黄芩多糖提取、纯化方法筛选及优化

目的:考察黄芩多糖最佳提取和纯化工艺。方法:采用水提醇沉法提取多糖,研究料液比、提取时间、提取温度等因素对黄芩多糖提取率的影响,以提取率为指标,确定最优工艺。采用Sevage法、酶法和盐酸法对黄芩多糖进行处理,以除蛋白率和多糖损失率为指标对3种方法进行评价,采用酶法单因素法试验进行除蛋白工艺研究,以确定黄芩多糖除蛋白最优工艺。结果:提取黄芩多糖的最优工艺为料液比1∶12、提取温度80℃、提取时间1 h。除蛋白结果得出,采用酶法去除蛋白的效率较高,多糖的损失率也最低,是去除黄芩粗多糖中蛋白较好的方法,最优工艺参数为酶解时间1.5 h,酶解温度50℃,酶解pH=6.0,酶用量1%。结论:按照最优提取、纯化工艺得到的黄芩多糖质量合格,为后期黄芩多糖的深入研究提供依据。

高产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及产酶特性研究

为了从腐殖质土壤中筛选得到高产纤维素酶菌株,本试验进行了产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及其产酶特性研究。首先用羧甲基纤维素钠(CMA-Na)培养基初步分离产纤维素酶菌株,再经过酶活复筛得到一株高产纤维素酶菌株B17。经过形态学和16S rDNA测序鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),并对其发酵产酶条件和酶学性质进行初步研究。试验结果表明,菌株B17的最佳发酵条件为:培养时间3 d、发酵温度35℃、初始pH为6.0,该条件下测得CMC酶活达85.48 U/mL、FPA酶活达59.85 U/mL。酶学性质研究表明:菌株所产纤维素酶最适反应条件为温度50℃、pH为6.0,且具在30～60℃、pH为4.0～7.0范围均具有较高酶活。以上结果表明,本研究所得菌株B17具有较高的开发价值,可应用于农作物秸秆饲料的生产。

应用高通量测序技术分析成品甜芽菜微生物多样性

利用高通量测序技术分析成品甜芽菜中微生物组成和多样性。结果显示:从3个样品中共得到65797条高质量的细菌序列代表,OTU聚类609个,分属7个菌门、114个细菌菌属;共得到54750条高质量的真菌序列代表,OTU聚类109个,分属7个菌门、28个真菌菌属。细菌群落中,Proteobacteria(49.1%)和Firmicute(40.9%)菌门具有较大优势;盐单胞菌属(Halomonas,27.2%)的丰度最高,芽孢杆菌属(Bacillus,11.9%)次之。真菌群落中,Ascomycota(63.7%),Basidiomycota(36.1%)菌门具有绝对优势;Saccharomycetales_unclassified (28.5%)、德巴利酵母属(Debaryomyces,15.8%)、Filobasidiaceae_norank(14.1%)3个菌属较为优势。研究结果加深了对成品甜芽菜中微生物群落结构和多样性的认识,对于成品芽菜的保藏提供了一定的参考意义。

高产纤维素酶真菌的筛选及鉴定

该研究旨在从腐殖土中筛选得到高产纤维素酶的菌株。利用刚果红染色作为初筛,菌株酶活测定作为复筛得到3株高产纤维素酶的菌株。通过形态学鉴定与分子生物学鉴定,菌株B03、E15为枝孢菌属(Cladosporium sp.),D11为极细枝孢菌(Cladosporium tenuissimum)。菌株B03在以CMC为底物,28℃、180 r/min条件下培养3 d后,CMC酶活达(427. 62±2. 78) U/m L,FPA酶活为(46. 83±1. 85) U/m L,在以油菜秸秆为底物时其CMC酶活也达到(352. 50±4. 17) U/m L,培养6 d后秸秆降解率达26. 8%,具有较好的降解能力。筛选得到3株高产纤维素酶的真菌菌株,其中菌株B03的纤维素酶活较高,是一株具有研究潜力的纤维素酶菌株。

