴恶心、呕吐、吐出胃内容物.

基于核糖体DNA ITS区和COX1基因鉴别华支睾吸虫囊蚴

目的基于核糖体DNA ITS区和COX1基因,PCR鉴别鱼体内华支睾吸虫囊蚴。方法于2013年5月底采集广西横县某水库的麦穗鱼,用消化法从鱼肉组织中分离单个华支睾吸虫囊蚴及其他吸虫囊蚴;PCR检测华支睾吸虫核糖体DNA ITS区和COX1基因,并分析检测的灵敏性和特异性。结果分离到不同发育阶段的华支睾吸虫囊蚴并经PCR检测证实。用针对核糖体DNA ITS区和COX1基因的PCR均能检测到单个华支睾吸虫囊蚴DNA,其特异性扩增条带大小分别为437/549、156/249和195/166 bp。用核糖体DNA ITS1和ITS2区的通用引物和特异性引物扩增华支睾吸虫囊蚴DNA的阳性数之比分别为0.905和0.952。针对COX1基因的特异性扩增均检测到目标DNA,并且扩增条带较亮。用该方法对其他吸虫囊蚴检测的对比试验显示特异性引物均未出现任何非特异性扩增反应;用ITS区通用引物检测其他吸虫囊蚴则显示出严重的非特异性扩增反应。结论通过形态观察结合PCR法识别出了不同发育阶段的华支睾吸虫囊蚴。用华支睾吸虫核糖体DNA ITS区的特异性引物进行PCR检测的灵敏性和特异性均优于相应通用引物。针对COX1基因的特异性PCR检测的灵敏性和特异性与核糖体DNA ITS区的检测结果相当。

成团泛菌低分子脂多糖的急性毒性、刺激性、致敏性及遗传毒性评估

本研究对成团泛菌低分子脂多糖(Pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp)的安全性进行初步评估。本研究采用一次限量法,用昆明种小鼠进行LPSp急性经口毒性试验,了解LPSp的急性毒性;采用新西兰兔分别进行LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验,了解LPSp的皮肤和粘膜刺激性;采用豚鼠进行LPSp皮肤变态反应试验,了解LPSp的致敏性;应用平板掺入法进行鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验和小鼠骨髓细胞微核试验考察LPSp的遗传危害。急性毒性试验结果显示,LPSp对小鼠经口一次灌胃的LD50大于5000mg/kg体重,属实际无毒级别;LPSp急性和多次皮肤刺激性试验以及急性眼刺激性试验结果显示,皮肤刺激和眼刺激积分均为0分,LPSp对皮肤无刺激性、对眼睛无急性刺激性;在皮肤变态反应试验中,LPSp在各观察时间点的皮肤变态反应积分均为0分,其致敏率均为0%,说明LPSp对豚鼠无致敏性;LPSp的鼠伤寒沙门氏菌/回复突变试验结果呈阴性(P>0.05);LPSp的小鼠骨髓细胞微核试验结果亦呈阴性,LPSp各剂量组的微核发生率与阴性对照组未见统计学差异(P>0.05),而与阳性对照组有明显差异(P<0.01)。本研究结果表明,在本实验剂量范围内,LPSp对小鼠经口毒性极低,属实际无毒级别,对家兔皮肤和眼睛无明显刺激性,对豚鼠无致敏性,对所试菌株和小鼠体细胞无诱变性和致突变性。

华支睾吸虫排泄-分泌产物对小鼠巨噬细胞一氧化氮产生和核转录因子κB活化的影响

目的研究华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)排泄-分泌产物(ESPs)对小鼠巨噬细胞系RAW264.7一氧化氮(NO)产生与核转录因子κB(NF-κB)活化的影响。方法用20μg/ml华支睾吸虫ESPs水溶性浓缩物及其有机溶剂提取物(ESPs-ex)和0.1μg/ml明尼苏达沙门氏杆菌脂多糖(LPS-SM)分别刺激RAW264.7细胞,未刺激对照组加入等量Hank’s平衡盐缓冲液(HBSS)。实验同时用0.3 mmol/L诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)抑制剂SMT作为干预。细胞培养18 h后,用Griess法检测各组细胞培养上清液NO2-浓度。将p Ni Fty2-SEAP质粒转染至4组刺激后RAW264.7细胞,培养18 h后,检测培养上清液中可溶性胚胎碱性磷酸酶(SEAP)的吸光度(A620值),倒置显微镜观察细胞内SEAP催化显色情况。结果经ESPs-ex和LPS-SM刺激后,细胞培养上清液中NO2-浓度分别为(14.30±1.62)和(14.10±2.17)μmol/L,均较未刺激对照组[(7.70±0.95)μmol/L]显著增加(P<0.05);加入SMT后,两组NO2-浓度显著下降,分别为(8.97±0.81)和(4.96±1.36)μmol/L(均P<0.05)。经ESPs刺激后,上清液中NO2-浓度为(4.06±0.62)μmol/L,较未刺激对照组显著降低(P<0.05);加入SMT后,NO2-浓度为(3.99±0.87)μmol/L,无明显变化(P>0.05)。ESPs刺激后,上清液SEAP的A620值为0.836±0.005,显著高于未刺激对照组(0.097±0.009)(P<0.05);镜下可见细胞内出现广泛、强烈的蓝色显色反应。ESPs-ex和LPS刺激后,上清液SEAP的A620值分别为0.112±0.004和0.116±0.009,略高于未刺激对照组(P>0.05);镜下见部分细胞内出现蓝色显色反应。结论华支睾吸虫ESPs能够促进RAW264.7细胞活化NF-κB,其水溶性浓缩物可抑制NO产生,ESPs-ex和LPS-SM可促进NO产生。

