苍夷滴鼻油对小鼠鼻黏膜损伤的修复作用及紧密连接蛋白表达的影响

目的:探讨苍夷滴鼻油对小鼠鼻黏膜损伤的修复作用及其可能的作用机制。方法:按照均衡随机法将60只昆明(KM)小鼠分为空白对照组、模型对照组、滴通鼻炎水阳性对照组及苍夷滴鼻油高剂量、中剂量、低剂量组,每组10只。除空白对照组外,其余组均以70℃蒸馏水50μL滴于小鼠双鼻中隔黏膜,制备鼻黏膜损伤模型。空白对照组、模型对照组不做处理,滴通鼻炎水阳性对照组给予滴通鼻炎水混悬液治疗,苍夷滴鼻油各给药组给予高、中、低不同浓度的苍夷滴鼻油混悬液治疗,滴鼻量均为5μL/(只·次·侧),连续给药7d。肉眼观察小鼠鼻黏膜肿胀、淤血情况,评估鼻黏膜红肿程度,HE染色光镜下观察鼻黏膜组织病理学改变,免疫组化分析鼻黏膜上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1、Occludin表达水平。结果:模型对照组红肿评分高于空白对照组(P<0.05),滴通鼻炎水阳性对照组、苍夷滴鼻油高剂量组红肿评分均低于模型对照组(P<0.05)。模型对照组黏膜表皮细胞明显剥脱,上皮细胞水肿,杯状细胞肥大,基底膜层破坏,黏膜上皮层下血管明显扩张,血管数量增多,固有层间质水肿,腺体肥大,腺管扩张,有大量炎症细胞浸润,整个黏膜层增厚,结构出现紊乱。模型对照组ZO-1、Claudin-1、Occludin表达水平均低于空白对照组(P<0.05)。滴通鼻炎水阳性对照组、苍夷滴鼻油高剂量组、苍夷滴鼻油中剂量组ZO-1表达水平及滴通鼻炎水阳性对照组、苍夷滴鼻油高剂量组Claudin-1、Occludin表达水平均高于模型对照组(P<0.05)。结论:苍夷滴鼻油对热水刺激导致的小鼠鼻黏膜损伤有明显的修复作用,其作用机制可能与上调鼻黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1、Occludin表达有关。

黄芪等5种中药对小鼠辐射损伤防护作用的实验研究

随着核工业和放射医学的快速发展，电离辐射对人体的损伤越来越受到重视。大剂量的辐射对人体各系统均有损伤，其中造血系统和免疫系统最为敏感。电离辐射为非特异性刺激，作用于机体引起器官、组织、淋巴细胞最终导致免疫系统功能下降。由于造血系统和免疫系统对电离辐射极为敏感，在辐射防护中增强对造血系统和免疫系统的保护是非常必要的。中医药在辐射损伤的防治中具有一定的作用。

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导肝癌细胞H_(22)凋亡的作用及其机制

为了研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)诱导癌细胞凋亡的作用及其机制,采用细胞培养技术,以肝癌细胞系H22为靶细胞,以不同浓度的rBTI体外处理细胞不同时间后,采用MTT检测、DNA电泳分析、细胞核形态学观察、细胞色素c检测、caspases活性检测等方法测定rBTI在体外诱导肝癌细胞H22凋亡的作用。结果显示rBTI能够在体外特异性地抑制H22细胞的生长,诱导H22细胞凋亡,随着rBTI浓度及作用时间的增加,呈现剂量和时间依赖性效应。经rBTI处理的细胞可导致细胞色素c从线粒体释放到细胞质中,并能增强caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性。结果表明,rBTI能特异性地诱导H22细胞凋亡,其机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关。

