慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈功能与蒙药槟榔十三味丸的干预

背景:抑郁症是具有很高的致死、致残率,严重威胁着人类健康的常见精神疾患。临床上应用槟榔十三味丸治疗抑郁症取得良好的疗效。但其作用机制尚未明确。目的:观察蒙药槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈功能的影响,探讨槟榔十三味丸抗抑郁作用机制。方法:80只Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组、槟榔十三味丸低、中、高剂量组、RU486组和槟榔十三味丸低、中、高剂量+RU486组,每组8只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性应激结合孤养方法制备抑郁模型,槟榔十三味丸低、中、高剂量组大鼠在造模同时连续28 d灌胃槟榔十三味丸0.2,0.4,0.8 g/kg;正常对照组和模型组大鼠灌胃羧甲基纤维素钠;RU486组大鼠自造模第21天起腹部皮下注射糖皮质激素受体拮抗剂RU486;槟榔十三味丸低、中、高剂量+RU486组大鼠在造模同时灌胃槟榔十三味丸0.2,0.4,0.8 g/kg,且自造模第21天起腹部皮下注射RU486。结果与结论:与正常对照组相比,模型组及RU486组大鼠肾上腺皮质酮水平显著升高(P<0.05),海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体m RNA表达显著下降,下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素m RNA表达显著增多;与模型组相比,灌胃槟榔十三味丸的大鼠肾上腺皮质酮水平降低,海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体m RNA表达明显增多,下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素m RNA表达水平显著降低;且与RU486组相比,同时灌胃槟榔十三味丸的大鼠肾上腺皮质酮、海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体m RNA、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素m RNA表达水平也出现改变。提示槟榔十三味丸对糖皮质激素的过度分泌有直接的调控作用,并可通过增强糖皮质激素受体m RNA的表达及降低促肾上腺皮质激素释放激素m RNA的表达,改善下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈中枢的功能障碍。当下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈通路被阻断后,槟榔十三味丸作用减弱。

蒙药槟榔十三味丸(高尤-13)对抑郁模型大鼠行为学及不同脑区单胺类神经递质的影响

目的:观察槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠行为学和脑前额叶皮质、海马单胺类神经递质及其代谢产物的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:将Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量及体质量随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组、槟榔十三味丸低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养方法制备抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药21天。以敞箱实验、蔗糖水消耗实验进行行为学评价,并用高效液相-电化学法测定脑前额叶皮质、海马去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)及其代谢产物含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠敞箱实验水平运动和垂直运动得分、蔗糖水消耗量显著降低(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,槟榔十三味丸中、高剂量组和氟西汀组大鼠敞箱实验水平运动和垂直运动得分、蔗糖水消耗量均显著增加(P<0.05或P<0.01);高效液相-电化学法测定结果显示,模型大鼠脑前额叶皮质NE、5-HT、DA、DOPAC,海马5-HT、5-HIAA、DA含量较正常对照组显著下降(P<0.05或P<0.01),槟榔十三味丸可升高模型大鼠脑前额叶皮质NE、5-HT、DA、DOPAC和海马5-HT、5-HIAA、DA含量,尤其中、高剂量组作用显著(P<0.05或P<0.01)。结论:槟榔十三味丸能改善抑郁模型大鼠行为学异常,提高大鼠脑内神经递质NE、5-HT、DA及其代谢产物含量,这可能是槟榔十三味丸抗抑郁作用的重要机制之一。

蒙医赫依病变时间与抑郁症发病时间关系探讨

抑郁症是一种危害人类身心健康的常见情感障碍疾病,其主要表现有情绪低落、言语减少、运动迟缓、常自责自罪,甚至企图自杀。根据其发病原因、临床表现和症状分析,属蒙医＂赫依病＂范畴。本文从＂赫依＂病变时间与抑郁症发病时间角度进行对比分析,发现赫依偏衰期6-10时患者出现情绪低落等表现,在赫依偏盛期14-18时及赫依蓄积期22-2时逐渐好转,该变化与抑郁症患者出现早上情绪低落、下午及晚上逐渐好转的晨重暮轻昼夜节律很相近。抑郁症患者易于出现睡眠障碍的2-4时正值2-6时赫依偏盛期内。9-11月赫依偏衰季节患者容易出现心境低落等表现,与9-10月为抑郁症患者高发季节的现象不谋而合。故依据＂赫依＂病变时间与抑郁症发病时间关系,分析探讨镇赫依法治疗抑郁症的时间规律,为抑郁症的蒙医治疗提供理论依据。