寄生虫病原相关分子模式的研究进展

随着对传统病原微生物的病原相关分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)认识的深入,发现寄生虫PAMPs存在的线索。寄生虫PAMPs在分子结构、与受体的结合方式、胞内信号转导途径和诱导效应等方面与传统PAMPs均有所差异。本文从上述方面综述了寄生虫PAMPs的研究进展。

以本科医学教育标准为航标的《人体寄生虫学》教学改革探索

依据《本科医学教育标准—临床医学专业(试行)》,结合广西寄生虫病流行的实际情况,从教学内容、教学方法、教学手段和学生成绩评价方法等四方面着手,对《人体寄生虫学》进行教学改革与探索,以提高学生自主学习和终身学习的能力。

国家级寄生虫病综合防治示范区的防治效果及措施评价

目的对广西容县寄生虫病综合防治示范区的效果和措施进行评价,为探索防治新模式提供科学依据。方法采用改良加藤法,对3岁以上的居民进行土源性线虫检查;采用阿苯达唑咀嚼片和甲苯咪唑咀嚼片驱虫;开展以实物为证据的视觉教育为主的健康教育活动;采用问卷调查方式进行卫生知识和卫生行为调查;收集改水改厕人群覆盖情况等资料,同时采用问卷调查方式抽查。结果 2006～2011年群众服药驱虫共2 065 579人次;其中2006～2009年服药率为78.00%～88.06%。发放宣传资料和信息等共190万多份。群众知晓率从2006年的71.60%提高到2011年的93.33%,卫生行为合格率从74.40%提高到93.33%。改水受益人口共69万多人,改水累计受益率为96.93%;修建无害化厕所共10万多户,卫生厕所普及率为87.91%;改造洼地共5 000多处,清理疏通沟渠共40公里,清理畜圈共15万多处。寄生虫总感染率从2006年的30.10%降至2011年的3.56%,呈大幅度下降。结论以实物为证据的视觉教育为主的健康教育,充分发掘农、林、水和爱卫部门改善环境卫生为基础的卫生资源,适当的群体药物驱虫,三种措施联合实施能够快速有效控制寄生虫病流行。

趣味教学法在医学寄生虫学教学中的应用——以寄生虫之歌为例

为尊重学生在学习中的主体地位,将趣味性教学融入传统教学中,达到提高学生的学习兴趣并促进其自主学习的目的。本研究将广西医科大学2012级临床医学专业4个班级随机分成实验组和对照组。对照组采用传统教学方法,实验组将趣味活动融入传统教学。采用成绩统计分析和设计问卷调查等方式进行教学效果评估。发现学生对趣味教学法的满意度优于传统教学法(P<0.01),并且实验组考试成绩也高于对照组(P<0.01)。说明趣味教学更能激发学生的学习兴趣,促进学生自主学习,提高教学效果。

南宁市某高校学生和医院就诊者人芽囊原虫感染情况调查

目的了解广西南宁市在校学生和医院就诊者人芽囊原虫感染状况。方法随机抽取广西医科大学在校大学生若干名,以及医院就诊者,采用生理盐水涂片法和碘染色法对以上人群进行粪便检查人芽囊原虫包囊。结果本次共调查5 346人,人芽囊原虫感染者895人,总感染率为16.74%,男、女性总感染率分别为13.56%和22.90%。从性别分布看,两组人群女性感染率均高于男性,尤以医院就诊人群中的女性更为明显。在校大学生3个年级共调查1 433人,其中男性为563人,女性为870人;人芽囊原虫感染者共214人,感染率为14.93%;男、女性感染率分别为14.74%和15.06%。医院就诊者3 913人,其中男性2 962人,女性951人;人芽囊原虫感染者共681人,感染率为17.40%;男、女性感染率分别为13.34%和30.07%。该人群感染者的年龄分布为,0～年龄组人芽囊原虫感染率最高,达87.18%;50～及60～年龄组感染率次之,分别为58.87%和56.20%。结论广西南宁市在校大学生和医院就诊者人芽囊原虫的感染率较高,女性感染率高于男性,儿童及老年人感染率高于其他年龄组。

