Nesfatin-1对3T3-L1脂肪细胞糖代谢和自噬的影响

为探讨厌食肽Nesfatin-1对脂肪细胞糖代谢和自噬的影响,本试验通过体外诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,并在高糖状态下,以Nesfatin-1干预1 h之后,采用非放射性荧光法、ELISA、实时荧光定量PCR和Western blot分别检测脂肪细胞的葡萄糖摄取水平、丙酮酸含量、己糖激酶和磷酸果糖激酶活性以及自噬因子LC3、p62和Beclin-1 mRNA和蛋白表达量。结果显示,3T3-L1前脂肪细胞经过8 d诱导可达到完全分化状态;与对照组相比,经过Nesfatin-1处理后,3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取水平极显著降低(P<0.01),己糖激酶和磷酸果糖激酶的酶活性均非常显著地降低(P<0.001),p62 mRNA和蛋白表达量极显著下降(P<0.01),但丙酮酸含量、Beclin-1 mRNA以及LC3 mRNA和蛋白表达量差异不显著(P>0.05)。结果提示,Nesfatin-1不仅能有效降低3T3-L1脂肪细胞的糖消耗能力,还能上调脂肪细胞的自噬水平。

Nesfatin-1对糖代谢和脂肪代谢调节的研究进展

Nesfatin-1作为一种新的能量调节肽,在对机体的糖代谢和脂肪代谢调节中具有重要的作用。其中nesfatin-1在调节机体脂肪代谢中,通过影响机体自身的能量消耗、抑制食欲以及抑制脂肪细胞的分化以起到对脂肪代谢的调节作用。其在调节机体糖代谢的过程中,通过中枢和外周的方式对机体的血糖稳态和机体胰岛素的分泌进行刺激以达到调节机体糖代谢的功能。通过调节机体的糖代谢和脂肪代谢,nesfatin-1对糖尿病患者具有潜在治疗作用。nesfatin-1通过对机体的能量调节说明其对肥胖具有潜在的治疗作用。探究nesfatin-1调节机体的糖代谢和脂肪代谢的具体作用,以期为nesfatin-1在应对肥胖和糖尿病以及临床应用方面提供理论依据。

努力推进姚安土地经营权流转新机制的探索

从姚安是农业县、农民对土地的依赖程度大、土地流转难的实际,分析土地流转现状、制约着现代农业的发展问题,提出今后的对策、措施。

AA-CYP表氧化酶代谢产物对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响

花生四烯酸(AA)经过细胞色素P450(CYP)表氧化酶途径生成环氧二十碳三烯酸(EETs)和20-羟基二十碳四烯酸(20-HETE)。为探讨EETs和20-HETE对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响及其机制,本试验将培养的MIN6小鼠胰岛β细胞分为空白对照组和不同浓度EETs和20-HETE处理组,分别采用CCK-8法、流式细胞术和Western blot法检测EETs和20-HETE对胰岛β细胞增殖和细胞周期的影响。CCK-8法结果显示,14,15-EET促进胰岛β细胞增殖,且在一定范围内呈时间和浓度依赖性;流式细胞术结果显示,EETs作用后G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多,从而促进胰岛β细胞的增殖;Western blot试验结果显示,11,12-EET和14,15-EET能够激活AKT磷酸化水平及PI3K活化状况。本试验结果表明,EETs和20-HETE联合使用时,对胰岛β细胞的增殖没有促进作用,但EETs能够促进小鼠胰岛β细胞增殖,其分子机制可能是EETs激活了PI3K/AKT信号转导通路。

砚山小米辣引种高产栽培技术

2007～2009年,在姚安县农业局指导下,通过云南玉簰食品有限公司提供籽种和订单支持,我们引种示范种植了砚山小米辣,示范结果株高50～100cm,展开度50～100cm,每丛结果0.47kg,表现出分枝力强、结果多、产量高、适应性好、丰产抗病等特点。亩产量一般在1100～1700kg,产值2750～4250元,较种植本地辣椒品种亩增收371.5元。1培育壮苗1.1苗床地选择选择地势平缓,地下水位低,背风向阳,土壤肥沃疏松,中性或微酸性,