苦荞异槲皮苷对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响

从苦荞中提取制备异槲皮苷,研究其对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、迁移和细胞周期的影响。将异槲皮苷作用于人胃癌SGC-7901细胞和人肾上皮细胞系293T,通过噻唑蓝法检测异槲皮苷对其增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamino-2-phenyl indole,DAPI)荧光染色法观察细胞核的形态学变化;划痕擦伤迁移实验检测异槲皮苷对SGC-7901细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测异槲皮苷对SGC-7901细胞凋亡及细胞周期的影响。结果表明:苦荞异槲皮苷可以抑制SGC-7901细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,当用100μmol/L异槲皮苷作用细胞48 h后,对SGC-7901细胞的增殖抑制率达到35.92%,而对人肾上皮细胞系293T的增殖抑制率仅为3.15%;DAPI荧光染色法观察异槲皮苷处理细胞后,染色体凝聚,有凋亡小体产生;划痕擦伤实验显示,异槲皮苷能抑制SGC-7901细胞的迁移;流式细胞术检测结果表明,异槲皮苷可使G1和S期细胞减少,G2/M期细胞增多,且细胞凋亡率明显增加。综上所述,苦荞麦异槲皮苷能够诱导SGC-7901细胞发生凋亡,阻断细胞周期并抑制细胞增殖和迁移。

重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对人肝癌细胞的凋亡及半胱氨酸天冬酶活性的影响

先前的研究表明,基因重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)具有诱导不同肿瘤细胞凋亡的作用.为了揭示其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机理,从基因水平上探讨与凋亡有关的分子事件,本研究用不同浓度的rBTI体外作用于人肝癌细胞HepG2后,采用MTT比色法检测抑制剂对HepG2细胞的抑制率,用DNA凝胶电泳和细胞核的形态学观察检测HepG2细胞的凋亡.结果表明,rBTI在体外能够明显抑制HepG2细胞的增长,并诱导细胞凋亡.另外,细胞凋亡与Bcl-2/Bax mRNA水平有关.通过RT-PCR检测发现,细胞经过rBTI处理后,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA水平下调,促凋亡基因Bax mRNA有所上调,而对照GAPDH无变化.对HepG2细胞中Fas/Fas配体及半胱氨酸天冬酶(caspase)的研究证明,细胞经过rBTI处理后,对死亡受体Fas mRNA没有影响;rBTI可明显激活caspase-3和caspase-9酶活性,对caspase-8活性几乎无影响.上述结果表明,rBTI对HepG2细胞具有明显的诱导凋亡作用,其诱导细胞凋亡的机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关,未涉及Fas/Fas配体途径.

聚肌胞苷酸诱导的早期原发性胆汁性肝硬化小鼠模型的建立

目的探讨应用聚肌胞苷酸建立早期原发性胆汁性肝硬化动物模型。方法 30只雌性C57BL/6小鼠被随机分为模型组和对照组。模型组小鼠腹腔注射聚肌胞苷酸(5 mg.kg-1),对照组小鼠注射等体积生理盐水,均2次/w,于8 w、16 w和24 w分别检测血清抗线粒体抗体M2亚型、外周血CD4+CD25+Foxp3+计数,以及肝组织CK19表达情况。结果在24 w末,模型组AMA-M2阳性率为100%(5/5),显著高于对照组(0/5);在8 w、16 w和24 w,模型组小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+细胞计数分别为(3.48±0.95)%、(3.30±1.55)%和(2.67±0.97)%,均显著低于相应时间点对照组水平[(7.25±1.63)%、(6.33±1.06)%和(5.58±1.52)%,P<0.05];两组肝组织CK19表达无显著性差异;病理学检查显示模型组小鼠肝组织汇管区和胆管周围炎性细胞浸润呈进行性加重,细小胆管增生,出现胆汁性碎屑样坏死和桥接纤维化,但未出现肝硬化。结论聚肌胞苷酸注射可成功建立早期原发性胆汁性肝硬化动物模型,CD4+CD25+Foxp3+T细胞可能在发病中发挥重要作用。

