大肠癌组织HLA-I类抗原及相关分子的表达意义

目的:探讨大肠癌组织HLA-Ⅰ类分子及相关分子表达及其意义. 方法:用免疫组化的方法,以切端黏膜作为正常对照,检测大肠癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织中HLA-Ⅰ类分子及相关分子的表达,并结合肿瘤的临床病理资料综合分析. 结果:受检的大肠癌组织中重链HLA-A位点、B/C位点及轻链beta2微球蛋白(β2M)较其相应正常黏膜表达明显下调(P=0.0001);肠癌中低分子量多肽(LMP2)(P=0.0001),钙联蛋白(calnexin)(P=0.004)较正常黏膜表达明显下调;肠癌中HLA-Ⅰ类分子表达与肿瘤分化无关;随着肿瘤的Dukes 分期,癌组织中HLA-Ⅰ类分子表达渐次降低,但各位点表达情况并不相同,HLA-B/C表达水平与肿瘤分期相关,其在Dukes A期表达水平高于D期(P=0.0262). 结论:肠癌组织及癌旁黏膜中HLA-Ⅰ类分子、低分子量多肽及钙联蛋白较正常黏膜表达明显下调;肠癌组织中HLA- B/C位点随着肿瘤Dukes分期演进其表达下调.

胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病临床病理特征

目的探讨胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病临床病理特征。方法收集胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病患者病变组织标本,利用HE染色、免疫组化、基因重排及原位杂交等方法,结合临床资料并复习文献,分析疾病的临床病理特点。结果内镜下见胃窦和胃体多发性孤立或融合息肉样丘状隆起,表面光滑。送检胃窦及胃体ESD标本光镜下见黏膜固有层弥漫致密的淋巴细胞浸润,局部浸润到黏膜下层,淋巴细胞形态小到中等大,形态单一,细胞核轻度异型;免疫组化示CD2、CD3、CD5、CD7、CD8、TIA(+),CD4、Gr B、CD56(-),Ki-67约5%(+);原位杂交EBER(-);基因重排检出T淋巴细胞受体TCR基因发生克隆性基因重排。肠镜检查肠道黏膜未见特殊。结合复习相关文献,诊断为胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病,对症治疗并随访9个月,患者身体状况良好。结论胃肠道惰性T细胞淋巴组织增生性疾病具有惰性临床过程,正确诊断并选择适当的治疗措施具有重要临床意义。

表皮生长因子受体基因突变与肺癌病理类型的关系

目的探讨肺癌病理类型与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因第18、19、21外显子突变的关系。方法收集192例肺癌石蜡标本,按WHO(2004)肺、胸膜肿瘤组织学标准进行病理分类,提取肿瘤组织DNA,PCR扩增EGFR外显子18、19、21序列,分析肿瘤病理类型与EGFR基因各外显子突变类型和频率关系。结果192例肺癌中腺癌90例,突变率为32.2%(29/90);鳞状细胞癌53例,突变率为18.8%(10/53);腺鳞癌32例,突变率为50%(16/32);小细胞癌突变率为17.6%(3/17)。腺鳞癌比鳞状细胞癌和小细胞癌突变率高,差异有显著性(P<0.05)。18外显子突变率为1.6%(3/192),19外显子突变率为10.9%(21/192),21外显子突变率为17.7%(34/192)。在鳞状细胞癌和腺鳞癌标本中检测到18外显子突变,二者差异无显著性;19外显子突变在各病理类型中均可检测到,各病理类型之间差异无显著性;21外显子突变在各病理类型中均检测到,腺癌和腺鳞癌比鳞状细胞癌突变率高,差异有显著性(P<0.05)。结论肺癌中腺鳞癌EGFR基因突变率较高,与鳞状细胞癌和小细胞癌相比差异有显著性(P<0.05),腺癌和腺鳞癌EGFR基因21外显子突变率较高,与鳞状细胞癌相比差异有显著性。

