高蛋氨酸饮食诱导大鼠H型高血压

目的:观察高蛋氨酸饮食对大鼠血压和血同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响。方法:8周龄雄性SD大鼠24只,随机分为3组:对照组、高蛋氨酸饮食组和高蛋氨酸饮食后叶酸回补组。对照组大鼠予普通饲料喂养16周,高蛋氨酸饮食组大鼠予蛋氨酸饲料(蛋氨酸为7.7 g/kg)喂养16周,高蛋氨酸饮食后叶酸回补组予蛋氨酸饲料喂养16周后,继续给予蛋氨酸叶酸饲料(蛋氨酸为7.7 g/kg,叶酸为100 mg/kg)喂养4周。每周记录各组大鼠的收缩压(SBP)。喂养结束后处死大鼠,检测血浆Hcy浓度。结果:实验结束时,对照组、高蛋氨酸饮食组和高蛋氨酸饮食后叶酸回补组的Hcy测值分别为4.03、6.16和4.91μmol/L,3组间比较差异有统计学意义(P=0.004)。喂养16周后,高蛋氨酸饮食组(149.8 mmHg)及高蛋氨酸饮食后叶酸回补组(150.0 mmHg)的SBP水平均高于对照组(120.0 mmHg)。叶酸喂养4周后高蛋氨酸饮食后叶酸回补组大鼠的血压降为115.5 mmHg,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高蛋氨酸饮食可诱导大鼠发生H型高血压,叶酸可能有一定的治疗作用。

地震多属性综合分析技术在储层预测中的应用

多属性分析技术是地震储层预测的直接手段之一,近年来得到了广泛应用。大庆长垣西部YT地区葡萄花油层砂岩以薄层、条带状砂体为主,砂体横向变化快,非均质性较强,井控程度低,储层预测难度大。采用多属性综合分析技术,提取并优选地震属性、结合K-L变换的多属性分析优化方法综合预测储层,研究储层参数在平面的展布,取得了较好的效果,为该地区提交探明储量和开发方案部署提供了可靠依据。

脑内高表达microRNAs的时空效应及其在神经管缺陷中的可能作用

微小RNA（microRNA，miRNA）在生物体的发育生长、细胞增殖分化及凋亡、激素的分泌和肿瘤发生等领域中具有重要的调控功能。哺乳动物中枢神经系统的发育过程需要经历多个位点的神经管闭合，若神经管闭合失败或早闭，会导致神经管缺陷（neural tube defects，NTD）的发生，这是一种严重的、多因素的先天性复杂疾病，以往文献报道有多种miRNAs参与了NTD的发病机制。

构造作用对烃源岩演化和分布的影响

烃源岩的形成和分布受多种因素的影响,构造作用是一个主要的方面。研究认为,断裂作用对烃源岩的影响较大,大的断裂对周边富烃凹陷的形成有明显的控制作用,同时断层活动产生的热量也会影响烃源岩的演化。火山作用造成的岩浆侵入体携带的热能可认为是一个附加热源,促进烃源岩的演化。热液中的一些稀有元素会促进源岩的分布和生烃速率,对烃源岩生烃产生积极作用。构造活动中,挤压作用产生的超压也在一定程度上对烃源岩产生影响。

砂体分类综合预测技术在储层评价中的应用

大庆长垣扶余油层以三角洲前缘分流河道沉积为主,砂体多呈短条带状及透镜状,平面上错叠连片,纵向上与泥岩成薄互层,单层厚度薄,储层横向变化快,非均性强;为了提高这类储层地震预测精度,采用了砂体分类综合预测技术。综合利用探井、评价井钻井资料,根据钻遇的储层厚度进行砂体分类;结合地震构造、沉积等寻找砂岩发育最优区,优选部署井位。根据研究结果,累计部署井位106口,钻遇砂岩成功率80%以上。