对药香橼佛手对抑郁大鼠T细胞亚群的影响

目的:观察行气疏肝对药香橼佛手对抑郁大鼠T细胞亚群的影响。方法:用慢性不可预见轻度应激抑郁症动物模型(CUMS)配合孤养的方法造模,将造模成功大鼠分为模型组、氟西汀阳性组、香佛对药水提组和醇提物组,外加空白对照组。通过体重、糖水偏爱率、旷场试验、脾和胸腺脏器指数及T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)各项指标评价对药香橼佛手对抑郁大鼠细胞免疫功能的影响。结果:CUMS配合孤养模型造模后体重、糖水偏爱率、旷场试验各项指标均显著低于空白对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.001);对药香佛水提组体重、水提和醇提组糖水偏爱率及两组旷场试验水平运动明显高于模型对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05),且两组间无差异;模型对照组胸腺指数、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著低于空白对照组(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.05);对药香佛水提组CD3+与醇提组CD3+、CD4+百分率显著高于模型对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。结论:对药香佛水提和醇提组对抑郁大鼠体重、糖水偏爱率、旷场试验水平运动有增高作用,且两组间无差异;抑郁大鼠免疫系统胸腺指数及T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)水平低下;对药香佛水提和醇提物对抑郁大鼠T细胞亚群(CD3+、CD4+)有增高作用且两者间无差异。

通关藤总皂苷提取工艺及抗肿瘤活性研究

目的:优化通关藤总皂苷的提取纯化工艺,测定通关藤总皂苷的抗肿瘤活性。方法:采用正交试验,以总皂苷收率作为指标优化通关藤总皂苷的最佳提取工艺;采用动态吸附实验,分别考察了5种不同型号的大孔树脂(D101,AB-8,ZTC-1,NKA-9,D3520)对通关藤总皂苷的吸附和解吸性能,并以吸附量、洗脱量为考察指标,对通关藤总皂苷的纯化工艺进行了筛选,以通关藤苷A为对照,采用紫外分光光度法测定通关藤总皂苷的含量;采用MTT法检测通关藤总皂苷的抗肿瘤活性。结果:通关藤总皂苷的最佳提取工艺为:加入10倍量70%乙醇,加热回流提取3次,每次2 h。ZTC-1具有最佳吸附与解析参数,最佳纯化工艺为:取通关藤粗提取物,加相当于生药量15倍的蒸馏水溶解,离心,取上清液,通过ZTC-1树脂柱,依次用水、50%乙醇洗脱至无色,弃去,再用70%乙醇洗脱1.5 BV,收集洗脱液,减压浓缩至无醇味,冷冻干燥,即得通关藤总皂苷。通关藤总皂苷对人肝癌细胞Hepg2具有抑制作用,高浓度组与空白对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。当提取物浓度大于0.312 mg/mL时,人肝癌细胞Hepg2的增殖即受到抑制,且随着药物剂量的增大其差异更为显著。结论:所得提取纯化工艺简单可行,具有很好的应用前景,为通关藤总皂苷的深度开发提供依据。

芪苑益肾颗粒对阿霉素肾病综合征大鼠足细胞影响实验研究

目的:观察芪苑益肾颗粒对阿霉素肾病大鼠蛋白尿、血清白蛋白、总胆固醇及肾脏组织病理学、足细胞足突的影响。方法:单次尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,进行尿蛋白定量、血清白蛋白、总胆固醇检测及肾脏组织病理学、足细胞足突的观察。结果:芪苑益肾颗粒可降低阿霉素肾病大鼠蛋白尿(P<0.01),升高血清白蛋白(P<0.05);肾脏组织病理学显示芪苑益肾颗粒能抑制肾小球系膜细胞、基质过度生成及减少肾小管蛋白管型形成,减轻足细胞足突融合。结论:芪苑益肾颗粒明显减少阿霉素肾病大鼠蛋白尿、改善血清白蛋白代谢、减轻肾组织病理损害及足细胞足突病变。