肺癌细胞学及血液标本表皮生长因子受体基因突变对比研究

目的:研究肺癌患者渗出液细胞学及血液标本中表皮生长因子受体(EGFR)第18、19、21外显子基因突变频率和类型以及与肿瘤组织学标本的关系。方法:收集肺癌患者渗出液细胞学标本53例及血液标本24例,提取DNA,聚合酶链反应扩增EGFR外显子18、19、21序列,用直接测序法检测基因序列,分析EGFR基因突变频率和类型以及与肿瘤组织学标本的关系。结果:53例细胞学标本检测到15例EGFR基因突变(28.3%,15/53),18外显子突变1例,19外显子突变5例,21外显子突变9例,细胞学标本与肺腺癌组织学标本突变率(32.2%)相比,差异没有显著性(P=0.624)。24例血液标本中检测到1例突变(4.2%,1/24),位于21外显子,血液标本与肿瘤组织学标本突变率相比,差异有显著性(P=0.006)。结论:肺癌患者渗出液细胞学标本适用于直接测序法检测EGFR突变,血液标本不适于用直接测序法检测肿瘤EGFR基因突变状态。

胃肠道间质肿瘤的分化及p53、Ki67的表达及意义

目的:探讨胃肠道间质瘤(Gastrointestinal Stromal tumors,GISTs)伴平滑肌和神经分化与肿瘤危险性的关系,以及细胞增殖活性,P53蛋白在GISTs中表达在临床诊断中的作用及意义。方法:对50例GISTs采用免疫组化SP法检测SMA、S100、Ki67、p53蛋白的表达情况,并将蛋白表达与肿瘤危险性程度作统计分析。结果:在高度危险性、中度危险性、低度危险性、极低度危险性的胃肠道间质瘤中,SMA表达的阳性率分别为64.2%、80%、72.7%、66.7%,各组差异没有显著性(P>0.05);S100阳性表达率分别为35.7%、50%、27.3%、26.7%,差异没有显著性(P>0.05),SMA和S100可同时或分别在间质瘤中表达;p53阳性率阳性率分别为57.1%、40%、18.1%,在极低度危险性组无阳性表达;Ki67阳性率为64.2%、80%、18.1%,6.7%;p53,Ki67表达在高、中危险组与低危险及极低危险组差异显著(P<0.05)。结论:胃肠道间质瘤可分别或同时表达平滑肌、神经源分化,在肿瘤危险性分级中没有显著差异;p53,Ki67表达与GISTs与肿瘤的危险性分级有显著差异,是判断肿瘤危险性的良好指标。

肺腺癌表皮生长因子受体基因突变及临床意义

目的研究肺腺癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)第18、19、21外显子基因突变频率和类型及其与临床特征的关系。方法收集90例肺腺癌患者肿瘤组织石蜡包埋标本,提取DNA,聚合酶链反应扩增EGFR外显子18、19、21序列,进行基因测序分析,结合患者临床资料分析EGFR基因突变频率和类型以及临床特点。结果 90例肺腺癌组织中未检测到18外显子突变;检测到19外显子突变11例(12.2%),其中碱基缺失突变10例,包括2 235核苷酸到2 249核苷酸缺失3例,2 240核苷酸到2 248核苷酸缺失1例,2 240核苷酸到2 253核苷酸缺失2例,2 240核苷酸到2 257核苷酸缺失3例,1例同时检测到2 240核苷酸到2 248核苷酸和2 251核苷酸到2 262核苷酸2个片段碱基的缺失,另1例为P741L错义突变;21外显子突变18例(20.0%),表现为碱基的替换突变,其中14例为L858R,L858M、A722V、K875R、Q787Q各1例。不同性别、年龄、肿瘤直径、临床分期、分化程度及有无淋巴结转移者之间比较,EGFR基因19、21外显子突变率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺腺癌肿瘤组织中EGFR外显子突变热点集中在19、21外显子,不同外显子的突变频率和类型不同;EGFR基因突变与患者的性别、年龄、肿瘤直径、临床分期、分化程度及淋巴结转移等临床特征无相关性。