iTRAQ蛋白质组学方法发现高同型半胱氨酸诱导的鸡胚神经管畸形中存在氧化磷酸化通路异常

目的筛选同型半胱氨酸硫代内酯(HTL)诱导鸡胚神经管畸形差异蛋白以明确高同型半胱氨酸(Hcy)导致神经管畸形的发病机制。方法采用白来航鸡种蛋于孵化28 h进行神经沟注射HTL处理,于第5天(E5)收集胚胎脑组织,采用iTRAQ联合二维液相色谱-串联质谱技术(2D-LC-MS/MS)对差异蛋白质进行筛选,并进一步用蛋白质非标记(1abel-free)定量技术进行差异蛋白的验证。结果在鸡脑组织中共鉴定出369种差异蛋白质;KEGG通路分析提示差异蛋白富集于代谢通路和氧化磷酸化通路;1abel-free(PRM)验证氧化磷酸化通路蛋白ATP5H和ATP5MF在NTDs中表达异常。结论HTL诱导鸡胚神经管畸形脑中氧化磷酸化通路蛋白异常表达。

多属性分析优化方法在南苏丹Greater Unity油田的应用

多属性分析优化方法是地震储层预测的直接手段之一,近年来在许多油田得到了较好应用。南苏丹Greater Unity油田三维地震资料品质差、构造复杂,为了解决地质相控建模和岩性建模的难题,运用多属性分析优化方法进行储层预测和砂体识别。在地震精细解释的基础上,提取多种地震属性,以K-L变换方法进行属性优化,筛选最敏感属性参数。应用结果表明,该方法既降低单一属性的多解性又突出多属性间的差异性,能有效提高储层预测精度,为后期油藏描述和开发方案制定奠定基础。

儿童高血压代谢组学研究进展

高血压作为心血管疾病中常见的疾病之一,严重影响人类身心健康,合理调控高血压患者的血压水平可明显降低脑卒中、心力衰竭、主动脉夹层、终末期肾病等各种疾病的发生几率[1]。既往研究表明,儿童高血压可潜在预测成人高血压[2]。然而,人们对儿童高血压的认识并不充分与成人高血压不同的是,儿童和青少年均处于生长发育期,诊治儿童和青少年高血压也应结合多种因素综合考虑。

CREB结合蛋白调控组蛋白H4乙酰化修饰参与糖尿病雌鼠诱导胎鼠神经管畸形发生机制的研究

目的探讨CREB结合蛋白(Cbp)调控组蛋白H4赖氨酸位点乙酰化修饰参与DM雌鼠诱发胎鼠神经管缺陷(NTDs)的发生机制。方法体外构建高糖处理小鼠神经干细胞(NE-4C)模型及T1DM雌鼠诱发NTDs模型。建立葡萄糖浓度为5 mmol/L的正常对照组(Con组)和25 mmol/L高糖组(HG组)处理NE-4C细胞,HG组分别以DMSO(HG+DMSO组)、1μmol/L的Cbp/P300抑制剂(C646)(HG+C646+1组)、5μmol/L的C646(HG+C646+5组)、5μmol/L的P300/PCAF抑制剂藤黄酚(HG+Gar+5组)、25μmol/L的藤黄酚(HG+Gar+25组)处理。将NE-4C细胞分为转染对照siRNA组(Con-si组)、转染第1个Cbp的siRNA质粒(si-Cbp-1组)、转染第2个Cbp的siRNA质粒(si-Cbp-2组)、共转染第1及第2个Cbp的siRNA质粒(si-Cbp-1+2组)。雌鼠分为正常对照(NC)组(n=38)和STZ构建的TIDM组(n=54)。采用Western blot、RT-PCR、免疫荧光染色检检测。结果 HG组Cbp的mRNA表达和NE-4C细胞增殖能力较Con组升高(P<0.05或P<0.01)。HG+C646+5组组蛋白H4K5/8/12/16ac蛋白水平低于HG+DMSO、HG+C646+1组(P<0.05或P<0.01)。在4 h时,HG+C646+5组NE-4C细胞增殖能力低于HG组(P<0.05)。与Con-si组比较,si-Cbp-1、si-Cbp-2、si-Cbp-1+2组H4K5/8/12/16ac蛋白、Cbp mRNA水平降低(P<0.05)。与NC组比较,T1DM组Cbp的mRNA、组蛋白H4K5/8/12/16ac修饰水平升高(P<0.01)。结论高糖导致Cbp调控组蛋白H4乙酰化修饰异常和NE-4C细胞增殖可能是诱发NTDs的机制之一,Cbp抑制剂可改善组蛋白H4乙酰化水平和NE-4C细胞增殖。