rBTI联合紫杉醇通过激活NFκB/p65促进MCF-7细胞凋亡

rBTI、紫杉醇均有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等作用,但两者联合用药对肿瘤细胞的影响尚不明确.本文通过MTT比色法检测rBTI与紫杉醇联合作用对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析,对MCF-7细胞凋亡以及ROS水平进行检测;利用qRT-PCR和Western印迹方法,检测rBTI与紫杉醇联合作用后凋亡因子表达情况.结果表明,rBTI（2.5μmol/L）与紫杉醇（0.05~0.5μmol/L）联合作用于MCF-7细胞后,能显著抑制其增殖.将rBTI与紫杉醇进行联合协同用药,诱导了MCF-7细胞凋亡及ROS的产生;同时与rBTI单独作用时相比,联合作用明显上调了p53、Bax的表达,促进了IκBα蛋白的磷酸化以及NFκB/p65的核转位;与rBTI组和紫杉醇单独作用组相比,两者联合用药明显下调了Bcl-2和CyclinD1的表达.本研究证实,rBTI联合紫杉醇通过诱导ROS的产生,激活NFκB/p65信号转导途径,协同促进MCF-7细胞的凋亡.

血清miRNA-122和miRNA-155联合检测对酒精性肝损伤早期诊断研究

目的探讨血清miRNA-122和miRNA-155联合检测对酒精性肝损伤大鼠早期诊断的应用价值。方法采取连续白酒灌胃的方式构建酒精性肝损伤大鼠模型,实验分为3组,正常对照组,实验1组(白酒灌胃5天)和实验2组(白酒灌胃10天)。采集大鼠血清,ELISA方法检测肝功能生化指标(ALT和AST)和炎症因子(TNF-α),实时荧光定量PCR检测miRNA-122和miRNA-155表达水平变化。结果白酒灌胃5d,模型组ALT、AST和TNF-α水平不同程度升高,miRNA-122和miRNA-155表达水平显著高于对照组(P<0.01,P<0.05);白酒灌胃10d,模型组ALT、AST、TNF-α、miRNA-122和miRNA-155表达水平显著高于对照组(P<0.01)。结论 miRNA-122和miRNA-155联合检测比现有的肝功能生化指标具有更高的检测灵敏度,可作为酒精性肝损伤疾病潜在的诊断标志物。

枳朴方中空栓对术后肠麻痹大鼠肠道屏障功能的影响

目的观察枳朴方中空栓对术后肠麻痹大鼠肠道菌群及结肠上皮细胞凋亡率的影响,并探讨其作用机制。方法将50只雌性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、培菲康中空栓组及枳朴方中空栓低、高剂量组。通过子宫切除手术建立术后肠麻痹模型。于造模后48 h检测大鼠粪便大肠杆菌、双歧杆菌及结肠上皮细胞凋亡的变化。结果与空白对照组比较,模型对照组大肠杆菌明显增多、双歧杆菌明显减少(P<0.01);与模型对照组比较,枳朴方中空栓高剂量组大肠杆菌明显减少、双歧杆菌明显增多(P<0.01)。与空白对照组比较,模型对照组结肠上皮细胞凋亡率明显增高(P<0.01);与模型对照组比较,枳朴方中空栓高剂量组结肠上皮细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。结论枳朴方中空栓能够改善术后肠麻痹大鼠肠道菌群紊乱及肠上皮细胞凋亡情况,从而发挥预防和治疗术后肠麻痹的作用。

芪苑益肾颗粒对阿霉素肾病大鼠T细胞亚群的影响

目的观察芪苑益肾颗粒对阿霉素肾病大鼠外周血T细胞亚群及共刺激分子CD28表达的影响。方法采用单次尾静脉注射阿霉素14 d制造肾病大鼠模型,空白组注射等量生理盐水。造模成功后,空白对照组和模型对照组分别给予蒸馏水,而阳性对照(醋酸泼尼松片5 mg/kg)、芪苑益肾颗粒低(1.5 g/kg)、中(3.0 g/kg)、高剂量(6.0 g/kg)分别给药,连续灌胃21 d后,采用流式细胞术检测阿霉素肾病大鼠外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8及共刺激分子CD28的表达。结果外周血T细胞亚群CD3+、CD4+芪苑益肾颗粒低、中、高剂量组显著高于阿霉素肾病大鼠模型组(P<0.05);共刺激分子CD28的表达低、中剂量显著高于模型组(P<0.01);与模型组比较,高剂量组CD4/CD8显著升高(P<0.01),而CD8+显著降低(P<0.05)。结论芪苑益肾颗粒可能对阿霉素肾病大鼠外周血T细胞亚群及共刺激分子CD28表达有免疫调节作用。