蒙药槟榔十三味丸(高尤-13)的方药组成考证

槟榔十三味丸源于19世纪著作《蒙医金匮》,在该书中名为高尤-13,首载槟榔十三味丸方名者为1977年版《吉林省药品标准》。本方曾用名为泰德乎然古鲁格其乃然塔、色么吉德吉德等,《通瓦嘠吉德》虽载色么吉德吉德,但为同名异方,与今之用槟榔十三味丸无渊源关系。槟榔十三味丸在不同时期药物组成有13、14、15味不同,至少出现5个不同药物组成的高尤-13,方药演变集中在19—20世纪上半叶,自1971年以后方药组成和配比均无发生大的变化。其中,槟榔、广枣、木香、丁香、肉豆蔻、紫硇砂、干姜、荜拔、胡椒、沉香等10味药物是固定不变的,单味药物配比变化较大的属制草乌,其次有木香、丁香、沉香。《吉林省药品标准》、《中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册》所载槟榔十三味丸虽未标注其来源,但根据方药组成及配比认为来源于《蒙医金匮》,《内蒙古蒙成药标准》注其来源于《蒙医金匮》。3部标准与《蒙医金匮》载高尤-13药物组成除野牦牛心外均一致,唯独制草乌配比有所不同,其余药物配比均相同。只有《内蒙古蒙成药标准》在附录中标注了与原方的区别,其余两部标准也应与原方异同进行标注为妥。

蒙药孟根乌苏(水银)炮制品、孟根乌苏(水银)-18味丸与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞急性毒性的比较研究

目的:对比研究孟根乌苏(水银)炮制品、孟根乌苏(水银)-18味丸与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞对大鼠单次给药后的急性毒性。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体重随机分为正常对照组、孟根乌苏(水银)炮制品低、高剂量组(0.033,0.33 g·kg-1·d-1)、孟根乌苏-18味丸低、高剂量组(0.29,2.9 g·kg-1·d-1)、孟根乌苏-18味丸简化方组(0.26 g·kg-1·d-1)、硫化汞组(17.39 mg·kg-1·d-1)、氯化汞组(4.06 mg·kg-1·d-1)、氯化亚汞组(35.3 mg·kg-1·d-1)共9组,每组6只。各组大鼠适应1周后,灌胃给药1次,24 h后取材,分别检测肝肾功能,肝肾组织形态学变化;并用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测肾汞蓄积量;原位末端标记(TUNEL)法测肾细胞凋亡;免疫组化法测肾Ⅲ型胶原蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-Time-PCR)法检测肾脏MT-1、MT-2基因表达的变化。结果:各组大鼠血清ALT、AST检测结果与正常对照组相比无统计学意义(P>0.05)。氯化亚汞组大鼠血清CREA和UREA均明显高于正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组(P<0.01)。肝脏和肾脏病理检查结果表明,孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸低剂量组肝细胞肿胀变性程度较轻,肾小球病变不明显,孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸高剂量组以及硫化汞组大鼠肝脏、肾脏均出现了一定的病理变化,而氯化汞、氯化亚汞组大鼠肝肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组相比,氯化汞和氯化亚汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01);硫化汞、氯化汞、氯化亚汞组大鼠肾细胞凋亡率和Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高(P<0.01);氯化汞、氯化亚汞组大鼠肾组织中MT-1和MT-2 m RNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:大鼠单次给药后,临床常用量的孟根乌苏炮制品和孟根乌苏-18味丸毒性要远远小于氯化汞、氯化亚汞。

浅析蒙医赫依与抑郁症的关系

基于蒙医三根之赫依理论,探讨抑郁症病因病机及临床症状与赫依间的相关性。从饮食条件、生活起居、气候条件及突发因素4个诱发赫依病变条件与抑郁症病因病机之间,从司命赫依、上行赫依、普行赫依、调火赫依、下清赫依之病变特征与抑郁症临床症状之间进行不同层次、不同角度的对比,认为赫依的发病原因、病变特征与抑郁症的病因病机和临床症状具有较多相似之处。赫依为抑郁症之诱发病因,亦为其发展、转归的原因,抑郁症的临床治疗应当以镇赫依为治疗大法,并注重三根调节,促进白脉传导,在辨病、辨证的基础上,合理应用带有蒙医药特色的饮食、起居、药物、灸疗等治疗手段,进而充分发挥蒙医药在治疗抑郁症方面的优势。

槟榔十三味丸对抑郁模型大鼠海马和前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路的影响

目的:观察蒙药槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠海马和前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路的影响。方法:将Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组(3.3 mg·kg-1)、槟槟榔十三味丸低、中、高剂量组(0.25,0.5,1 g·kg-1),共6组,每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养方法制备抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药28 d,取海马和前额叶皮层,用放射免疫分析法(RIA)测定AC活性;酶联免疫吸附法(ELISA)测定cAMP和PKA含量。结果:慢性应激抑郁模型大鼠海马、前额叶皮层中AC活性、cAMP和PKA含量均较空白对照组显著下降(P<0.05或P<0.01),氟西汀组、槟榔十三味丸组大鼠海马、前额叶皮层中AC活性、cAMP和PKA含量均较模型组显著升高(P<0.01或P<0.05)。尤其槟榔十三味丸高剂量组作用显著。结论:抑郁模型大鼠海马、前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路下调,而槟榔十三味丸可以通过上调海马和前额叶皮层AC-cAMP-PKA信号通路而发挥抗抑郁作用。