常压中温下水稻秸秆预处理及酶解研究

探究常压中温下不减小生物质粒度的水稻秸秆预处理方法。以预处理后秸秆保留量(g/g)、预处理秸秆酶解产糖量(g/g)、初始秸秆比产糖量(g/g)为预处理的评估指标。通过单因素实验确定以NaOH为预处理试剂。通过单因素和响应面优化得到预处理的条件为温度55℃、时间30 h、质量浓度1.3 g/d L,初始秸秆比产糖量(g/g)为0.271 g/g,与预测值基本一致。对预处理前后的水稻秸秆进行电镜扫描和红外光谱分析,显示预处理打破了水稻秸秆的部分关键结构,使其易于酶解。以预处理前后的水稻秸秆为唯一碳源,里氏木霉为菌种进行液态产酶产糖发酵,发现未处理的水稻秸秆中微生物不能生长,预处理秸秆发酵液中里氏木霉长势良好,发酵5 d,测得滤纸酶活(filter paper activity,FPA)0.522 IU/m L。本研究将为水稻秸秆预处理技术和生物炼制提供一定的参考。

紫外-常压室温等离子体复合诱变高产纤维素酶真菌

该研究旨在通过复合诱变技术提高真菌产纤维素酶能力。以实验室前期菌株枝孢菌(Cladosporium)B03为出发菌株,经过紫外诱变和常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变处理,通过刚果红染色初筛和酶活复筛,最终得到产酶能力提高的突变菌株AY-42。较原始菌株相比,羟甲基纤维素(carboxy methyl cellulose,CMC)酶活提高36.14%,为(582.14±2.32)U/mL,滤纸酶(filter paper activity,FPA)酶活提高97.03%,为(92.27±0.23)U/mL。并且产酶能力能稳定遗传。该研究通过诱变技术提高枝孢菌B03的产酶能力,为菌株B03应用于纤维素酶生产奠定基础。

越南人书写中国名字案件检验研究

通过一例越南人书写中国名字检材分析,从笔迹检验的原理和科学依据上,难以对一些客观存在的差异点进行合理解释,最终只作出对部分检材进行并案鉴定意见。从案例分析可知:书写人对中文书写规范的认知性;样本的可比性、合法性、充分性问题;鉴定人缺乏检验外国人书写中国文字案件的经验和没有出庭作证的经验。

以水稻秸秆为基质里氏木霉产酶条件优化

以里氏木霉(Trichoderma reesei)为研究对象,对水稻秸秆进行糖化试验。通过单因素试验及响应面法优化里氏木霉产酶培养基及产酶条件。结果表明,里氏木霉产酶最佳培养基为:水稻秸秆15.0 g/L、(NH_(4))_(2)SO_(4)2.0 g/L、KH_(2)PO_(4)3.0 g/L、MgSO_(4)·7H_(2)O 0.5 g/L、吐温-800.5 mL/L、微量元素液10.0 mL/L、FeSO_(4)·7H_(2)O 0.005 g/L。此优化条件下,菌株的滤纸酶酶活为0.612 PFU/mL,提高了52.6%。最佳发酵条件为:发酵温度29℃,初始pH 6、接种量5.0%、转速150 r/min、发酵时间8 d。在此优化条件下,滤纸酶酶活为1.12 PFU/mL,提高了83.2%。

液态发酵原位酶解糖化水稻秸秆工艺优化

为探究以原位酶解方式整合产酶菌株的发酵条件和酶解条件差异的可行性,以木质纤维结构典型的水稻秸秆为对象,里氏木霉为产酶微生物,通过研究液态发酵原位酶解糖化水稻秸秆,对发酵过程和酶解过程协同控制条件进行优化。结果显示,最优产酶发酵条件为水稻秸秆添加量30 g/L,发酵温度30℃,初始pH 6.5,发酵时间48 h;最优酶解条件为酶解pH 4.8,酶解温度50℃,酶解时间24 h,最终的秸秆比产糖量为0.350 g/g。通过在酶解阶段时补加少量的粗酶液(体积分数5%),可以提升最终的比产糖量,由0.332 g/g提升至0.400 g/g,约提升了20%。原位酶解糖化秸秆纤维素是实现水稻秸秆高效降解利用的可行方式。该研究可为纤维素酶解工艺提供技术参考,为秸秆纤维素资源化利用提供一定理论依据。

