NOX4/ROS/STAT3通路对肝星状细胞活化增殖的影响

目的 研究肝星状细胞活化及增殖过程中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)表达的变化,并探讨NOX4抑制剂GKT137831是否可通过抑制NOX4,减少活性氧(ROS)的产生,抑制STAT3信号通路,抑制肝星状细胞活化与增殖。方法 将大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6)分为4组:对照组、TGF-β1组、TGF-β1+GKT137831组、GKT137831组。DCFH-DA荧光探针法检测HSC-T6细胞内ROS水平,CCK-8法检测细胞增殖,实时荧光定量PCR法检测NOX4、STAT3 mRNA的表达;细胞免疫荧光和蛋白印迹法检测NOX4、STAT3、p-STAT3及α-SMA蛋白的表达。结果 与对照组相比,TGF-β1组HSC-T6细胞中NOX4 mRNA和蛋白表达上调,细胞内ROS水平升高,p-STAT3蛋白表达增加,细胞活化增殖能力升高(P<0.05);给予GKT137831处理后,HSC-T6细胞中NOX4 mRNA和蛋白表达下调,细胞内ROS水平下降,STAT3蛋白磷酸化减少,细胞活化增殖能力下降(P<0.05)。结论 NOX4可能通过产生ROS,促进STAT3磷酸化,导致HSC-T6细胞活化与增殖;GKT137831通过抑制NOX4来减少ROS的产生,抑制STAT3磷酸化,从而抑制HSC-T6细胞活化与增殖。

1698例胃溃疡的临床、内镜特点及胃癌检出率分析

目的探讨1 698例胃溃疡患者的临床、内镜特点及胃癌检出情况。方法回顾性分析2013年7月—2016年6月来我院就诊,内镜检查发现并经病理学证实的胃溃疡患者1 698例,总结分析其镜下特征、病理资料及胃癌检出情况等。结果在1 698例胃镜溃疡患者中,男女比为2.54:1.00,男性高于女性,共检出良性溃疡1 416例(占83.4%),恶性溃疡282例(占16.6%),检出部位胃窦最多(占40.6%),与其他年龄段相比,在≥65岁年龄段中,溃疡的分布以贲门胃底(30.3%)及胃体(27.6%)为主。胃窦溃疡发生不典型增生多见。结论不同年龄段的胃溃疡患者具有不同的临床特点和内镜特点,且年龄越小,胃癌恶性程度越高。

贝那普利对肝纤维化大鼠NOX4和Nrf2的影响

目的探讨贝那普利对肝纤维化大鼠NOX4和Nrf2的影响及其抗纤维化的机制。方法22只清洁级健康雄性SD大鼠随机分为3组:对照组6只,模型组和治疗组各8只。模型组和治疗组皮下注射40%四氯化碳油剂,建立大鼠肝纤维化模型,对照组予等剂量的油剂皮下注射,均为2次/周,共8周;在造模同时,治疗组予贝那普利10 mg/(kg·d)灌胃,其余两组予等剂量生理盐水灌胃,共8周。免疫组织化学法测定肝组织中NOX4和Nrf2的水平。结果与对照组相比,模型组肝组织中NOX4和Nrf2阳性蛋白的平均光密度值升高(NOX4:0.095±0.008 vs 0.212±0.007;Nrf2:0.073±0.005 vs 0.154±0.008),差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,治疗组肝组织NOX4阳性蛋白平均光密度值降低(0.212±0.007 vs 0.150±0.004),Nrf2阳性蛋白平均光密度值升高(0.154±0.008 vs 0.177±0.007),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论贝那普利可能通过降低NOX4的水平和升高Nrf2的水平减轻肝纤维化的程度。