糖尿病诱发神经管畸形的组蛋白乙酰化修饰谱

目的探讨母亲DM诱发胎儿神经管畸形(NTDs)的组蛋白乙酰化修饰机制。方法构建高糖处理小鼠神经干细胞(NE-4C)模型、T1DM雌鼠诱发NTDs胎鼠模型及人类母亲高血糖相关NTDs胚胎脑组织,建立葡萄糖浓度5、25 mmol/L的NE-4C细胞模型组;雌鼠分为正常对照(NC)组(n=40)和STZ构建的TIDM组(n=80);人类样本分为对照(Con)组和NTDs组。Western blot联合Orbitrap QE-HF质谱仪定性分析组蛋白乙酰化修饰谱,定量检测组蛋白特定位点乙酰化修饰水平。结果25 mmol/L组相比5 mmol/L组,TIDM组相比NC组,NTDs相比Con组,组蛋白赖氨酸位点整体乙酰化修饰位点均增加,其中组蛋白H4K5/K8/K12/K16ac修饰在体外体内模型均保守性修饰,且25 mmol/L组H4K5/K8/K12/K16ac修饰水平是5 mmol/L组的2.2倍(P<0.01)。结论组蛋白乙酰化修饰异常增加可能参与调控母亲DM诱发NTDs。

中国山西人群中叶酸代谢基因MTRR和MTHFR与复杂先天畸形关联研究

目的探讨叶酸代谢基因蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)和5,10甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性是否与复杂先天畸形相关,进一步研究其是否与三胚层发育来源的复杂先天畸形相关。方法选取中国山西省250例出生缺陷病例(包括先心病、神经管畸形和颅面畸形等复杂先天畸形)为研究对象,选择MTRR单核苷酸多态性位点rs1801394和MTHFR单核苷酸多态性位点rs1801133,利用SNaPshot方法进行基因分型,并与420例正常对照人群进行比较。结果 rs1801394和rs1801133分别与多个先天出生缺陷有关。在隐性模型下,rs1801394 GG基因型和rs1801133 CC基因型的个体发生先天缺陷的概率低,为出生缺陷的保护性因素。rs1801133隐性纯合作为保护性因素与外胚层和内胚层器官来源复杂先天畸形相关,rs1801394隐性纯合作为保护性因素与外胚层、中胚层和内胚层器官来源的复杂先天畸形相关。结论中国山西人群中叶酸代谢基因MTRR和MTHFR与复杂先天畸形相关,并与胚层发育相关。

