大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽的工艺研究

本文主要从分子极性角度研究了大孔吸附树脂对具有血管紧张素转化酶(Angiotensin-I converting enzyme,ACE)抑制活性的海蜇多肽的分离纯化作用。取海蜇酶解产物作为研究对象,选用HP20SS、SP20SS、SP207三种不同型号的大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽,以ACE抑制率为评价指标,对其分离纯化海蜇ACE抑制肽的工艺进行研究。结果发现,HP20SS型大孔吸附树脂分离纯化海蜇ACE抑制肽效果最佳,当海蜇酶解液的浓度为10.0 mg/mL、上样流速为2.0 BV/h、静置吸附3 h、洗脱剂为70%的乙醇溶液、洗脱剂流速为1.0 mL/min的条件下,富集后的ACE抑制肽分子量为2.65×10^(3)Da,纯度为89.16%,抑制率高达92.18%,IC_(50)值为1.02 mg/mL。经3次平行试验,样品的平均回收率为94.76%,RSD为0.63%。综合分析,HP20SS大孔吸附树脂对海蜇ACE抑制肽有较好的分离纯化效果,该工艺合理可行且重现性好。

大鲵胶原蛋白肽制备工艺的优化

通过改良酶解工艺和生物膜过滤技术对分子量的控制和脱盐的处理,优化了人工养殖子二代大鲵中大鲵胶原蛋白肽的提取工艺。结果表明,传统工艺生产的大鲵胶原蛋白肽相对分子量小于1000 D的水解物所占比例为36.2%;工艺改进后生产的大鲵胶原蛋白肽中相对分子量<1000 D的肽段占比达到95.04%,该研究对我国大鲵胶原蛋白肽资源的产业开发提供技术思路和理论依据,具有重要的理论和经济价值。

南极磷虾抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定

为获得纯度高、抗氧化效果好的南极磷虾抗氧化肽,首先选用碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶对脱脂南极磷虾粉进行酶解,然后采用纳滤、超滤、Sephadex g^(-1)5凝胶层析色谱法对酶解液进行分离纯化,并测定纯化组分的抗氧化活性,再进一步用液相色谱-质谱联用法对分离出的组分进行结构测定,最后通过在线功能预测软件分析南极磷虾抗氧化肽的结构与活性。结果表明:1)以脱脂南极磷虾粉为原料制备的抗氧化肽有较好的二苯基苦酰肼基(diphenyl picryl hydrazinyl,DPPH)清除率、超氧阴离子清除率、羟自由基清除率以及铁螯合力;2)经过初步超滤分离后,分子量<5 Ku的组分具有较强的体外抗氧化效果,当蛋白浓度为10 mg·mL^(-1)时,其DPPH清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子清除率、铁螯合力分别为84.74%、91.36%、61.92%和57.95%;3)对分子量<5 Ku的组分进行Sephadex g^(-1)5凝胶柱纯化,获得3个组分:F1、F2和F3。对F1、F2和F33个纯化组分进行体外抗氧化活性检测,发现F3在其蛋白浓度为2.5 mg·mL^(-1)时,羟自由基清除率相比于同等蛋白浓度的酶解液提升了43.60%(P<0.05);4)通过色谱鉴定以及在线软件分析预测,最终筛选出了6条抗氧化活性高、无毒且理化性质良好的肽段(LPGAIP、GPIALPE、APGELPY、RDWPEGR、GIPPAP、VDLPGW),可供今后进一步人工合成并进行生物学活性功能验证。研究结果可为南极磷虾抗氧化肽及抗氧化保健食品的开发提供一定的参考。

罗汉参皮总黄酮的提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以罗汉参皮为原料,利用超声波辅助提取,在单因素试验的基础上,通过响应面试验设计优化罗汉参总黄酮的最佳提取工艺条件,并对其抗氧化活性进行研究。以总黄酮得率为指标,得出最佳提取条件:乙醇体积分数95.7%,超声功率120 W,料液比1︰46(g/mL),提取温度40℃,提取时间6 min。在此条件下罗汉参皮总黄酮得率为9.1 mg/g。抗氧化试验结果表明,通过清除DPPH自由基、清除ABTS自由基、还原力和总抗氧化性能力4项抗氧化能力评价,罗汉参皮总黄酮都表现出一定的活性,其量效关系呈现不同的规律性。