肝纤维化过程中肝组织中Nrf2、NOX4 mRNA表达及血清ROS水平的变化

目的研究肝纤维化过程中肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)mRNA、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)mRNA和血清活性氧簇(ROS)的变化及其相互之间的关系,探索三者在肝纤维化形成过程中的作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分为两组,正常对照组6只,模型组24只,采用四氯化碳(CCl4)腹部皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,共8周。各组肝损伤的评估采用常规HE和Masson染色。逆转录PCR检测肝组织中Nrf2 mRNA、NOX4 mRNA水平,比色法测定血清ROS水平。所有数据均采用SPSS 23.0统计软件进行分析。结果2、4、6、8周时模型组Nrf2 mRNA表达水平分别为0.53±0.49、1.51±1.63、3.35±2.68、4.01±3.40,均较对照组(0.12±0.11)升高(P均<0.05);NOX4 mRNA的表达水平分别为6.53±0.89、5.49±1.24、14.49±2.39、31.78±3.96,均较对照组(2.03±0.31)升高(P均<0.05)。此外,2、4、6、8周时模型组血清ROS水平升高,分别为(1.84±0.69)μg/mL、(1.72±0.65)μg/mL、(2.48±1.14)μg/mL、(1.82±0.46)μg/mL,均较对照组[(1.56±0.84)μg/mL]升高(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,Nrf2与ROS、Nrf2与NOX4、NOX4与ROS之间均存在正相关性。结论肝纤维化形成过程中肝组织中Nrf2、NOX4及血清ROS水平均升高,但Nrf2水平的升高幅度较NOX4低,三者的变化可能参与了肝纤维化的发生。

肝纤维化形成过程中血清ROS和GSH的水平变化

目的研究肝纤维化形成过程中血清活性氧簇(ROS)和还原性谷胱甘肽(GSH)的水平变化及其相互关系,探讨其在肝纤维化形成中的意义。方法 34只健康雄性SD大鼠随机分两组:对照组6只和模型组28只。模型组给予皮下注射40%CCl4油剂,对照组给予相同剂量的油剂皮下注射,注射CCl4后的第2,4,6,8周各杀死模型组大鼠6只,对照组在8周时杀死6只大鼠,留取血清及肝组织待测。收集正常健康对照组及乙肝肝硬化组血清标本各20例,采用比色法分别测定各组血清中ROS及GSH的浓度。结果模型组2,4,6,8周大鼠的ROS水平均较对照组大鼠升高(P <0. 05);模型组2,4,6,8周大鼠的GSH水平与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。肝硬化患者血清ROS浓度明显高于正常组(P <0. 05),而血清GSH浓度与正常组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论肝纤维化形成过程中ROS、GSH的表达水平升高,提示可能参与了肝纤维化的发生。

核因子E2相关因子2抗氧化通路与肝脏疾病的关系

核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞抵御氧化应激的一个重要转录因子,其与抗氧化反应元件相互作用,从而诱导下游保护性II相解毒酶和抗氧化酶的表达,起到细胞的保护作用。氧化应激是众多肝脏疾病共同的发病机制,而Nrf2-抗氧化反应元件是体内重要的抗氧化应激通路,该通路通过诱导下游靶基因的表达,在肝脏疾病的发生、发展及预防过程中起重要作用。简述了Nrf2抗氧化通路在肝脏疾病发生发展过程中的作用机制。认为Nrf2可能成为预防或治疗肝脏疾病的一个潜在靶点。

贝那普利对肝纤维化大鼠ROS、GSH浓度及Nrf2表达的影响

目的研究贝那普利对肝纤维化大鼠活性氧簇(ROS)、还原性谷胱甘肽(GSH)及核因子E2相关因子2(Nrf2)的影响,探究其对肝脏的保护作用及可能机制。方法将22只健康雄性SD大鼠随机分为3组:对照组6只、模型组8只、治疗组8只。模型组及治疗组均给予皮下注射40%CCl 4油剂,对照组予以相同剂量的油剂皮下注射,2次/周;治疗组从实验开始给予贝那普利灌胃,直至实验结束,余两组均予以同剂量生理盐水。比色法测定血清GSH及ROS的浓度,real-time PCR检测肝组织Nrf2 mRNA的表达量。结果与对照组相比,模型组ROS的浓度及Nrf2 mRNA的表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05),GSH的浓度有升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,给予贝那普利治疗后,治疗组ROS的浓度降低(P<0.05),Nrf2 mRNA的表达量升高(P<0.05),GSH的浓度有升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。结论贝那普利可能通过降低血清ROS的浓度、增加Nrf2的表达,减缓肝纤维化的进展以保护肝脏。