质谱检测叶酸缺乏人胚肾细胞中低组蛋白H3赖氨酸79甲基化修饰

目的:探讨叶酸(Folic acid,FA)缺乏在培养的人胚肾细胞(HEK-293)中对细胞组蛋白修饰水平的影响。方法:人胚肾细胞分两组培养,一组正常培养,一组无叶酸培养。细胞提取组蛋白后通过高效液相色谱一线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-LTQ/Orbitrap Ms)检测组蛋白的修饰以比较叶酸缺乏对人胚肾细胞组蛋白修饰的影响。结果:用高分辨质谱方法成功检测到人胚肾细胞的五个组蛋白变体H1,H3,H4,H2a和H2b上的33个组蛋白修饰位点,其中23个修饰位点为uniprot数据库上已经报道的组蛋白修饰位点,而其余10个为未报道修饰位点。通过质谱比较正常和叶酸缺乏组人胚肾细胞修饰谱发现H3K79me1和H3K79me2在叶酸缺乏培养组中检出率较低。进一步用蛋白免疫印迹的方法也证明了在叶酸缺乏的人胚肾细胞中H3K79me1水平低于正常培养组。结论:细胞中叶酸缺乏影响组蛋白甲基化包括H3K79me2和H3K79me1修饰水平,提示细胞外营养因素叶酸水平可影响组蛋白修饰水平从而参与疾病如神经管畸形(Neural tube defect,NTD)的发生。

组蛋白H3K79同型半胱氨酸修饰位点在神经管畸形中的作用

目的:探讨人类胚胎脑组织中是否存在H3K79同型半胱氨酸修饰(H3K79Hcy)及其在神经管畸形(NTDs)中的作用。方法:通过质谱检测组蛋白H3K79是否存在同型半胱氨酸修饰位点。进一步合成包含组蛋白H3K79位点的同型半胱氨酸(Hcy)修饰的肽段,并与牛血清白蛋白(BSA)偶联后免疫兔子得到抗组蛋白H3K79Hcy多克隆抗体,并对抗体进行特异性检测;采用此抗H3K79Hcy抗体比较人类高Hcy NTDs样本和正常对照样本的H3K79Hcy水平。结果:(1)人胚胎组织组蛋白H3K79位点存在同型半胱氨酸修饰;(2)高Hcy水平NTDs脑组织中H3K79Hcy修饰水平高于正常对照(P<0.05)。结论:人胚胎组织存在H3K79Hcy修饰,此修饰异常可能促进神经管畸形的发生。

叶酸缺乏抑制人胚胎干细胞向神经干细胞分化

目的探讨在人胚胎干细胞向神经干细胞分化的过程中,叶酸缺乏对分化的影响。方法人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)H1细胞系培养,并用经拟胚体(embryonic body,EB)法,诱导其向神经干分化。在分化的过程中,分为三组,一组为正常分化对照;一组用甲氨喋呤(Methotrexate,MTX)(可阻断叶酸代谢)处理;一组在MTX处理的同时补充叶酸(Folic acid,FA)。通过免疫荧光方法检测干性标志物Oct-4,Nanog,Sox-2和分化标志分子Tuj-1和Pax6以观察叶酸缺乏对胚胎干细胞分化的影响。结果经EB法成功诱导人胚胎干细胞向神经干细胞分化,可见到神经干分化标志-玫瑰花环,同时免疫荧光结果也表明部分细胞神经分化标志分子Tuj-1和Pax6阳性。MTX组处理后,Tuj-1和Pax6阳性细胞率减少,而MTX+FA分化组,阳性细胞率比MTX组增加,结果P<0.05,有统计学意义。结论 MTX处理导致神经分化细胞减少,补充叶酸可部分拮抗MTX对人胚胎干向神经干分化的抑制。而且人胚胎干细胞向神经干细胞分化的模型是研究叶酸对神经发育影响的合适模型。

同型半胱氨酸硫代内酯诱导鸡胚神经管畸形发生

目的探索不同HTL处理方法和剂量对鸡胚神经管发育的影响,构建鸡胚神经管畸形的最佳动物模型。方法采用白来航鸡种蛋于孵化28h分别采用胚胎滴注,胚盘注射,神经沟注射三种方法给予不同浓度的HTL处理,于E5收集胚胎,观察胚胎表型并记录分析,并进一步对有意义的剂量组及发育时期扩大样本量。结果胚胎滴注组畸形发生率较低,胚盘注射组虽然畸形率有所升高,但胚胎存活率低,神经沟注射组胚胎E5的神经管畸形总发生率达到了41.5%。且在0.5m M HTL神经沟注射时胚胎的畸形率最高。结论 0.5m M HTL神经沟注射可诱导鸡胚神经管畸形的发生。