白血病样非淋巴结性套细胞淋巴瘤临床病理观察

目的观察白血病样非淋巴结性套细胞淋巴瘤(LNNMCL)临床病理特征。方法收集2例LNNMCL患者临床及实验室检查资料,取骨髓或脾脏组织进行病理检查,利用HE染色、免疫组化等方法明确诊断后治疗并随访,结合文献分析疾病的临床病理特点。结果2例均为老年患者,实验室检查外周血淋巴细胞绝对计数显著增高,影像学检查脾大,未检测到肿大淋巴结,血涂片内检测到小到中等大淋巴细胞,核圆或椭圆,深染,可见凹陷及小核仁,流式检测提示肿瘤细胞表达B系表型;病理检查肿瘤淋巴细胞免疫组化阳性表达CD20、CD79a、PAX-5、CD5、CD43、CyclinD1,阴性表达SOX11、Bcl-6、CD10,细胞增殖活性较低,Ki-67增殖指数约5%;一例患者外周血肿瘤细胞核型分析染色体为非复合核型伴t(11;14)(q13;q32)染色体易位,另一例患者在脾脏组织中用二代测序检测出IgH/CylinD1基因易位,2例基因检测均显示IgHV及P53突变。综合临床、形态、免疫表型及基因检测结果,诊断为白血病样非淋巴结性套细胞淋巴瘤。采用化疗和靶向治疗后,分别随访69、12个月,患者病情稳定,健康状况良好。结论白血病样非淋巴结性套细胞淋巴瘤可能具有惰性临床过程,正确诊断并选择适当的治疗措施具有重要临床意义。

原发皮肤CD4^(+)小到中等大T细胞淋巴组织增生性疾病临床病理观察

目的观察原发皮肤CD4+小到中等大T细胞淋巴组织增生性疾病(Primary cutaneous CD4+small/medium T-cell lymphoproliferative disorder,PCSMTCLPD)临床病理特征。方法收集3例PCSMTCLPD患者临床资料,取病变组织进行病理检查,利用HE染色、免疫组化等方法明确诊断并随访,结合文献分析疾病的临床病理特点。结果2例表现为背部皮肤单发性结节,1例表现为头颈部多发性结节;光镜下见真皮内致密淋巴细胞弥漫、结节状、条带状浸润,局部浸润到皮下脂肪组织,皮肤附件内可见少量淋巴细胞浸润,并见小血管增生现象;其中异型淋巴细胞形态小到中等大,形态多样,核深染,可见小核仁;免疫组化阳性表达CD3、CD4,部分阳性表达Bcl-6、PD-1、CXCL-13,阴性表达CD10、CD8,细胞增殖活性较低,Ki-67约10~20%,诊断为PCSMTCLPD。随访10~39月,未见病变复发或进展,患者健康状况良好。结论PCSMTCLPD具有惰性临床过程,正确诊断并选择适当的治疗措施具有重要临床意义。

树突状细胞改变以及HLA-Ⅱ类分子表达在肠癌中意义

目的研究肠癌组织中专职抗原递呈细胞树突状细胞数量以及兼职抗原递呈细胞肠癌组织中HLA-Ⅱ类分子表达强度改变,揭示肠癌组织中的抗原递呈功能改变,为肠癌免疫治疗提供理论依据。方法用免疫组化的方法标记肠癌组织中的树突状细胞、HLA-Ⅱ类分子,以切端组织形态正常的黏膜组织(距离癌组织>5 cm)作为对照,结合临床资料分析肠癌组织中的树突状细胞数量改变以及HLA-Ⅱ类分子表达情况。结果相对于切端黏膜,肠癌组织中HLA-Ⅱ类分子表达下调,差异有统计学意义(P<0.05),树突状细胞数量减少,差异有统计学意义(P<0.05)。肠癌组织HLA-Ⅱ类分子表达在肠癌不同分级、分期差异无统计学意义(P>0.05),树突状细胞的数量在肠癌不同分级、分期差异无统计学意义(P>0.05)。结论肠癌组织中HLA-Ⅱ类分子表达显著下降,树突状细胞数量显著减少,导致肠癌组织中的肿瘤抗原递呈功能下降,是肠癌组织逃避机体免疫监视的重要途径。

大肠癌组织中抗原递呈细胞改变的研究

目的观察大肠癌组织局部抗原递呈细胞及淋巴细胞、CD8+的淋巴细胞数量的改变情况,探讨肠癌细胞逃避免疫监视的机制。方法用免疫组化的方法检测65例大肠癌组织、切端黏膜局部组织中树突状细胞(DC)及各类免疫细胞亚群数量,结合肠癌的临床病理资料进行综合分析。结果大肠癌组织中S-100阳性的DC数量低于切端黏膜,差异有显著统计学意义(=0.001);在肿瘤不同的Dukes分期及分级中,S-100阳性的DC数量比较差异无统计学意义。肠癌组织中淋巴细胞总数与其相应的切端黏膜细胞总数比较,差异无统计学意义(=0.066);淋巴细胞在高分化肠癌组织与中分化肠癌组织中数量比较,差异有统计学意义(=0.015),高分化肠癌组织与低分化肠癌组织中数量比较,差异有显著统计学意义(=0.006);在不同的Dukes分期中淋巴细胞总数比较,差异无统计学意义。肠癌组织中CD8+淋巴细胞数量与其相应的切端黏膜细胞数比较,差异无统计学意义(=0.328);在肿瘤不同的Dukes分期及分级中,CD8+淋巴细胞数量比较差异无统计学意义。结论大肠癌组织中局部的DC数量减少,反应了肿瘤组织抗原递呈功能降低,可能是肠癌细胞逃避机体的免疫监视的重要机制。