M2型巨噬细胞与GKT137831对肝星状细胞氧化应激的影响

目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)抑制剂GKT137831与M2型巨噬细胞对大鼠肝星状细胞(HSC)系(HSC-T6)氧化应激指标NOX4、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的影响。方法分离大鼠骨髓巨噬细胞,用白细胞介素(IL)-4诱导其分化为M2巨噬细胞表型。选5μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)激活HSC-T6,采用细胞计数(CCK-8)法检测5~80μmol/L浓度梯度下NOX4抑制剂GKT137831刺激活化的大鼠HSC-T6细胞48 h后细胞增殖情况,选定最适药物浓度。分单独培养HSC组(对照组)、TGF-β1刺激组、TGF-β1+GKT137831刺激组、共同培养M2型巨噬细胞+HSC组、M2型巨噬细胞+TGF-β1刺激组、M2型巨噬细胞+TGF-β1+GKT137831刺激组,后5组为实验组。采用DCFH-DA探针法检测各组细胞活性氧(ROS)产生水平,采用qRT-PCR法和蛋白质印迹法检测各组HSC细胞NOX4、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Nrf2和HO-1水平。两组数据间的比较采用t检验,多组间比较行One-way ANOVA法分析。结果TGF-β1刺激后细胞内ROS显著升高,各组细胞ROS相对水平分别为1.03±0.11、3.88±0.07、2.90±0.08、0.99±0.06、3.30±0.05、2.21±0.11,F=686.1,P=0.001;NOX4、α-SMA、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05),加入GKT137831后,ROS及NOX4、α-SMA mRNA和蛋白表达较TGF-β1刺激组降低(P<0.05),Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。共培养组中TGF-β1刺激后HSC产生的ROS与NOX4、α-SMA mRNA及蛋白表达较单独培养组中TGF-β1刺激后显著降低(P<0.05),而Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),加入GKT137831后,共同培养组中ROS与NOX4、α-SMA mRNA及蛋白表达较单独培养组进一步降低(P<0.05),而Nrf2和HO-1 mRNA及蛋白表达进一步升高(P<0.05)。结论NOX4抑制剂GKT137831能降低HSC中ROS及NOX4、α-SMA水平和升高Nrf2、HO-1水平;M2型巨噬细胞共培养后辅助GKT137831降低HSC中ROS及NOX4、α-SMA水平,升高Nrf2、HO-1水平,调节了氧化应激与抗氧化应激系统间的平衡,从而拮抗纤维化进程。

消化内镜与腹腔镜治疗胃间质瘤疗效及安全性比较的Meta分析

目的系统评价消化内镜下切除和腹腔镜手术治疗胃间质瘤(<3.5 cm)的疗效和安全性。方法按Cocharane系统检索策略,收集2000年1月到2018年3月发表的比较消化内镜治疗和腹腔镜治疗胃间质瘤的中英文文献,纳入符合入选标准的10篇文献,使用Revman 5.3软件进行数据分析。结果纳入的10篇文献中,1篇为随机对照试验,其余9篇为回顾性非随机对照试验。患者总数1 062例,内镜治疗组732例,腹腔镜手术组330例。Meta分析结果显示:消化内镜治疗较腹腔镜治疗,手术时间短(MD=-30.58 min,95%CI:-39.31^-21.84,P<0.05)、术中出血量少(MD=-12.99 mL,95%CI:-16.40^-9.57,P<0.05)、住院时间短(MD=-3.17 d,95%CI:-4.76^-1.59,P<0.05)、总费用少(MD=-1.63万元,95%CI:-2.42^-0.84,P<0.05),且切缘阳性率(RR=2.35,95%CI:0.52~10.69,P=0.27)和围术期并发症发生率(RR=1.08,95%CI:0.48~2.42,P=0.85)差异均无统计学意义。结论现有研究显示,在保证完整切除的情况下,消化内镜治疗胃间质瘤具有有效、微创、预后快、经济等优点。