LPSp对狂犬病疫苗佐剂效应及安全性研究

目的研究成团泛菌脂多糖(LPSp)作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。方法将Balb/c小鼠32只随机分为空白对照组(注射生理盐水)、LPSp对照组(注射LPSp)、狂犬病病毒蛋白组(注射狂犬病病毒蛋白)、LPSp实验组(注射LPSp和狂犬病病毒蛋白),分别在第0、7、15、21天经背部皮下免疫接种共4次。在免疫接种后第7、14、21、30、45、60天采集小鼠眼内眦静脉血,分离血清,末次采血后处死小鼠。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗狂犬病病毒IgG,并进行血液学、血液生化、脏器指数等检查。结果免疫接种4次后,LPSp能明显增强狂犬病病毒蛋白免疫小鼠产生IgG的能力(P<0.05);实验期间各组小鼠未发现明显异常表现,体质量、血液学、血液生化和脏器指数等各组间未见明显差异(P>0.05)。结论 LPSp对狂犬病病毒蛋白具有较好佐剂效应;在本实验条件下,LPSp对小鼠安全性好。

成团泛菌脂多糖对两种狂犬病疫苗免疫效果的影响

目的:研究成团泛菌脂多糖(pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp)对两种狂犬病疫苗产生抗体的影响,了解LPSp作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。方法:将Balb/c小鼠随机分为空白对照组、LPSp对照组、纯蛋白疫苗组、铝佐剂疫苗组、LPSp+纯蛋白疫苗组、LPSp+铝佐剂疫苗组6组,背部皮下免疫4次。免疫后第7、14、21、30、45、60天分别经小鼠眼内眦静脉采血,ELISA法检测血清抗狂犬病毒IgG滴度。结果:免疫4次后,LPSp能明显增强纯蛋白疫苗产生抗体的能力(P<0.05);对铝佐剂疫苗免疫效果影响不大(P>0.05)。结论:LPSp对纯蛋白疫苗免疫小鼠产生抗体具有较强促进作用,对铝佐剂疫苗产生抗体无明显促进作用。

广西南宁部分医院就诊者寄生虫感染情况分析

目的了解医院主动就诊患者寄生虫感染情况。方法采用醛醚沉淀法和碘染色法进行粪便检查,查出虫卵和包囊为阳性。结果受检者共4 327人,阳性为1 800人,发现肝吸虫、人芽囊原虫、钩虫、蛔虫、鞭虫。溶组织内阿米巴、粪类圆线虫、蓝氏贾第鞭毛虫、蛲虫、等孢子球虫共10个虫种,其中华支睾吸虫感染为894人,感染率为19.7%,人芽囊原虫感染为681人,感染率为15.73%,钩虫感染为132人,感染率为3.05%,寄生虫感染以青壮年居多,男女性感染差异均有统计学意义。多虫感染的176人中,肝吸虫合并人芽囊原虫感染为102人,肝吸虫合并钩虫感染为19人,人芽囊原虫合并钩虫感染为13人。结论广西当地寄生虫虫种多,居民感染人数多,肝吸虫与人芽囊原虫感染尤为严重,属优势虫种;土源性线虫感染处于较低水平,呈散在分布。

广西三地广州管圆线虫亲缘关系研究

目的分析和判定广西钦州、靖西、藤县三地广州管圆线虫（Angiostrongylus cantonensis）分离株的基因差异和系统发生关系。方法从广西钦州、靖西、藤县采集野生蛞蝓。分离广州管圆线虫三期幼虫。提取广州管圆线虫三期幼虫的基因组DNA，特异性扩增内转录间隔区2（intemal transcribed spaeer2，ITS2）基因并测序，与GenBank中的广州管圆线虫序列进行比对．分析基因变异。应用Mega5．05软件构建系统发生树，分析系统发生关系。结果从三地共采集623条蛞蝓．其中阳性蛞蝓共283条．平均感染率为45．4％。其中靖西感染率最高，为52．4％；藤县和钦州感染率分别为49．1％和19．3％。特异性扩增的ITS2长度为700bp。GenBank检索获广州管圆线虫（A．cantonensis）、A．du9iardini以及脉居管圆线虫（A．vasomm）的相应序列为对照序列，枯病菌（Rhizoctonia solani）的相应序列为构建系统发生树的根（root）序列。广州管圆线虫钦州分离株、靖西分离株、藤县分离株与GenBank中的广州管圆线虫序列的同源性分别为99．5％、99．5％和99．7％；靖西分离株与藤县分离株、GenBank中广州管圆线虫序列的同源性分别为100％和99．5％；藤县分离株与及GenBank中广州管圆线虫序列的同源性为99．5％。三个分离株与A．dujardini、脉居管圆线虫（A．vasorum）的同源性低。以广州管圆线虫为标准株，靖西分离株有11处碱基变异，变异率为1．93％：钦州分离株有6处，变异率为1．05％；藤县分离株有15处，变异率为2．63％，TG短序列重复插入突变明显。在最大似然法（maximum likelihood method）和邻接法（neighbor-joining method）构建的系统发生树上，靖西、钦州及藤县的分离株与广州管圆线虫同属一个分枝，系统发生关系较近，A．duiardini、脉居管圆线虫居于另一分枝。结论广西三地的广州管圆线虫分离株存在较高的遗传多态性．与GenBank中的广州管圆线虫同源性高．亲缘关系近．初步判断三个分离株与GenBank中广州管圆线虫为同一虫种。