蒙药槟榔十三味丸对抑郁模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的影响

目的:探讨蒙药槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠神经-内分泌-免疫功能的影响及治疗抑郁症的机制。方法:将Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量及体重随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组(3.3 mg·kg-1)、槟榔十三味丸低、中、高剂量组(0.25,0.5,1 g·kg-1),每组10只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养方法制备抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药28 d。实验结束后,迅速断头取血,分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)的含量,并取胸腺、脾脏,计算胸腺指数、脾脏指数。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清CRH,ACTH,CORT,T3,IL-6含量明显升高(P<0.01),TSH含量、脾脏指数明显降低(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组和槟榔十三味丸大鼠血清CRH,ACTH,CORT,T3,IL-6含量明显降低(P<0.01或P<0.05)、TSH含量明显升高(P<0.05或P<0.01),槟榔十三味丸组大鼠脾脏指数明显升高(P<0.01),尤其槟榔十三味丸高剂量组作用显著。结论:槟榔十三味丸能调节抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,以及免疫功能,这可能是该复方抗抑郁作用的机制之一。

槟榔十三味丸(高尤-13)对慢性应激抑郁大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响

目的:观察槟榔十三味丸(高尤-13)对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及海马神经元凋亡的影响,以期从细胞水平探讨该方抗抑郁症作用机制。方法:将48只Wistar雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量及体质量随机分为正常对照组,模型组,氟西汀组(3.3 mg·kg-1),槟榔十三味丸低剂量组、中剂量组、高剂量组(0.25 g·kg-1,0.5 g·kg-1,1.0 g·kg-1),共6组,每组8只。除正常对照组外,其余大鼠均采用慢性轻度不可预见性应激结合孤养方法制备抑郁模型,造模同时灌胃给药,每日1次,连续给药28 d。以敞箱实验、蔗糖水消耗实验进行行为学评价,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双标记(AnnexinVFITC/PI),以流式细胞仪(FC)检测海马神经元凋亡率。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠水平运动及垂直运动得分、体质量、蔗糖水消耗量显著降低(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组,槟榔十三味丸中剂量组、高剂量组大鼠水平运动及垂直运动得分、糖水消耗量、体质量均显著增加(P<0.05);流式细胞仪检测凋亡率显示,与正常对照组比较,模型组大鼠海马神经元凋亡率显著增高(P<0.05);与模型组比较,氟西汀组,槟榔十三味丸中剂量组、高剂量组大鼠海马神经元凋亡率降低,差异有显著性(P<0.01)。结论:慢性应激抑郁模型大鼠存在行为学异常及海马神经元凋亡现象,槟榔十三味丸能改善抑郁模型大鼠行为学异常及抑制慢性应激造成的大鼠海马神经元凋亡而发挥抗抑郁作用。

蒙药孟根乌苏-18味丸、孟根乌苏炮制品的肝肾毒性作用研究

目的:对比研究孟根乌苏(水银)-18味丸、孟根乌苏(水银)炮制品与硫化汞、氯化汞、氯化亚汞的肝肾毒性作用。方法:将Wistar雄性大鼠,根据体重随机分为正常对照组、孟根乌苏-18味丸低、高剂量组(0.29,2.9 g·kg^(-1)·d^(-1))、孟根乌苏-18味丸简化方组(0.26 g·kg^(-1)·d^(-1))、孟根乌苏炮制品低、高剂量组(0.033,0.33 g·kg^(-1)·d^(-1))、硫化汞组(17.39 mg·kg^(-1)·d^(-1))、氯化汞组(4.06 mg·kg^(-1)·d^(-1))、氯化亚汞组(35.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)),共9组,每组6只。各组大鼠适应7天后,灌胃给药7天后分别检测肝肾功能,肝肾组织形态学变化,并用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)和电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测肾汞蓄积量,原位末端标记(TUNEL)法测肾细胞凋亡,免疫组化法测肾Ⅲ型胶原蛋白表达,实时荧光定量PCR(Real-Time-PCR)法检测肾脏MT-1、MT-2基因表达的变化。结果:在实验过程中,氯化亚汞组4只大鼠死亡,因此未对实验数据进行统计。大鼠连续7天给药后,药物对各组大鼠肝、肾功能并无影响。肝脏和肾脏病理检查结果表明,孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品低剂量组肝细胞肿胀变性程度较轻,肾小球轻度肥大,肾小管上皮轻度肿胀变性,孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品高剂量组以及硫化汞组大鼠肝脏、肾脏均出现了一定的病理变化,而氯化汞、氯化亚汞组大鼠肝肾病理变化更显著。与正常对照组和孟根乌苏炮制品低剂量组相比,氯化汞组大鼠肾汞蓄积量显著升高(P<0.01);硫化汞、氯化汞组大鼠肾细胞凋亡率和Ⅲ型胶原蛋白表达显著升高(P<0.01);与正常对照组比较,氯化汞组大鼠肾组织中MT-1和MT-2 m RNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05);氯化汞组大鼠肾组织中MT-1表达显著高于孟根乌苏炮制品低剂量组(P<0.01)。结论:临床常用量的孟根乌苏-18味丸和孟根乌苏炮制品肝肾毒性要远低于氯化亚汞、氯化汞。