中国结直肠癌、肺癌和胃癌患者KRAS基因突变情况分析

目的探讨中国结直肠癌、肺癌和胃癌中KRAS基因的突变特征及其与临床病理特征的关系,并比较基因突变在三种癌症间的异同。方法采用直接测序法检测860例结直肠癌、101例肺癌和96例胃癌组织中KRAS基因第2号外显子的突变。结果 KRAS基因突变率在肺癌、胃癌、结直肠癌中的差异均有显著性(5.9%vs 4.2%vs 35.1%,P<0.05)。三种肿瘤中,KRAS基因突变均以第12密码子为主。KRAS突变与患者年龄、性别无明显相关性。肺腺癌患者KRAS基因突变高于非腺癌包括鳞癌等(10.2%vs 0,P<0.05)。肠腺癌和黏液腺癌中KRAS基因突变率显著高于其它类型结直肠癌(35.7%vs 37.6%vs 8%,P<0.05)。结论结直肠癌患者的KRAS基因突变率显著高于肺癌和胃癌。因此,KRAS基因突变检测可能对结直肠癌患者的个体化靶向治疗具有更为重要的指导意义。

内异停方对子宫内膜异位症血清VEGF及在位内膜VEGFR-2的影响

目的:评价内异停方治疗子宫内膜异位症(EMs)疗效,观察内异停对EMs患者血清VEGF水平及在位内膜VEGFR-2的影响。方法:将76例EMs的患者分为两组,治疗组采用内异停方治疗,对照组采用桂枝茯苓胶囊治疗,2个月为1个疗程,观察2个疗程,评价临床疗效,并以ELISA方法检测血清VEGF,以免疫组化的方法检测在位内膜VEGFR-2的变化。结果:内异停方治疗EMs总有效率达88. 00%,优于对照组桂枝茯苓胶囊(58. 33%)(P <0. 05);内异停可明显降低血清CA125及VEGF水平(P <0. 05),与对照组相当;内异停组与对照组(未用药)在位内膜VEGFR-2比较,VEGFR-2表达明显下降。结论:内异停方治疗EMs有效,疗效优于桂枝茯苓胶囊,值得临床运用推广。内异停方可能通过降低EMs血清VEGF水平及在位内膜VEGFR-2水平发挥治疗作用。

江苏汉族人群心脑血管病患者载脂蛋白E基因研究

目的:探讨用基因测序法检测载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及其与心脑血管疾病之间的关系。方法:应用基因测序方法检测了193例心脑血管疾病患者和100例无血缘关系的健康汉族人群ApoE基因型。结果:ε3/3基因型高血压组频率为64.3%,高血压+冠心病组为57.7%,高血压+脑血管病组为62.2%均明显低于对照组的86%(P<0.05);而ε3/4基因型频率,高血压组为21.4%,高血压+冠心病组为19.2%,高血压+脑血管病组为24.4%,均显著高于对照组的6%(P<0.05);ε4/4基因型高血压+冠心病组频率为5.1%明显高于对照组0%(P<0.05)。分析等位基因频率,高血压组和高血压+冠心病组、高血压+脑血管病组ε3等位基因频率分别为80.7%,74.4%和78.9%,明显低于对照组92.5%(P<0.05),ε4等位基因频率分别为12.1%,16.7%和14.5%,明显高于对照组的3.5%(P<0.05),差异有明显统计学意义。两组间其它各基因型无统计学差异。结论:应用基因测序方法进行ApoE基因分型是最全面、最直接、可靠的方法;ε4等位基因是心脑血管疾病共同的遗传易患因子,而ε3等位基因具有保护作用。