维甲酸诱导小鼠神经管畸形的剂量依赖性和时间特异性

目的探索不同的维甲酸(retinoic acid,RA)剂量对小鼠神经系统发育的影响以及在特异时间点作用于小鼠胚胎时对神经管闭合的影响。方法采用C57孕鼠于GD7.5分别腹部注射5mg/kg,7.5mg/kg,20mg/kg RA,于GD10.5腹部注射20mg/kg RA,观察胎鼠表型并称量胎鼠重量,胎脑重量,测量眼距和顶距(前囟到鼠喙的距离)。结果 GD7.5腹部注射5mg/kg RA的胎鼠出现无眼畸形,7.5mg/kg的胎鼠出现脑膨出,20mg/kg的吸收胎率为100%,GD10.5腹部注射20mg/kg RA的胎鼠前肢短小其中,GD7.5给予7.5mg/kg RA处理后的胎鼠脑重显著低于正常组和其他实验组;GD7.5时给予7.5mg/kg RA处理组及GD10.5时20mg/kg RA处理组的胎鼠重量显著低于正常组;GD7.5时5mg/kg RA处理组的胎鼠顶距低于正常组。结论在胚胎发育的不同时期暴露于过量的RA会影响不同器官的发育,而且RA对颅面畸形的影响呈剂量依赖性。

组蛋白H3K36三甲基化在基因组中的作用及与疾病的相关性

组蛋白的翻译后修饰在基因的转录调控和损伤修复中发挥这重要的作用,其中H3的第36位赖氨酸位点的三甲基化修饰,已经被证明是一种功能性的蛋白修饰,对发育过程发挥这重要的调节作用。从酵母到人,这种甲基化修饰可以被含SET结构域的甲基转移酶(Set2)、含SET结构域的核受体(NSD1)、去甲基化酶KDM4A改变。具体来讲,H3K36三甲基化对基因的正常表达起着非常重要的作用,它不仅参与基因转录激活,它还参与多种生物过程,包括选择性剪切、剂量补偿、以及DNA修复。破坏H3K36三甲基化在染色质中的分布会导致多种人类疾病。由于环境及营养等多种因素影响H3K36三甲基化,在机体发育和生长过程中的关键基因因为H3K36三甲基化修饰发生改变,会使基因转录表达水平改变,剪切改变,DNA复制过程中发生错配修复缺失、CAG重复序列不稳定性改变、微卫星不稳定最终致使疾病的形成,如神经管畸形、血管畸形、亨特综合症、强直性肌营养不良、以及结肠癌等。因此,本综述拟从K36三甲基化修饰的功能以及功能受损后导致的疾病等几个方面对关于该修饰所做的近期报道进行总结。

STIL基因表达上调引起HEK293T细胞周期紊乱

目的讨论stil基因表达上调对HEK293T细胞周期的影响。方法构建过表达STIL质粒,转染HEK293T细胞,PI/RNase双染色后流式细胞仪检测细胞周期变化。结果空白对照组与转染对照组相比,stil基因表达上调导致HEK293T细胞各个周期细胞比例无显著差异(P>0.05);实验组与转染对照组相比,在过表达24h、48h、72h后,G1期细胞比例显著下降,S期细胞比例明显增加(P<0.05)。结论 stil基因表达上调影响了HEK293T细胞周期的正常进程,导致细胞周期紊乱。

让体育课堂充满童趣

《体育课程标准》指出:充分利用体育资源,可以充实和更新体育课程内容,提高体育教学效果,使学生获得更多的体育与健康知识和技能.新课标十分注重学生自主性的培养,尤其着重提出了要让学生体验参加体育活动的乐趣.根据新课标的精神,并结合学生的身体和心理特点,我运用童话故事在体育教学中进行了一些有益的尝试. 一、运用童话故事。