食管鳞状细胞癌组织中HSP27蛋白表达与患者临床病理参数相关性研究

目的探讨HSP27蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法应用Envision免疫组织化学染色方法检测食管鳞状细胞癌及癌旁组织中HSP27表达情况。结果 HSP27阳性表达主要定位于细胞质,其在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。HSP27阳性表达与T分期和病理分级有关(P<0.05);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型以及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 HSP27阳性表达情况与食管鳞状细胞癌T分期和病理分级有关,提示HSP27可能作为判断食管癌预后以及治疗的新指标。

PKM2在TGF-β1诱导的食管癌细胞侵袭、迁移中的作用

目的探讨丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移中的作用机制。方法在细胞培养基中加入TGF-β1刺激ESCC细胞,以加入PBS的ESCC细胞作为Control组,检测其侵袭、迁移能力及PKM2蛋白表达水平变化;在过表达PKM2的ESCC细胞中加入TGF-β1抑制剂,以加入PBS及TGF-β1抑制剂的ESCC细胞作为Control组,检测ESCC细胞侵袭、迁移能力变化。结果 TGF-β1刺激ESCC细胞后,其侵袭、迁移能力增强,PKM2蛋白水平表达增高,与Control组细胞比较差异有统计学意义(P<0.05);过表达PKM2减弱了TGF-β1抑制剂对ESCC细胞侵袭、迁移能力的抑制作用,与Control组细胞比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PKM2促进TGF-β1诱导的食管癌细胞侵袭、迁移。

CXCL6在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其对食管癌细胞生物学特性的影响

目的研究趋化因子(C-X-C motif chemokine ligand 6,CXCL6)在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其表达的临床病理学相关性,并观察CXCL6对食管鳞状细胞癌Eca109细胞迁移和侵袭的影响。方法运用免疫组织化学SP法检测食管鳞癌组织(含105例食管鳞状细胞癌组织,75例癌旁正常组织)中CXCL6的阳性表达率,并分析CXCL6阳性表达与临床病理参数之间的相关性。运用细胞划痕实验和Transwell实验检测CXCL6对Eca109迁移和侵袭能力的影响。以食管鳞癌细胞Eca109作为未处理组,用CXCL6重组蛋白(50 ng/mL)刺激Eca109细胞,培养48 h作为CXCL6处理组,以加入PBS代替CXCL6重组蛋白作为阴性对照组。观察CXCL6重组蛋白处理后Eca109细胞的迁移和侵袭能力变化。结果食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率(71.43%)明显高于癌旁正常组织(33.33%),差异具有统计学意义(P<0.05);高分化的食管鳞状细胞癌患者CXCL6的阳性表达率(26.32%)明显低于低分化者(73.13%),差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL6阳性表达与食管癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理形态、浸润深度、临床分期、淋巴结转移均无统计学意义(P>0.05)。生存分析结果显示:CXCL6阳性表达与患者总预后无统计学意义(P>0.05)。在体外,CXCL6重组蛋白处理后,食管癌细胞Eca109迁移和侵袭能力明显增强,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CXCL6在食管鳞状细胞癌组织中高表达,其阳性表达与分化程度有关,而且CXCL6可以促食管鳞状细胞癌细胞的迁移和浸润。

CALM1在食管鳞癌细胞及组织水平中的表达

目的研究钙调蛋白1(camodulin1,CALM1)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及临床意义,观察CALM1对食管鳞状细胞癌KYSE150细胞迁移、侵袭能力的影响。方法运用免疫组织化学(SP)法检测食管鳞癌患者组织中CALM1的阳性表达情况。运用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测CALM1在3种食管鳞癌细胞系中的本底表达量。运用CRISPR-cas9技术敲除KYSE150细胞系的CALM1基因,构建CALM1 sgRNA表达载体,实验分两组:NC组(阴性对照病毒感染的细胞组)、KO组(CALM1基因sgRNA慢病毒感染的细胞组)。运用细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测CALM1对KYSE150迁移、侵袭能力的影响。结果食管鳞状细胞癌组织CALM1阳性表达率显著高于癌旁正常组织(P<0.01),且其表达与T分期和病理分级有关(P<0.05);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型以及淋巴结转移差异无统计学意义(P>0.05)。CALM1在KYSE150食管癌细胞系中本底表达量最高,在Eca109、TE-1中表达量相同。与对照组相比,CALM1敲除的实验组中食管鳞状细胞癌细胞的迁移、侵袭能力明显受抑制(P<0.05)。结论CALM1阳性表达情况与食管鳞状细胞癌T分期和病理分级有关,CALM1在食管鳞状细胞癌中对肿瘤细胞的侵袭、迁移能力有促进作用。

p-JAK2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨JAK2/STAT3信号通路相关蛋白磷酸化的JAK2(p-JAK2)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测食管鳞癌组织及对应癌旁组织中p-JAK2蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌组织p-JAK2阳性表达率明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。p-JAK2表达与肿瘤分化程度相关,差异有统计学意义(P<0.05);而与性别、年龄、病理形态、浸润深度、淋巴结转移及临床分期无明显相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论在食管鳞状细胞癌组织中p-JAK2的高表达与分化程度呈正相关,与肿瘤恶性程度呈负相关,可能为食管癌的预后判断提供新思路。

HSP27在食管鳞状细胞癌KYSE150细胞中的功能

目的研究热休克蛋白27(HSP27)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭、增殖的作用。方法用Western blot技术检测5种食管癌细胞系(KYSE30、KYSE150、KYSE510、TE-1、Eca9706)中HSP27的本底表达情况。用慢病毒转染HSP27的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)至KYSE150细胞系,实验共分5组:Empty vector组(未转染的KYSE150细胞),Negative control组(转染随机序列),3组实验组(分别转染shRNA-HSP27-1、shRNA-HSP27-2、shRNA-HSP27-3)。用噻唑蓝比色法(MTT)、Transwell侵袭实验以及细胞划痕实验检测HSP27不同表达水平对食管鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果 5种食管癌细胞系中HSP27本底表达量由高到低分别是:KYSE150、KYSE510、KYSE30、Eca9706、TE-1。与Empty vector组和Negative control组相比,HSP27敲低的实验组中食管鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显受抑制(P<0.05),差异有统计学意义。结论 HSP27在食管鳞状细胞癌中对肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力有促进作用,研究结果为食管癌的临床分子靶向治疗提供了新的研究方向。