肿瘤微环境中乳酸对巨噬细胞表型极化和功能的影响

目的研究肿瘤微环境中乳酸对巨噬细胞表型极化和功能的影响。方法在Balb/c小鼠乳腺处接种乳腺癌细胞4T1,研磨肿瘤组织后测其乳酸浓度。以不同浓度乳酸处理RAW264.7巨噬细胞,用流式细胞术、RT-PCR和Western blot检测M1、M2型巨噬细胞的标志分子和NFκB P50/P65。蛋白芯片检测RAW细胞分泌的细胞因子。流式细胞术检测RAW细胞吞噬功能和抗原递呈功能。结果小鼠乳腺癌组织的乳酸浓度高于正常乳腺组织(P<0.05)。15 mmol/L浓度的乳酸可显著上调RAW细胞M2型标志分子的表达(P<0.05),下调M1标志分子的表达(P<0.05),使RAW细胞分泌的M1型细胞因子明显减少(P<0.05),同时使磷酸化NFκB P65降低(P<0.05)。乳酸对RAW细胞的吞噬功能没有明显的影响,但减弱其抗原递呈功能(P<0.05)。结论在乳酸的作用下,RAW巨噬细胞表型向M2型转变,抗原递呈功能减弱,NFκB参与调控乳酸对巨噬细胞的作用。提示肿瘤微环境中的乳酸对抗肿瘤免疫有较大影响。

LIN28B调控miRNAs维持MCF-7肿瘤干细胞的干性特征

目的研究LIN28B对人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤干细胞的干性状态维持的作用机制。方法在MCF-7细胞中瞬时过表达LIN28B,用q PCR和Western blot检测干性相关基因SOX2、NAONG、c-Myc和OCT4的表达;用流式细胞仪检测CD44high/CD24low细胞亚群的比例;利用体外成球培养检测肿瘤干细胞自我更新的能力,通过RNA第二代测序技术检测在LIN28B过表达后MCF-7细胞中miRNAs的表达差异,通过转染差异表达的miRNA,检测其对MCF-7细胞肿瘤干细胞比例和体外成球能力的影响。结果转染p-CMV6-LIN28B后能明显提高LIN28B的mRNA和蛋白水平(P<0.001);过表达LIN28B后MCF-7细胞中SOX2、NANOG和OCT4在RNA和蛋白水平表达都明显增高(P<0.05);CD44high/CD24low细胞比例由1.71%上升至11.60%(P<0.05);体外成球培养发现成球细胞数量明显增多(P<0.01);通过RNA测序发现有16个miRNAs在LIN28B过表达后差异表达倍数在2倍以上且P<0.05,LIN28B过表达后miR-92b-5p表达显著上调(P<0.01);转染miR-92b-5p mimic后MCF-7细胞的CD44high/CD24low细胞比例由1.14%上升至3.59%(P<0.05),体外成球能力明显增强(P<0.01)。结论 LIN28B能维持MCF-7肿瘤干细胞的干性状态,其作用机制可能是通过miRNAs的表达来实现的。

特发性快速眼动期睡眠行为障碍与多系统萎缩的相关性研究进展

特发性快速眼动期睡眠行为障碍(iRBD)是潜在的α-突触核蛋白病的最有力的标志物之一。大量文献记录了多系统萎缩(MSA)中iRBD的高发率,iRBD作为MSA前驱期的特征性改变,其在MSA进展中的作用也引起研究者们的关注。目前,还没有正式的前驱期MSA的诊断标准,iRBD为识别潜在的前驱期MSA患者提供了手段。认知能力通常保持相对完整,色觉异常较少,保留嗅觉会出现较严重的泌尿系统症状,这些临床特征可以帮助判定iRBD患者向MSA的转化。本文就iRBD的流行病学特点、在MSA中临床特征、与MSA进展、预后和转化的关系等进行综述,以期进一步了解iRBD与MSA的关系,为MSA前驱期的预防、诊断和治疗提供帮助。

HE4和CA125联合检测在卵巢癌实验诊断中的应用价值

目的 评估人附睾分泌蛋白4(HE4)和糖类抗原125(CA125)联合检测在卵巢癌诊断中的应用价值.方法 用ELISA 方法测定卵巢癌患组75例患者、卵巢良性疾病组45例患者、健康对照组80例健康女性血清中HE4水平,同时用化学发光法测其血清中CA125水平,并对结果进行比较分析.结果 卵巢恶性肿瘤组血清HE4水平明显高于卵巢良性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.01);卵巢良性疾病组和健康对照组比较差异无统计学意义(P >0.05);ROC 曲线下面积(AUC)=0.75,诊断的最佳临界值为91.6pmol/L,灵敏度和特异度分别为60.0%和90.4%;在相同特异度下,对卵巢良恶性疾病的鉴别HE4要优于CA125,二者的联合检测能提高鉴别诊断的准确性.结论 单个指标应用时HE4具有较高的临床价值;HE4与CAl25联合应用提高了卵巢良恶性疾病鉴别诊断的准确性.

肿瘤pH微环境通过激活β-catenin/TCF4增强人乳腺癌肿瘤细胞的干性

目的探讨酸性微环境对于乳腺癌肿瘤干细胞干性的影响及其作用机制。方法分别在pH 6.8和7.4的环境下,培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231。用流式细胞术、PCR、Western blot、体外成球实验和细胞划痕实验分别检测肿瘤干细胞ALDHhigh细胞亚群的比率,干性基因SOX2、OCT4和Lin28b的表达,成球能力和肿瘤细胞迁移能力,同时检测相关信号通路的激活。结果酸性微环境通过激活β-catenin/TCF4信号通路提高MDA-MB-231的ALDHhigh细胞亚群的比例(P<0.05),上调干性相关基因的表达(P<0.01),增强体外成球能力(P<0.01)和迁移能力(P<0.05)。结论酸性微环境能够上调干细胞比例,维持肿瘤干细胞干性特征,增加乳腺癌肿瘤细胞迁移能力。