枝孢菌AY-42产纤维素酶液态发酵优化

为提高枝孢菌AY-42纤维素酶的产量,通过单因素、响应面法优化其培养基成分及产酶条件。采用单因素试验确定了最适碳氮源分别为油菜秸秆粉和酵母粉。采用Plackett-Burman(PB)试验筛选出3个最显著的影响因素:MgSO 4·7H 2 O、油菜秸秆粉、KH 2 PO 4。进一步采用响应面优化后得到培养基组成:油菜秸秆粉12.5 g/L,酵母粉2 g/L,MgSO 4·7H 2 O 0.75 g/L,NaCl 0.5 g/L,KH 2 PO 45 g/L,FeSO 4·7H 2O 0.01 g/L。采用优化后的培养基优化培养条件,结果表明:最佳培养时间为3 d,最佳接种量为5%,最适装液量为70 mL,最适转速为200 r/min,最佳培养温度为28℃。优化后CMC酶活提高到(4.20±0.06)IU,相比优化前酶活3.23 IU提高了30.03%,产酶能力得到较大提升。该研究为枝孢菌应用于纤维素酶生产提供了一定理论支持。

新疆渠道衬砌工程抗冻胀的探讨

在我国的高寒地区,冻胀因素不利于衬砌渠道,在渠道工程建设过程中,解决抗冻胀问题也是当前急需解决的一大难题。重点研究了在我国新疆高寒地区,如何解决抗冻胀问题过程中的基土置换垫层、隔热保温、透水衬砌、优化结构等几个方面,希望能对我国西部高寒地区的灌区加固改造工作有所帮助。

基于肠道菌群和代谢组学研究桦褐孔菌多糖对急性肺损伤小鼠的保护作用

目的:探讨桦褐孔菌多糖(IOP)治疗脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:40只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、IOP高、低剂量组,每组8只。IOP高、低剂量组分别按20、10 mg·kg^(-1)灌胃给药,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,地塞米松组腹腔注射磷酸地塞米松注射液30 mg·kg^(-1),连续给药21 d。构建LPS诱导的ALI小鼠模型,采用苏木素-伊红(HE)染色、免疫荧光染色和血常规检测肺组织病理损伤及血细胞含量。酶联免疫吸附测定法(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各炎症因子表达水平。16S rRNA测序和超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分别检测小鼠肠道菌群及血浆差异代谢物变化。结果:与模型组比较,IOP给药后明显改善ALI小鼠肺组织病变,其脾脏和胸腺指数明显升高(P<0.05,P<0.01),肺湿干重比明显下降(P<0.05,P<0.01),淋巴细胞数明显升高(P<0.05,P<0.01),中性粒细胞数显著下降(P<0.01),白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达水平明显下降(P<0.05,P<0.01),白细胞介素-10(IL^(-1)0)水平显著增加(P<0.01)。16S rRNA测序结果显示,IOP能调节改善肠道微生物紊乱;UPLC-Q-TOF-MS结果表明,IOP治疗ALI小鼠可能涉及核苷酸糖代谢、组氨酸代谢、泛醌和其他萜类化合物-醌生物合成、淀粉和蔗糖代谢等与线粒体、糖、氨基酸代谢相关的通路。结论:IOP改善ALI小鼠肺组织病变、降低炎症反应,可能与维持肠道微生态平衡,调节线粒体电子氧化呼吸链及糖、氨基酸代谢途径,影响相关菌群代谢产物和三羧酸循环代谢产物的产生有关。

百合多糖的化学结构表征和生物活性研究进展

百合是传统中医药中一味重要的滋阴药,具有悠久的用药历史,同时还是一味营养丰富的食材。多糖作为百合中一类重要的活性成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等多重作用。通过对国内外百合多糖的研究报道进行系统整理,综述不同来源百合多糖的结构特征、结构修饰与生物学活性,为百合多糖的研究与开发提供参考与借鉴。