IL-17、IL-6、TNF-α细胞因子在痔疮患者中的表达

目的:以痔疮患者肠道内IL-17、IL-6、TNF-α细胞因子为研究对象,检测其在痔疮患者中的表达,探讨细胞因子在痔疮发病机制中的作用。方法:采用免疫组化方法测定痔疮患者病变部位直肠黏膜和血管内皮细胞内IL-17、IL-6、TNF-α表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测痔疮患者(试验组)与对照组血清IL-17蛋白表达。结果:试验组与对照组血清IL-17表达无差异(P>0.05);试验组与对照组直肠血管内皮细胞IL-17、IL-6、TNF-α表达有显著差异(P<0.05);试验组直肠黏膜IL-17、IL-6、TNF-α表达与对照组相比也都具有显著性差异(P<0.05)。结论:据此推测局部阻断IL-17、IL-6、TNF-α等细胞因子的分泌可能成为治疗痔疮的一种方法。

几种生物材料的体内生物相容性评价的实验研究

目的:评价乌克兰产聚丙烯酰胺水凝胶(IT)、国产聚丙烯酰胺水凝胶(FH)、天然羟基磷灰石(HA)、人工合成羟基磷灰石(GSN)的体内生物相容性。方法:通过HE染色,比较了24只家兔肌肉组织分别对几种生物材料反应的强弱程度和包膜厚度。结果:植入动物体内90d后,根据炎性反应程度和包膜形成评级,FH与IT的均为Ⅰ级,评价为合格;HA的分别为Ⅳ级、Ⅲ级,GSN的分别为Ⅱ级,Ⅱ级,均超过合格的标准。结论:GSN与HA均超过合格标准,HA引起的组织反应重于GSN。

肺骨化性气管支气管病手术切除1例

病例资料 患者,男性,52岁,1年前感冒后出现咳嗽咯黄痰,发热伴左胸部间断疼痛,反复发作持续1年,于2016年7月入我院呼吸内科治疗.既往病史：高血压病史4年,未正规治疗;癫痫病史十余年,口服＂吡拉西坦片＂治疗;幼年＂骨结核＂手术史.无有毒有害气体粉尘等接触史.体格检查：左肺呼吸音低,余未见异常.胸部X线未见明显异常,胸部CT示（图1）：左肺下叶支气管局部变窄伴管壁斑片状钙化、结节状突向管腔,左下肺叶背段节段性不张、降主动脉旁见条片状密度增高影.

十二指肠节细胞性副神经节瘤病理学特征并文献复习

十二指肠节细胞性副神经节瘤(duodenal gangliocytic paraganglioma, DGP)是发生于十二指肠壶腹乳头部附近的一种神经内分泌肿瘤[1],DGP组织学上容易被误诊为胃肠道间质肿瘤(GIST)、神经内分泌肿瘤G1(neuroendocrine tumor grade1,NET G1)等。本文回顾性分析1例DGP,探讨其临床病理学特点及鉴别诊断,复习相关文献,旨在提高对该肿瘤的认识。

咳喘停贴剂穴位贴敷治疗对慢性哮喘大鼠肺组织形态学的影响

目的:观察咳喘停贴剂穴位贴敷治疗对慢性哮喘大鼠肺组织光镜及电镜下形态学的影响。方法:将40只wistar大鼠,随机分成正常组(A)、模型组(B)、假穴位贴敷组(C)、地塞米松组(D)、穴位贴敷组(E)。B、C、D、E组以卵蛋白(OVA)致敏和激发制作慢性哮喘模型。观察治疗后各组大鼠光镜下肺组织形态学改变及电镜下肺泡、肺间质超微结构的变化。结果:光镜下:A组肺泡及肺间质结构正常;B组与C组相似,肺泡内见有炎性细胞浸润,肺间隔增厚。D组及E组:与模型组相比,炎性细胞浸润呈不同程度的减少,肺间隔增生呈不同程度的减轻。电镜下:A组见到形态良好的肺泡Ⅱ型上皮细胞。B组及C组见肺泡Ⅱ型上皮细胞板层小体排空现象较多,细胞表面微绒毛明显减少,间质内见大量胶原纤维增生及浸润的淋巴细胞。D组及E组见Ⅱ型肺泡上皮细胞结构基本正常,肺间质内可见淋巴细胞及束状胶原纤维。结论:咳喘停贴剂可通过影响肺泡及肺间质的形态来影响其功能,从而达到治疗哮喘的目的。

原位杂交技术临床应用及实验室操作

原位杂交方法问世近40年,主要原理是依据碱基互补配对原则,设计特异性探针与待测样本中的互补核酸序列杂交,于原位检测目的基因的存在。该方法具有2个特点,一是基因水平的检测。