pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒的构建及在MCF-7乳腺癌细胞中的转染

目的构建pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒，并进行鉴定。为进一步研究Smad3在抑制乳腺癌生长机制中起到的作用提供实验基础。方法利用RT—PCR方法从MCF-7乳腺癌细胞中获得cDNA，应用PCR方法扩增、提取Smad3的基因片段，酶切后与pEGFP—C3真核表达载体连接，构建pEG—FP—C3／Smad3真核表达质粒，进行测序、酶切鉴定，表明质粒构建成功。将构建的质粒瞬时转染至MCF-7乳腺癌细胞中，通过荧光倒置显微镜观察、RT—PCR技术及Westenblot技术鉴定转染是否成功。结果本实验成功构建了pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒。结论pEGFP—C3／Smad3真核表达质粒瞬时转染到MCF-7细胞中，可使Smad3在基因与蛋白水平的表达显著上调。

前哨淋巴结活检与腋窝淋巴结清扫对乳腺癌手术患者生活质量及预后效果比较

目的研究比较前哨淋巴结活检(SLNB)与腋窝淋巴结清扫(ALND)对乳腺癌手术患者生活质量及预后效果。方法选择2018年4月—2019年1月在本院接受乳腺癌根治术的患者126例作为观察对象,按照随机数表法分成观察组和对照组两组,每组各63例。两组均常规给予乳腺癌根治术进行治疗,观察组予以SLNB术式,对照组予以ALND术式,随访1个月,对比两组并发症情况,术前及术后1个月肩关节的最大外展角及Neer评分,以及日常生活能力(ADL)及焦虑自评量表(SAS)评分。结果术后1个月观察组肩关节的最大外展角及Neer评分均分别明显高于对照组(P<0.05)。观察组并发症的总发生率为6.35%,较对照组的28.57%明显更低(P<0.05)。术后1个月观察组的ADL评分明显较对照组更高,而SAS评分则较对照组更低(P<0.05)。结论应用SLNB术式治疗乳腺癌患者的生活质量及预后效果均较好,安全性较高,还可改善患者的情绪状态,值得推广。

直肠癌腹腔镜全直肠系膜切除术的层面显露与团队配合

全直肠系膜切除术是直肠癌手术的“金标准”,国内外多项临床研究证实由经验丰富的外科医师实施腹腔镜全直肠系膜切除术与开腹手术具有相似的短期和长期结局。完成高质量的腹腔镜全直肠系膜切除术有赖于直肠周围筋膜的显露与辨识,在此过程中术者、助手以及扶镜手的团队配合至关重要。本文结合笔者团队手术的配合经验和流程,采用分场景的方式对直肠癌腹腔镜全直肠系膜切除术中层面的显露和团队的配合进行阐述。

吲哚菁绿引导下的腹腔镜右半结肠完整结肠系膜切除术层面解析与团队配合

完整结肠系膜切除术联合中央血管结扎已成为结肠癌根治手术的标准术式。随着结直肠手术进入微创手术与膜解剖时代,吲哚菁绿近红外光成像技术为肿瘤定位、淋巴结示踪、吻合口血供判断提供了进一步的操作保障,其在腹腔镜完整结肠系膜切除术中得到进一步应用。本文总结了吲哚菁绿引导下的腹腔镜右半结肠完整结肠系膜切除术流程及团队配合要点,对吲哚菁绿对淋巴结示踪和手术层面的判断加以阐述。

基于膜解剖理论的全直肠系膜切除层面显露与筋膜辨识

外科解剖学由器官解剖、血管解剖,向膜解剖时代发展。膜解剖是系膜与系膜床的解剖,强调通过筋膜间的平面完整切除系膜。全直肠系膜切除(TME)是膜解剖手术的典范,是中低位直肠癌手术治疗的金标准。TME手术的总体要求是通过一定的解剖标志进入正确的手术游离层面,保证直肠系膜的完整、环周切缘阴性、保留泌尿及生殖功能等。术者应深入理解TME手术相关的膜解剖名词及解剖标志,术中准确辨识直肠系膜筋膜、腹下神经前筋膜、Denonvilliers筋膜、直肠骶骨筋膜等筋膜结构,建议遵循模块化手术原则、三角牵拉原则和“由点及线、由线及面”的切开原则,以提高腹腔镜TME手术质量。

结肠癌组织microRNA-135a表达增高的临床意义与预后分析

目的 miRNA-135a作为miRNA-135家族的重要组成成员,其与多种肿瘤发生发展密切相关。但关于miRNA-135a的表达异常对结肠癌的临床意义及预后判断的研究较少。本研究旨在明确结肠癌组织miRNA-135a相对表达量与结肠癌患者临床病理因素的相关性及对患者生存预后的影响。方法收集2009-01-01-2009-12-31在哈尔滨医科大学附属第四医院行手术切除的结肠癌组织样本及距离肿瘤边缘5cm处癌旁黏膜组织样本共47对。在47对结肠癌样本中应用逆转录实时定量聚合酶链反应,检测miRNA-135a相对表达量,进一步分析其表达变化与结肠癌临床病理特征的相关性。并运用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析。结果 miRNA-135a在结肠癌组织中表达较癌旁组织显著升高,P=0.03。miRNA-135a表达量变化与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤分化程度、浸润深度及远处转移均无关,P值均>0.05。但在淋巴结转移组miRNA-135a表达明显升高,均值为0.49±0.25,而无淋巴结转移组为0.35±0.17,两组比较差异有统计学意义,P=0.03。在临床Ⅲ/Ⅳ期的患者中miRNA-135a表达较Ⅰ/Ⅱ期的患者显著升高,两组比较差异有统计学意义,P=0.04。Logistic二项回归分析显示,miRNA-135a高表达组增加了结肠癌患者淋巴结转移的风险,P=0.03。miRNA-135a高表达同时可增加结肠癌疾病进展(TNM分期)的风险,P=0.04。生存分析表明,21例miRNA-135a高表达组的中位生存期为(41±9.73)个月,26例miRNA-135a低表达组的中位生存期为(58±6.16)个月,两组比较差异有统计学意义,P=0.021。结论 miRNA-135a表达量增高与结肠癌疾病进展及不良预后正相关。miRNA-135a有望成为判断结肠癌预后的潜在靶点。

腹腔镜结直肠手术中输尿管及尿道损伤的预防及处理

腹腔镜结直肠手术中输尿管及尿道损伤不容忽视。对于有输尿管扩张、肾盂积水、局部进展期肿瘤、新辅助放化疗、肿瘤复发需再次手术者,术前应放置双J导管。经腹手术中应熟知与输尿管相关的结直肠膜解剖,在正确的筋膜平面游离,保证肾前筋膜的完整,可以有效防止输尿管损伤。术中或术后早期发现的输尿管损伤,应及时修复重建;延迟发现的损伤应行Ⅱ期修复。经会阴手术,寻找直肠尿道肌、Hiatal韧带等解剖标志,遵循“先易后难”的原则,可以避免尿道损伤。术中发现尿道损伤可行尿道修补术或尿道端端吻合术,术后发现者应先膀胱造瘘后期行尿道牵引术。