自拟“清淋速杀宝”治疗性传播疾病400例

本品由特制的粘附性液状物和缓释胶吏组成,是治疗性传播疾病的纯天然植矿物外用制剂。经周密科学的基础实验和检测结果表明无毒副作用,经中国军事医学科学院实验研究表明:本品1:10稀释液可于3分钟杀灭艾滋病毒100％,对淋球菌疱疹Ⅱ型病毒、真菌、滴虫等具有极强的杀灭作用。

止痛消结膏临床应用近况(附311例分析)

止痛消结膏通过临床研究证明,具有明显的软坚散结,理气止痛、化痰通络等作用,提示本品有良好的消除肿块、镇痛作用,为结块类病的治疗开辟了新的途径。

中国土木工程学会市政工程分会赴美考察报告

应美国土木工程学会邀请,中国土木工程学会市政工程学习考察团一行十人,于二○○○年十一月二十日至十二月八日赴美考察,先后访问了纽约、华盛顿、旧金山等城市,重点访问了曾举办过奥运会的洛杉矶及亚特兰大,对那里的奥运场馆设施、道路交通等城市基础设施进行了考察,以供北京申办奥运学习借鉴.

维药脱色宝治疗色素性皮肤病疗效观察

新疆维吾尔族民间验方——人面桃花草,有良好的去皮肤色素作用,但其常用的传统民间制备工艺使它难以长期贮存,也难以批量生产,限制了其临床应用和推广。针对这一点,我们在原配方基础上又加入多味名贵中草药。既显著增强了疗效,又克服了其剂型不够稳定的特点,定名“维药脱色宝”。现报告如下:

强力抗毒精临床观察100例

强力抗毒精,是根据祖国医学理论,结合现代药理研究,筛选天然中药组方配伍,采用传统工艺流程,精心研制而成的。我院1994年2月至5月间,试治淋病、生殖器疱疹、滴虫性阴道炎100例,收到较满意的疗效。兹作如下小结:

槲皮素诱导Hep G2自噬与胞内游离Ca^(2+)浓度的变化相关

槲皮素具有诱导细胞自噬、抑制肿瘤细胞增殖等抗癌功能,但其诱导细胞自噬的分子机制还不太清楚.本文通过激光共聚焦显微镜观察槲皮素对Hep G2细胞自噬的影响;Fluo-3 AM和Cyto-IDTM Green Detection Reagent染色标记,流式细胞术测定了槲皮素对Hep G2细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i及Ca2+螯合剂BAPTA-AM对自噬水平的影响.探讨了槲皮素诱导人肝癌细胞Hep G2自噬过程中[Ca2+]i的变化.结果表明,在槲皮素较低浓度范围内(0～50μg/mL),可明显抑制Hep G2细胞增殖,并以剂量依赖方式诱导细胞自噬.同时发现,槲皮素刺激Hep G2细胞可使[Ca2+]i明显增加,进而促进自噬.而当胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM存在时,细胞的自噬水平受到一定的抑制.这些结果表明,细胞内[Ca2+]i的升高可促进自噬,[Ca2+]i的降低可能会抑制自噬.Hep G2细胞自噬与细胞内游离钙离子浓度的变化有关系.

中西医结合治疗少精症初探(附120例分析)

男性不育症是由精液异常或性功能障碍所引起女方不育的总称。特发性少精症是造成不育症的最常见的疾病之一。国内曾有中医治疗本病的报道,然分型论治者鲜见,笔者在运用中医辨证论治结合西医,对该病进行治疗,从一九八○年到一九八八年十月共治疗特发性少精症120例,疗效满意,现报告如下: