新生鼠胰岛干细胞分离、培养和分化的实验研究

目的 探索新生鼠胰岛干细胞体外分离鉴定、培养以及体外分化的方法。方法 用胶原酶消化新生大鼠胰腺 ,将消化的组织碎片在pH7.4～ 7.6条件下经含血清RPMI 164 0及无血清RPMI164 0 (添加bFGF ,EGF ,N 2 )培养液中培养 ,观察形成类胰岛样细胞团的全过程。用胰岛素释放实验检测胰岛功能 ,免疫荧光法检测nestin的表达。结果 胰腺消化碎片培养 3 6h内 ,可见nestin阳性细胞贴壁 ,添加bFGF ,EGF ,N2后nestin阳性细胞快速增长 ,18～ 2 4d形成类胰岛样细胞团 ,并可表达胰岛素。结论 胰腺细胞中nestin阳性细胞具有胰岛干细胞特点 。

腹腔镜远端胃癌D2根治术中清扫第11p组淋巴结相关解剖及技巧

随着腹腔镜技术的日趋成熟,腹腔镜胃癌根治术逐渐得到推广与普及,被越来越多的胃肠外科医师所接受。2016年、2017年分别发布了中国腹腔镜胃癌根治术操作指南(2016版)[1]、中国腹腔镜胃癌根治术质量专家共识(2017版)[2],针对不同部位的肿瘤,腹腔镜下淋巴结清扫趋于定型化。远端胃癌根治术中胰腺上区淋巴结清扫是重点,主要包括第7、8a、9、11p、12a组淋巴结。由于脾动脉走行迂曲、部分患者脾静脉位于胰腺后方,显露困难,以及胃后动脉变异较多等原因,第11p淋巴结清扫仍是主要难点之一。近年,有不少关于腹腔镜下第11p淋巴结清扫的报道[3-5],但术中如何界定第11p淋巴结清扫范围,何种路径清扫更安全、更利于完整切除,这些问题均需进一步探讨。根据以往的临床实践,我们将基于胃底体部周围膜与层的特点,谈谈精准安全、完整清扫第11p淋巴结的技巧。

胆管非扩张型胰胆管合流异常诊治的进展

胆管非扩张型胰胆管合流异常 ,是否易引起胆管癌及胆囊癌 ?治疗上是否需要切除胆管、重建胆道的分流术 ?目前无统一的观点。笔者结合近年来的有关文献 ,就胆管非扩张型胰胆管合流异常诊治的进展做一综述。

非手术治疗成人外伤性脾破裂适应证的选择

目的 :探讨非手术治疗成人外伤性脾破裂适应证的选择。方法 :回顾性分析了手术和非手术治疗的外伤性脾破裂 67例。结果 :5 5例手术患者术中有活动性出血者占 72 .7% ,其中 I型脾裂伤术中有活动性出血率明显低于其它各型 ( P<0 .0 1 ) ,而 型脾裂伤腹腔内积血量分布与 、 、HS及 HD型比较差异有显著性 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1 )。 1 2例非手术治疗的患者入院前 B超检查均为未涉及脾门的浅表裂伤。结论

2型糖尿病外科治疗的必要性

糖尿病对人类健康造成了极大的威胁,然而目前病因仍然未明。传统的内科治疗方法无法有效地控制糖尿病及其相关并发症。近20年来外科治疗糖尿病的疗效引起了临床医师的广泛关注。随着微创外科技术的快速发展,手术治疗糖尿病的方法已经成为糖尿病综合治疗策略的重要措施。本文对手术治疗糖尿病的历史演进、疗效及展望做一综述。

预防性添加胰蛋白酶抑制剂对成年猪胰岛分离的影响

目的 开发成年猪胰岛分离方法。方法 取成年猪胰体尾部,胰管内注入0.1%冷胶原酶(type Ⅺ)消化液, 在38.5 ℃水箱中消化后,放入4 ℃Hanks液中分离并用600μm的滤过网过滤。残留的组织重新悬浮在冷Hanks液中,并放入Ricordi’s chamber内振荡5 min后再次过滤。胰岛分离分为对照组(n=14)、Pefabloc(胰蛋白酶抑制剂)组(n=8)及FOY(胰蛋白酶抑制剂)组(n=5)。Pefabloc组和FOY组消化液中分别添加1.0 mmol/LPefabloc或FOY。结果 Pefabloc组及FOY组的胰岛收获量分别为(11 848±3 530) 个/g 和(14 496±3 693)个/g,明显高于对照组的(8 505±3 349) 个/g,P<0.05。消化后的消化液胰蛋白酶活性对照组为(114.7±50.0)BAEEU,明显高于胰管内注入前的(4. 0±1. 8) BAEEU 及Pefabloc 组的(5. 5±2. 7) BAEEU(P<0. 01),但Pefabloc组与胰管内注入前却差异无统计学意义。对照组胰岛收获量≥8 000 个/g组的胰蛋白酶活性明显低于收获量<8 000 个/g组的活性〔(78.3±26.7) BAEEU vs (137.5±48.4) BAEEU〕,P<0.05。对照组、Pefabloc组及FOY组纯化后的胰岛对不同浓度葡萄糖显示了良好的胰岛素分泌能力。结论 本实验采用的胰岛分离方法能够获得大量的猪胰岛细胞,而且预防性添加胰蛋白酶抑制剂后进一步稳定地提高了胰岛收获?

成年猪胰岛分离方法的改进

目的 :开发成年猪胰岛分离方法。方法 :取成年猪胰腺体尾部 ,胰管内注入冷 0 .1 %胶原酶消化液 ,在 38.5℃水浴箱中消化后 ,放入 4℃ Hanks液中分离并用 60 0μm的滤过网过滤回收。残留的组织重新悬浮在冷 Hanks液中 ,并放入 Ricordi′s chamber内振荡 5min后再次过滤回收。用Ficoll不连续密度液梯度离心法进行胰岛纯化。结果 :纯化前、后胰岛收获量分别为 ( 850 5± 3349)g-1〔IEQ:( 4 2 53± 2 732 ) g-1)、( 2 334± 1 2 2 3) g-1〕,纯度 >80 %。胰岛收获量与消化后的消化液胰蛋白酶活性显示了弱的负相关 ( r=- 0 .44,P=0 .1 3) ,胰岛收获量≥ 80 0 0 g-1组的消化后消化液胰蛋白酶活性明显低于胰岛收获量 <80 0 0 g-1( 78.3± 2 6.7vs1 37.5± 48.4BAEEU,P<0 .0 5)。结论 :我们采用的胰岛分离方法能够获得大量的猪胰岛细胞 ;胰蛋白酶活性影响胰岛收获量。

腹腔镜胃袖状切除术中保留胃窦部及His角完整性对术后恶心呕吐的影响

目的探讨腹腔镜胃袖状切除术中保留胃窦部及His角完整性对术后恶心呕吐(postoperative nausea and vomiting,PONV)及止吐药物使用的影响。方法回顾性分析首都医科大学附属北京潞河医院内分泌与代谢病科2022年1月至2023年7月行腹腔镜胃袖状切除手术的肥胖症病人80例,根据术中是否保留胃窦部及His角周围组织完整性分为保留胃窦部及His角完整性组(A组,36例)和常规手术组(B组,44例)。对比分析两组术后24 h内恶心呕吐、止吐药物使用、术后肠道功能恢复情况及术后出院时间的差异性。结果A组与B组病人PONV发生率比较[术后12 h:27.8%(10/36)比59.1%(26/44),术后24 h:33.3%(12/36)比65.9%(29/44)],差异均有统计学意义(均P<0.05);A组、B组术后24 h止吐药物使用次数分别为(0.7±1.2)次、(1.4±1.1)次,差异有统计学意义(P<0.05);A组比B组术后首次肛门排气时间更早(P<0.05);两组病人术后首次饮水和住院时间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论保留胃窦部及His角完整性有利于降低胃袖状切除术PONV的发生率,减少术后止吐药物的使用及促进术后胃肠道功能的恢复。

原发性腹茧症的影像学特征、治疗及预后分析

目的研究原发性腹茧症的影像学特点和预后影响因素。方法回顾性分析首都医科大学附属北京天坛医院普外科2000年1月～2009年12月收治的原发性腹茧症患者的临床特征、CT检查资料、治疗方法和预后。结果全部6例均表现为肠梗阻。腹部X线平片可见小肠扩张积气肠袢及液气平面。腹部CT检查可见小肠扩张聚集成团,其周围似可见增厚的包膜包裹。腹部B超检查均发现小肠肠管部分扩张,4例可见少量腹水。5例进行了消化道钡餐检查,均提示回肠远端钡剂通过缓慢,其中1例提示回肠远端狭窄,另1例造影后出现完全性肠梗阻。剖腹探查术中均显示全部或部分小肠被一层灰白色致密坚韧的纤维膜包裹,大网膜缺如。均行部分纤维膜剥除、粘连松解术等,1例同时行部分小肠切除术。术后6例全部治愈。结论消化道造影和腹部CT检查对于原发性腹茧症具有重要的诊断价值。手术是安全有效的治疗方法。

腹腔镜袖状胃切除术治疗单纯性肥胖疗效

目的探讨腹腔镜袖状胃切除术(laparoscopic sleeve gastrectomy,LSG)对肥胖及肥胖合并疾病的疗效及安全性。方法回顾性分析首都医科大学附属北京天坛医院于2012年7月至2015年9月接受腹腔镜胃袖状切除手术的26例单纯性肥胖病人临床资料。记录术后3、6、12和18个月时体质量指数(body mass index,BMI)及多项生物化学指标等。结果所有病人均顺利完成LSG术,无中转开腹。手术时间50~170 min,平均(79.7±4.7)min;术中出血10~50m L,平均(24.6±1.8)m L;术后住院日为5~13 d,平均(5.9±0.3)d;术后腹腔积液、腹腔出血各1例,无二次手术病例。术后3、6、12、18个月时,多余体质量减少分别为54.9%、62.7%、80.1%和68.4%,随访3~36个月未出现不可控制的体质量下降等恶性营养不良。随访期间出现1例(3.8%)胆囊结石、2例(7.6%)缺铁性贫血、2例(7.6%)胃食管反流症状。术后肥胖相关疾病如糖尿病、高血压、脂肪肝、高脂血症等均有明显改善。结论腹腔镜袖状胃切除术治疗单纯性肥胖症减重效果确切、安全,但其与胃旁路手术等其他减重手术的效果对比尚需进一步研究。

肠外营养支持下胃肠道肿瘤患者围术期甲状腺激素及前清蛋白水平变化及意义

目的探讨肠外营养支持下胃肠道肿瘤患者围术期甲状腺激素(TH)及前清蛋白(PA)水平变化及临床意义。方法行根治术的胃肠道肿瘤患者30例为肿瘤组。同期我院收入院的无甲状腺疾病的患者20例为对照组。对照组于术前,肿瘤组于术前1 d及术后第1、3、5、8天分别检测血清TH及PA水平。肿瘤组于术后给予15～20 kcal.kg-1.d-1的肠外营养支持5～7 d。用微粒子捕捉酶免疫分析法检测血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、游离甲状腺素(FT4)及促甲状腺激素(TSH)水平,荧光偏振免疫分析法检测血清总甲状腺素(TT4)水平,放射免疫分析法检测血清反三碘甲状腺原氨酸(rT3)、PA水平。结果肿瘤患者术前1 d及术后第1、3、5、8天的FT3、TT3、rT3水平比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。其中,术后第8天分别与术前1 d、术后第5天的FT3、TT3、rT3水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后第1、5、8天血清PA与FT3均呈正相关(P<0.01),术后第3、5、8天血清PA与rT3均呈负相关(P<0.01)。结论胃肠道肿瘤患者术前已存在非甲状腺疾病综合征(NTIS);胃肠道肿瘤患者术后NTIS短期内很难完全恢复;FT3、rT3可作为胃肠道肿瘤患者围术期代谢状态和营养状态的客观指标。

结直肠癌围手术期肠内营养支持的临床研究

目的：探讨结、直肠癌病人围手术期使用肠内营养（EN）制剂进行术前肠道准备及术后早期EN支持的可行性和效果。方法：结、直肠癌择期手术病人42例，随机分为两组。试验组（EN组）21例，术前3d口服能全力作术前肠道准备，术后12～24h开始以能全力进行早期EN支持；对照组（传统方法组）21例，术前采用传统的半流食-流食-禁食补液方法进行肠道准备，术后给予禁食、输液-流食-半流食过渡。比较两组手术前日晚清洁洗肠的次数、肠道的清洁程度、术后肛门或造口排气的时间以及手术前后出现腹胀、腹痛、恶心、呕吐、腹泻、乏力等不良反应和术后并发症的发生情况；分别记录并比较肠道准备前（术前3d）、手术当天清晨（手术前）、营养支持结束时（术后第8d）的体重、血总淋巴细胞计数（LY）、血红蛋白（Hb）、总蛋白（仰）、清蛋白（ALB）及前清蛋白（PA）等。结果：两组肠道清洁度无显著差异（P〉0．05）；试验组手术前日晚清洁洗肠的次数明显少于对照组（P〈0．01）；术后肛门或造口排气的时间明显较对照组提前（P〈0．05）；不良反应及并发症的发生率低于对照组（P〈0．05）；手术当天LY、PA均高于对照组（P〈0．05），并且较术前3d时明显升高（P〈0．05）；营养支持结束时的LY、Hb、TP、ALB及PA均高于对照组（P〈0．05），并且较术前及术前3d均无明显差异（P〉0．05），而对照组下降明显（P〈0．05）。结论：结、直肠癌病人术前用EN制剂行肠道准备效果好。术后早期EN，能促进胃肠道功能恢复，改善营养状况和细胞免疫功能，减少不良反应及术后并发症的发生。

葛根素对梗阻性黄疸患者肾功能的保护作用观察

目的观察葛根素对梗阻性黄疸(O J)患者肾功能的保护作用。方法O J伴肾功能损害患者56例,随机分为术后常规处理组(A组)和葛根素防治组(B组)各28例。另选28例无黄疸的需要手术治疗的肝胆疾病患者为对照组(C组)。观察术前及术后各组血浆内皮素(ET)及肾功能指标的变化。结果肌酐清除率(Cor)与ET呈负相关(r=-0.80,P<0.01)。与术前1d相比,术后第7天,B组ET显著降低(P<0.05),肌酐清除率(C cr)显著升高(P<0.01);A组手术前、后两指标差异无显著性(P均>0.05)。术后7d,A、B两组ET、C cr差异显著(P均<0.05)。结论葛根素可降低O J患者的血浆ET含量,改善肾脏组织的血液灌流量,对肾功能损害有一定的防治作用。

结直肠癌初治患者外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值与临床病理特征的关系及其预后价值分析

目的探讨结直肠癌初治患者外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)与临床病理特征及预后的关系。方法选取结直肠癌患者387例,观察患者术前NLR与临床病理特征及预后的关系。结果不同性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、浸润程度和分化程度结直肠癌患者的NLR比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);血小板≥350×10~9/L结直肠癌患者的术前NLR高于血小板﹤350×10~9/L的患者(P﹤0.05);TNM分期为Ⅲ、Ⅱ期结直肠癌患者的术前NLR均高于Ⅰ期患者(P﹤0.05);高NLR组患者的中位生存时间为35.41个月(95%CI:25.93~46.03),低于低NLR组的42.81个月(95%CI:33.39~58.10)(P﹤0.05);低NLR组TNM分期为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的中位生存期分别为42.65个月、42.01个月和41.04个月,差异无统计学意义(χ~2=2.382,P﹥0.05);高NLR组TNM分期为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者的中位生存期分别为37.03个月、36.52个月和35.02个月,差异无统计学意义(χ~2=3.082,P﹥0.05)。结论结直肠癌初治患者术前NLR与患者的临床病理特征及预后有一定关系,值得进一步研究。

成年大鼠非胰岛内Nestin阳性细胞的体外分离、培养及分化

目的 :建立成年大鼠胰腺非胰岛内 Nestin阳性细胞的体外分离培养及分化的方法。方法 :采用胰管内注入胶原酶消化法分离 3只成年大鼠胰腺组织 ,并经含 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液 (p H7.6 )体外培养 ,36 h后弃去悬浮细胞及胰岛 ,改用无 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液 (p H7.4 )加 b FGF、EGF及 N2 添加剂培养 ,18～ 2 2 d后收集新生类胰岛样细胞团并传代培养。挑选新分离的胰岛和新生类胰岛样细胞团每次各 4 0个 ,共 3次 ,采用1 31 放射免疫法测定分离的胰岛及新生类胰岛样细胞团的胰岛素分泌量 ,并计算葡萄糖刺激指数 (SI) ;免疫荧光细胞化学法检查贴壁细胞及传代后的新生类胰岛样细胞团 Nestin阳性细胞的表达。结果 :胰管内注入胶原酶消化法可获得功能、形态良好的胰岛 ;分离后胰腺组织在 p H7.6的 10 %胎牛血清 RPMI16 4 0液培养条件下 ,36 h内胰岛细胞不贴壁 ,贴壁细胞中大多数表达 Nestin阳性细胞 ,无胰岛素和胰高血糖素表达 ,但 Nestin表达不一 ,培养 18～ 2 2 d可见新生类胰岛样细胞团出现 ,新生类胰岛样细胞团传代后仍可见 Nestin阳性细胞。新分离的 4 0个胰岛在含糖 3.3、 16 .7m mol· L- 1培养液中胰岛素分泌量为 (6 3.6± 4 .0 )、 (2 0 2 .2± 14 .8) m IU· L- 1 ;而新生的4

胃癌初治患者术前外周血中性粒细胞和淋巴细胞比值与临床病理特征的关系及术后预后价值分析

目的探讨外周血中性粒细胞和淋巴细胞比值(NLR)与胃癌初治患者临床病理特征的关系及其对术后预后的价值。方法选取胃癌初治患者186例,采用系统性回顾法分析所有患者的临床资料及随访资料,记录患者的NLR值、性别、年龄、肿瘤情况及生存情况,并对不同NLR值患者的资料进行比较。结果 NLR升高组与NLR降低组患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况、肿瘤大小、病理分级、血清白蛋白水平及临床分期比较,差异有统计学意义(P﹤0.05);NLR升高组与NLR降低组患者的疗效比较,差异有统计学意义(P﹤0.05);通过Spearman等级相关分析可得,NLR值与胃癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分期、肿瘤大小及病理分级呈正相关(P﹤0.05);通过多因素Cox回归分析可得,NLR值、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分期、肿瘤大小及病理分级均为影响胃癌初治患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论 NLR与胃癌初治患者的各项临床病理特征呈正相关,且为影响胃癌初治患者预后效果的独立危险因素,可作为临床上预测胃癌初治患者预后效果的有效指标之一。

缺碘与非缺碘地区人群甲状腺体积的测定

目前,国内外对甲状腺体积的研究初见报道,但对缺碘地区与非缺碘地区整个人群甲状腺体积超声测量的研究国内尚未见报道。为了研究缺碘地区进行食盐加碘防治碘缺乏病的效果,我们对缺碘地区人群进行了甲状腺体积的超声测量,现将结果分析如下。对象与方法(一)检测对象1.缺碘地区:选择吉林市丰满乡青山村居民1385人,青山村外环境水碘含量为1μg/L。

缺碘地区长期供碘后甲状腺形态的研究

本文应用日本Atoka公司产浅表超声仪对缺碘地区长期供碘后和非缺碘地区甲状腺形态进行了各个切面的描记。结果是;居住在缺碘地区人群,甲状腺异常改变率占28.67%,而非缺碘地区为9.94%。二者差异非常显著,缺碘与非缺碘地区甲状腺改变异常率均女高于男。异常改变主要发生在>30岁年龄组;而<30岁年龄组则无差异。原因是从1958年后缺碘地区开始供应碘盐,机体缺碘状态已被纠正,而>30岁年龄组是供碘盐前出生并居住在病区,是因缺碘而造成的甲状腺损害,致病后虽供应了碘盐,然而甲状腺内部却残留了不同程度的病理损害,这些损害主要是形成腺瘤样甲状腺肿、结节性甲状腺肿、甲状腺钙化、甲状腺恶变及桥本氏病等。

肠内营养制剂辅助术前肠道准备效果的临床观察

目的探讨结、直肠癌患者术前使用肠内营养制剂辅助肠道准备替代传统肠道准备方法的可行性和效果。方法结、直肠癌择期手术病人42例,随机分为实验组和对照组,每组21例。实验组(营养制剂组)于术前3天开始口服整蛋白纤维型肠内营养混悬液作术前肠道准备,对照组(传统方法组)术前采用传统的半流食—流食—禁食补液方法进行肠道准备工作。比较两组手术前晚清洁洗肠的次数,肠道清洁度,以及肠道准备期间腹胀、腹痛、恶心、呕吐、乏力、虚脱等不良反应的发生情况;分别记录并比较肠道准备前后的体重、血总淋巴细胞记数(LYM)、血红蛋白(HB)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)及前白蛋白(PA)水平。结果两组肠道清洁度无显著差异。实验组手术前晚清洁洗肠(5.67±0.97)次,明显少于对照组的(7.62±1.66)次(P<0.01);不良反应的发生率低于对照组(P<0.05)。实验组肠道准备后的LYM、PA分别为(1785.81±401.48)×106/L和(170.76±16.32)mg/L,均高于对照组[(1529.29±290.80)×106/L和(158.24±18.56)mg/L,P<0.05],且较肠道准备前有所升高[(1548.95±346.58)×106/L和(153.86±17.67)mg/L,P<0.05];而体重、HB、TP、ALB与对照组比较无显著性差异。结论结、直肠癌患者以肠内营养制剂辅助术前肠道准备的效果优于传统方法,能够有效地改善患者的营养状况,减少不良反应的发生。

细胞周期蛋白依赖性激酶1在人结直肠癌组织中的表达意义

目的验证细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinases 1,CDK1)在人结直肠癌组织中的表达。方法以首都医科大学附属北京天坛医院2018年10月至2019年9月诊治的30例病理证实为结直肠癌患者的结直肠癌组织及癌旁组织标本为研究对象,检测CDK1在结肠癌及癌旁正常黏膜组织中的相对表达量(ΔCt)。结果CDK1在结直肠癌组织中均呈高表达,对比癌旁组织差异有显著性(P<0.05),CDK1在结直肠癌组织中比癌旁组织中表达增高4.69倍。结论CDK1属于调控细胞周期的基因,在结直肠癌肿瘤组织中高表达。