创新“四位一体”模式 发展高原特色农业

云南省楚雄彝族自治州姚安县栋川镇积极推进高原特色农业产业建设,创新＂科协＋农技中心＋农民专业合作组织＋互联网＂四位一体农技推广社会化服务模式,实现基层科协、农技中心、农民专业合作组织联合会组织网络体系优势互补,资源整合,服务农村,发展产业,惠及农民,一站式服务模式打通了基层农技推广最后一公里。

大白菜“3414”肥效试验

通过对大白菜进行不同肥料、不同施肥水平的试验研究,获取该土壤条件下白菜生产的最佳施肥量和施肥比例。结果表明,每亩施氮18.4 kg、磷4.8 kg、钾8 kg,大白菜产量最高。

双峰驼NUCB2/Nesfatin-1抗体的制备及其表达分布

双峰驼(Camelus bactrianus)经过长期的自然选择,具备了许多特殊的生物学特性,比如极强的耐渴、耐饥饿以及适应恶劣气候等能力。Nesfatin-1是一种由82个氨基酸组成的肽,通过其前体物质NUCB2在Lys 83~Arg 84位点的前激素转化酶(PCs)的蛋白质水解而来,其可以调节机体的能量代谢效率,对食欲有抑制作用。研究双峰驼体内NUCB2/Nesfatin-1的分布与表达,以探究双峰驼体内是否具有特有的能量代谢方式,是否与其不会发生代谢性疾病有一定的联系。使用化学合成的方法合成双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白特定表位的半抗原多肽,使用马来酰亚胺法将半抗原与血蓝蛋白(KLH)偶联,通过免疫动物制备针对NUCB2/Nesfatin-1蛋白单一抗原表位的多克隆抗体,应用Western Blot方法检测NUCB2/Nesfatin-1蛋白在双峰驼下丘脑(弓状核、孤束核、腹内侧核)、前峰脂肪、后峰脂肪、胃(胃底腺周围组织)、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、胰腺、肝以及腹部脂肪组织中的表达情况,使用荧光定量PCR技术检测NUCB2/Nesfatin-1 mRNA在双峰驼上述组织中的表达情况。结果采用GraphPad Prism 5.0软件的t检验分析。合成的双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白特定表位的多肽杂峰很少,经过计算其纯度大于95%。多肽的质荷比[M+4H]^(4+)和[M+3H]^(3+)符合预期。经过间接ELISA法测定制备的针对NUCB2/Nesfatin-1蛋白的多克隆抗体的效价为5.12×10^(5),成功制备多克隆抗体。使用制备的NUCB2/Nesfatin-1多克隆抗体检测双峰驼体内的NUCB2/Nesfatin-1蛋白的分布,其中,在双峰驼脂肪组织和胰腺组织中表达较为显著。荧光定量PCR检测双峰驼体内的NUCB2/Nesfatin-1 mRNA的分布,在所检测的组织中均有基因表达,其中,在腹部脂肪和肝组织的相对表达量较高。本研究通过分析抗原表位及合成多肽的方式,成功制备了针对双峰驼NUCB2/Nesfatin-1蛋白的特异性抗体,且该抗体的效价高、特异性强。通过成功制备的特异性抗体在蛋白层次上检测NUCB2/Nesfatin-1在双峰驼体内的分布情况,再使用荧光定量PCR方法在基因层次检测NUCB2/Nesfatin-1在双峰驼体内的分布情况。通过对结果的分析后发现,NUCB2/Nesfatin-1可能在双峰驼的耐渴、耐饥饿的机制调节中起到了抑制食欲的作用,使得双峰驼可以忍受长时间的饥饿,在双峰驼的外周脂肪组织中高表达,推测NUCB2/Nesfatin-1蛋白在双峰驼体内可能通过抑制脂肪细胞的分化,促进脂肪细胞中脂滴的水解为机体提供能量,其具体在脂肪细胞中的功能有待我们的进一步研究。