贝那普利对肝纤维化大鼠核因子E2相关因子2、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶及活性氧簇的影响

目的研究贝那普利对肝纤维化大鼠肝脏核因子E2相关因子2(Nrf2)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)表达及血清活性氧簇(ROS)浓度的影响,探讨贝那普利可能的抗纤维化机制。方法将22只清洁级健康雄性SD大鼠随机分3组,其中对照组6只,模型组和贝那普利治疗组每组8只,在造模及治疗过程中模型组和贝拉普利治疗组各有2只大鼠死亡,建立四氯化碳诱导的肝纤维化模型,贝那普利治疗组同时应用贝那普利灌胃,共8周,各组肝组织损伤的评估采用常规苏木精-伊红和Masson染色,RT-PCR检测肝组织中Nrf2mRNA及NOX4mRNA的表达量、比色法测定血清ROS浓度。所有数据表示为均数±标准差,采用SPSS21.0统计软件分析。计量资料组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t法;相关性分析采用Spearman相关分析。结果随着肝纤维化的加重,模型组肝脏Nrf2mRNA、NOX4mRNA表达及血清ROS浓度均较对照组升高[(4.01±3.40)、(31.78±3.96)、(1.82±0.46)μg/ml对比(0.12±0.11)、(2.03±0.31)、(1.56±0.84)μg/ml,P值均<0.05]。贝那普利治疗后NOX4mRNA表达和ROS浓度较模型组下降[(15.93±5.01)、(0.78±0.44)μg/ml对比(31.78±3.96)、(1.82±0.46)μg/ml,P值均<0.05],而Nrf2mRNA表达较模型组升高(相对表达量6.69±4.86对比4.01±3.40,P<0.05)。Nrf2与NOX4、Nrf2与ROS、NOX4与ROS三组之间均呈正相关(r值分别为0.616、0.411、0.802,P值均<0.05)。结论贝那普利可能通过激活Nrf2表达发挥抗肝纤维化作用,亦可能抑制NOX4产生的ROS介导的氧化应激反应,发挥抗肝纤维化作用。

贝那普利对肝纤维化大鼠的保护作用及可能机制

目的探讨贝那普利对肝纤维化大鼠的保护作用及对肝组织核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2),血清活性氧(reactive oxygen species, ROS)的影响。方法 SD大鼠18只,随机分为对照组、模型组、贝那普利组各6只。模型组、贝那普利组皮下注射体积分数40%四氯化碳连续8周制备肝纤维化模型,对照组注射等量食用油剂;贝那普利组同时给予贝那普利10 mg/(kg·d)灌胃,连续8周,模型组、对照组给予等量生理盐水灌胃。开始试验第56天,检测3组血清ROS;处死大鼠后取肝组织行组织病理检查评估肝硬化分期,实时荧光定量PCR法检测3组肝组织Nrf2 mRNA相对表达量。结果开始试验第56天,对照组HE染色及Masson染色见肝小叶结构正常,肝细胞排列整齐(肝硬化分期S_0期6只),模型组肝细胞可见大量炎症细胞浸润,肝内有明显纤维间隔形成(肝硬化分期S_3期4例,S_4期2只),贝那普利组肝细胞炎症损伤及纤维化程度较模型组减轻(肝硬化分期S_1期3例,S_2期2只,S_3期1只);模型组、贝那普利组肝组织Nrf2 mRNA相对表达量(4.01±3.40、6.69±4.86)及血清ROS[(1.82±0.46)、(1.56±0.84)mg/L]均高于对照组[0.12±0.11、(0.78±0.44)mg/L](P<0.05),且模型组血清ROS高于贝那普利组(P<0.05),肝组织Nrf2 mRNA相对表达量低于贝那普利组(P<0.05)。结论贝那普利具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与上调肝组织Nrf2表达,降低血清ROS有关。